一种支链DNA的合成方法技术

本发明专利技术公开了一种支链DNA的合成方法。本发明专利技术突破了分支DNA合成的关键技术，解决了现有合成工艺只能合成直链不能合成分支的问题，在应用上可以提高DNA探针的荧光强度8～10倍，从而克服了传统的realtimePCR技术中的缺陷与不确定因素，无需抽提纯化RNA，无需反转录，无需PCR扩增，只要将样本用特定裂解液裂解后，经探针杂交与信号放大后即可迅速得到基因定量结果。另外，由于分支结构DNA打破了传统直链DNA概念，而且本发明专利技术合成工序和成本更低，效率更高，为分子生物学开辟了新的技术路线，提供更多的技术方案。更多的技术方案。更多的技术方案。

【技术实现步骤摘要】
一种支链DNA的合成方法


[0001]本专利技术涉及合成DNA、RNA、蛋白质及类似分子的改进的方法，特别涉及一种支链DNA的合成方法。

技术介绍

[0002]支链DNA(Branched DNA，缩写成bDNA)指一种人工合成的、由于在结构上整合了带有被保护羟基的核苷衍生物而形成的分支状的寡脱氧核糖核酸。
[0003]目前人工合成的DNA绝大多数都是直链型的寡脱氧核糖核酸，这种寡脱氧核糖核酸类似于一根直直的链条。而bDNA是一种离散的、高度分枝的、单分散的寡脱氧核糖核酸，带分支树枝状序列结构的DNA具有让人联想到树分枝的图案。基于bDNA具有树枝状大分子的特点，其具有以下几点优点：一、由于支链结构的形成了5'末端的数量成比例地增加，因此可以5'末端或者树枝状序列的中间成比例地增加修饰化学基团，比如在这些支链序列上修饰荧光信号，相比于普通的直链型的寡脱氧核糖核酸，支链DNA所产生的荧光信号可以成倍数地增加。二、树枝状分支结构的支链DNA对Taq聚合酶的外切活性具有降解抗性，可防止酶对支链的影响，经PCR反应后，可以由形成多个多重标记的单本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种支链DNA的合成方法，其特征在于，包括DNA合成单体，所述DNA合成单体的氨基基团由乙酰丙氨基进行保护，所述乙酰丙通过还原剂硼氢化钠将基还原。2.根据权利要求1所述的一种支链DNA的合成方法，其特征在于，所述DNA合成单体为核苷亚磷酰胺，所述核苷亚磷酰胺3
’
位的磷酸根由二异丙氨基和腈乙基修饰，5
’
位的羟基由二甲氧基三苯甲基修饰，所述A、C、G三种核苷酸的杂环各存在一个氨基基团，且分别被苯甲酰基和异丙酰基保护形成LEV
‑
dA、LEV
‑
dC、LEV
‑
dG三种核苷酸单体，所述5
’
位的二甲氧基三苯甲基由三氯乙酸进行脱除。3.根据权利要求1所述的一种支链DNA的合成方法，其特征在于，所述A、C、G核苷酸位点进行分支结构合成时，可将经乙酰丙酰基(LEV)保护的核苷酸单体合成到该位点上，合成上的LEV
‑
dA(或LEV
...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒙文宝，
申请(专利权)人：南宁捷尼斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：