快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用制造技术

本发明专利技术提供了快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用，所述代谢标志物包括有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸中的一种或多种。与现有技术相对比，本发明专利技术具有以下优点：本发明专利技术提供了快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用，该标志物来自于患者骨髓组织和骨髓上清液代谢物中的一种或多种的组合，包括苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；检测代谢标志物水平能够有效用于多发性骨髓瘤疾病的早期临床诊断，灵敏度高、快速便捷、结果准确可靠，可以为临床决策提供依据，同时为后续基础研究和临床研究提供一定基础，具有潜在的应用和研究价值。具有潜在的应用和研究价值。具有潜在的应用和研究价值。

【技术实现步骤摘要】
快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用


[0001]本专利技术涉及生物医药检测
，具体涉及快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用。
技术背景
[0002]多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma，MM）是一种克隆性浆细胞肿瘤，以分泌单克隆免疫球蛋白为特征的疾病。该疾病好发于中老年人，男性比女性多见，随着我国人口老龄化问题不断加重，MM发病率呈明显上升趋势。据统计，MM占所有癌症的1%、恶性血液系统肿瘤的10%，中位生存期为3～5年。MM患者通常有高钙血症、肾功能衰竭、贫血或溶骨性骨病变等。由于发病隐匿且临床症状表现多样，常会造成误诊和漏诊，误诊和漏诊率接近50%，使患者错过最佳治疗机会，最终导致病情延误。
[0003]代谢组学是研究生物体自身生理病理状态和生物体对外源性物质的生化效应的有力手段，它所关注的是代谢通路中分子量小于 1000 Da 的小分子代谢物的变化，它们是基因和蛋白的下游产物，反映的是机体已经发生了的状态，是基因和环境共同作用的结果，更接近于人体的表型。考虑到疾病的复杂性
‑
基因和环境交互作用，代谢物的这些特点使得代谢组学在疾病诊断和治疗等方面具有较强的优势和潜力。
[0004]目前，MM的主要诊断包括：血象指标、血浆蛋白电泳和免疫球蛋白、骨影像学检查和骨髓检查等，并结合骨痛、头晕、乏力等临床表现。由于MM的临床表现易与其他疾病混淆，而MM的实验室诊断普遍敏感性低、耗时长、费用较高及滞后，因此迫切需要开发一种特异、快速、经济可用于MM早期诊断、疗效评价、疾病进展的评估或筛查方法。

技术实现思路

[0005]针对上述存在的拘束局限性，本专利技术提出了一种快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用，克服了
技术介绍
中提到的不足和缺陷。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：本专利技术的专利技术点是提供快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用，所述代谢标志物为氨基酸组合物，包括有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸中的一种或多种。
[0007]代谢标志物的组合可以为单独的苯丙氨酸、单独的酪氨酸、单独的色氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸、苯丙氨酸+色氨酸、酪氨酸+色氨酸以及苯丙氨酸+酪氨酸+色氨酸。
[0008]最优选为，苯丙氨酸+酪氨酸+色氨酸。
[0009]与健康受试者相比，多发性骨髓瘤患者的骨髓组织和骨髓上清液中苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的水平显著升高。
[0010]进一步的，上述的应用，所述产品为用于多发性骨髓瘤检测或早期诊断的芯片、试纸或试剂盒。
[0011]进一步的，上述的应用，所述检测为定量检测对象生物样本中代谢标志物的含量水平并用来判断检测对象中多发性骨髓瘤的疾病状况。
[0012]进一步的，上述的应用，所述生物样本为骨髓组织或骨髓上清液。
[0013]进一步的，上述的应用，所述试剂通过以下的一种或多种方法检测生物样本中的代谢标志物水平：色谱法、光谱法、质谱法、化学分析法。
[0014]进一步的，上述的应用，所述色谱法包括高效液色谱法、薄层色谱法、气相色谱法；所述光谱法包括核磁共振光谱法、折射率光谱法、紫外光谱法、近红外光谱法；所述化学分析法包括电化学分析法、放射化学分析法。
[0015]进一步的，上述的应用，所述质谱法为高分辨质谱法，采用质谱法快速定量检测代谢标志物的方法是先采用色谱柱进行梯度洗脱，再于电喷雾离子源ESI正负离子PRM模式下采集数据；所述色谱柱梯度洗脱过程中，色谱柱规格为：Thermo Hypersil Gold C18 3
µ
m，2.1
×
100 mm，色谱柱温度为30℃，自动进样器的温度保持在4℃，采用A液为含0.1%甲酸及2.5mM乙酸铵的水，D液为乙腈，0
‑
0.5min，5%
‑
10% D；0.5
‑
1.0 min，10%
‑
30% D；1.0
‑
2.0min，30%
‑
95% D；2.0
‑
4.0 min，95%
‑
95%D；4.0
‑
4.5 min，95%
‑
5% D，4.5
‑
6.0min，5%
‑
5% D的过程进行洗脱，分析时间0
‑
6.0min，每次进样5μL，流速为0.3mL/min；所述电喷雾离子源（ESI）正负离子PRM模式采集数据过程中，喷雾电压为3500V（+）、2500V（
‑
），蒸发温度为350
º
C，鞘气为40Arb，辅助气为10Arb，毛细管温度为350
º
C，S
‑
lens RF水平为50，NCE为30；内标甲苯磺丁脲为269.09654/170.19791，苯丙氨酸为166.08626/120.08100，酪氨酸为182.08117/136.07578，色氨酸为205.09715/188.07057，内标普萘洛尔为260.16451/116.10709。
[0016]进一步的，上述的应用，所述质谱法中，是采用正、负两种离子扫描，一次进样分析所有代谢标志物和内标的方法进行检测。
[0017]进一步的，上述的应用，所述生物样品在检测前的预处理方式为：骨髓组织用含50%甲醇的超纯水按1：10的质量体积比进行超声破碎，获得骨髓组织破碎液；分别吸取骨髓组织破碎液和骨髓上清液100 μL加入含内标的沉淀剂500 μL，内标采用等比例混合后的甲醇和乙腈溶解，涡旋混匀30s，12000rpm离心10 min，吸取上清液，即得供试品溶液用于定量分析。
[0018]本专利技术的第二个专利技术点在于，还提供了一种能够有效降低氨基酸组合物含量的制品在制备用于辅助治疗多发性骨髓瘤的产品中的应用，所述制品是指能够有效降低骨髓组织和骨髓上清液中氨基酸组合物含量的复合制品；所述的氨基酸组合物为上述的氨基酸组合物；所述产品为食物、益生菌制剂或药物制剂。
[0019]进一步的，上述产品的筛选方法，所述筛选方法采用检测候选的食物、益生菌制剂或药物制剂干预前后的骨髓组织和骨髓上清液中氨基酸组合物的含量，并以氨基酸组合物是否降低做为标准进行筛选。
[0020]本专利技术的代谢标志物筛选过程及机制研究的流程图如图1所示。
[0021]与现有技术相对比，本专利技术具有以下优点：本专利技术提供了快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用，该标志物来自于患者骨髓组织和骨髓上清液代谢物中的一种或多种的组合，包括苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；检测代谢标志物水平能够有效用于多发性骨髓瘤疾病的早期临床诊断，灵敏度高、快速便捷、结果准确可靠，可以为临床决策提供依据，同时为后续基础研究和临床研究提供一定基础，
具有潜在的应用和研究价值。
[0022]同时，上述的氨基酸组合物，也同样可以应用于制备用于辅助治疗多发性骨髓瘤的产品，通过食物、益生菌制剂或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.快速诊断多发性骨髓瘤的代谢标志物及应用，其特征在于，所述代谢标志物为氨基酸组合物，包括有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述代谢标志物为苯丙氨酸+酪氨酸+色氨酸。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述产品为用于多发性骨髓瘤检测或早期诊断的芯片、试纸或试剂盒。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测为定量检测对象生物样本中代谢标志物的含量水平并用来判断检测对象中多发性骨髓瘤的疾病状况。5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述生物样本为骨髓组织或骨髓上清液。6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述试剂通过以下的一种或多种方法检测生物样本中的代谢标志物水平：色谱法、光谱法、质谱法、化学分析法。7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述色谱法包括高效液色谱法、薄层色谱法、气相色谱法；所述光谱法包括核磁共振光谱法、折射率光谱法、紫外光谱法、近红外光谱法；所述化学分析法包括电化学分析法、放射化学分析法；所述质谱法为高分辨质谱法，采用质谱法快速定量检测代谢标志物的方法是先采用色谱柱进行梯度洗脱，再...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘丽宏，沈国林，王晓雪，宫丽丽，刘爱军，成虎，程龙浩，余江灵，
申请(专利权)人：中国检验检疫科学研究院，
类型：发明
国别省市：