以通过细胞凋亡的经细分化的核小体作为目标的自体荧光的液体活检法制造技术

本发明专利技术的目的提供一种通过液体活检法迅速且容易地进行疾病检测的方法，该方法将通过细胞凋亡而释放到血液中的片段化DNA(细分化核小体)作为疾病关连物质，并利用从血液等体液采集的甲基化片段化DNA(细分化核小体)的自体荧光。本发明专利技术是一种利用片段化DNA(细分化核小体)的自体荧光进行的液体活检法，该方法包括下列步骤：a)使具有试料中等离子体子(plasmon)金属介晶区域的测定基板与检体接触，将检体中的片段化DNA(细分化核小体)作为疾病关连物质并于等离子体子金属介晶捕捉电荷的步骤，其中，前述检体是将含有体液或细胞的培养液原状或稀释作成；b)对该等离子体子金属介晶上捕捉到的片段化DNA(细分化核小体)照射激发光，通过表面等离子体子增强效果而增强其自体荧光，决定片段化DNA(细分化核小体)的荧光菌落的荧光影像的固定测定区域(ROI)，通过比激发光滤器长波长域的滤器取得荧光菌落影像的步骤；c)采用该荧光菌落影像中显示规定阈值以上亮度的像素的步骤；d)演算于采用的测定区域的既定波长域中既定阈值以上的像素的总面积值、或采用的测定区域不同的二波长区域既定阈值以上的像素的总面积值的比(ratio)的步骤。步骤。步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】以通过细胞凋亡的经细分化的核小体作为目标的自体荧光的液体活检法


[0001]本专利技术有关一种液体活检法，其将通过细胞凋亡而释放于血中的经细分化的核小体作为目标，通过表面等离子体增强激发检测其自身荧光，并将表观遗传(epigenetics)信息作为以癌症为中心的疾病信息基础。

技术介绍

[0002]在凋亡细胞中，CAD(凋亡蛋白酶活化DNase)的抑制因子被分解，活化的CAD以核小体为单位切断DNA，因此可以说片段化为约200bp的倍数的DNA(非专利文献5)。该片段化DNA(细分化核小体)包含基因组DNA担负的遗传信息和表观遗传学的信息这两者。也就是，基因组DNA担负的遗传信息在碱基序列中，但即使碱基序列相同，有时也显示不同的信息。也就是，我们的细胞内的DNA以卷绕在组蛋白上的形式存在，如果组蛋白受到乙酰化等化学修饰，则DNA可能发生变化。另外，DNA自身也受到甲基化等修饰，由此作用发生变化。将显示这样的变化的遗传信息称为表观遗传，尽管构成一个个体的各种细胞具有从受精卵接受的相同的基因组DNA，但发挥不同的功能是因为细胞的表观遗传不同。表观遗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种利用自体荧光的液体活检法，包含下列步骤：a)使用具有试料中等离子体子金属介晶区域的测定基板，并使其与检体接触，将检体中的片段化DNA(细分化核小体)作为疾病关连物质，于等离子体子金属介晶捕捉电荷的步骤，其中，该检体为含有体液或细胞的培养液原状或经稀释作成；b)对该等离子体子金属介晶上捕捉到的片段化DNA(细分化核小体)照射激发光，通过表面等离子体子增强效果而增强其自体荧光，决定片段化DNA(细分化核小体)的荧光菌落的荧光影像的固定测定区域(ROI)，取得RGB任一区域的荧光菌落影像的步骤；c)采用该荧光菌落影像中显示既定阈值以上亮度的像素的步骤；d)演算于采用的测定区域的既定波长域中既定阈值以上的像素的总面积值、或采用的测定区域不同的二波长区域的既定阈值以上的像素的总面积值的比的步骤。2.根据权利要求1所述的液体活检法，其中，等离子体子金属介晶为包含过氧化银介晶的等离子体...

【专利技术属性】
技术研发人员：长谷川裕起，长谷川克之，
申请(专利权)人：有限会社米特奇，
类型：发明
国别省市：