PERK在预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变中的应用制造技术

本发明专利技术公开了PERK在预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变中的应用。本发明专利技术发现，抑制PERK的表达或活化水平可显著拮抗寒冷暴露诱导的生殖周期紊乱效应和卵泡发育异常效应。本发明专利技术首次证实PERK可作为预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变的新靶点。殖功能紊乱或卵巢病变的新靶点。殖功能紊乱或卵巢病变的新靶点。

【技术实现步骤摘要】
PERK在预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及PERK在预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变中的应用。

技术介绍

[0002]环境温度的改变能够影响正常机体的生理功能，寒冷作为一种重要的环境因素可以引发机体多个系统的损伤，对人们的健康造成严重的威胁。暴露于寒冷的环境被广泛认为是人类健康的全球性挑战，探讨减少寒冷应激对机体影响的措施具有十分重要的意义。鉴于人体对寒冷的适应能力不如适应高温的能力强(V Klenerov
á
,Jana Juroviov
á
,Kaminsky O,et al.Combined restraint and cold stress in rats:effects on memory processing in passive avoidance task and on plasma levels of ACTH and corticosterone[J].Behavioural Brain Research,2003,142(1
‑
2):143
‑
149.)，寒冷损伤和适应历来受到医学界高度重视。
[0003]有研究表明，寒冷环境会对生殖系统造成影响。慢性冷应激时，卵巢内神经营养因子介导的交感神经激活，导致卵泡发育变化而引起生殖功能损伤。同时实验证实，低温对精子发生和精子活力有迅速干扰作用，大鼠致冷后睾丸内氧的活力显著降低，睾丸组织缺氧，对蛋白质和酶的合成与活性均有影响，从而影响精子的形成和成熟，增强了生殖细胞膜脂质的过氧化反应，损害生殖细胞并导致其凋亡增加。目前寒冷损伤的治疗和预防措施仍不完善，运用分子生物学技术阐明寒冷损伤的分子机制，研究与寒冷损伤密切相关的基因，并进一步探索相应的防治方法，对提高寒冷环境工作人员的生殖健康保健具有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变的新方法，为实现该目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0005]本专利技术第一方面提供了一种可用于预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变的抑制剂，所述的抑制剂为PERK的抑制剂。
[0006]本专利技术中所述的“预防”表示防止有患病风险的对象中的疾病的出现或者已消失的疾病的复发。
[0007]术语“治疗”是指在显著程度上改善本文提及的疾病或病症或伴随其的症状。
[0008]进一步，所述的抑制剂包括核酸抑制剂，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子。
[0009]在本文中，除非另有说明，否则术语“包含”、“包括”和“含有”为开放式表述，意味着除所列出的要素、组分和步骤外，还可涵盖其它未指明的要素、组分和步骤。
[0010]进一步，所述的抑制剂为核酸抑制剂。
[0011]进一步，所述的核酸抑制剂包括反义寡核苷酸、siRNA、miRNA、核酶。
[0012]术语“反义寡核苷酸”是指进行了某些化学修饰的短链核酸(由约15
‑
25个核苷酸组成)，它的碱基顺序排列与特定的靶标序列互补，进入细胞后可按照Watson
‑
Crick碱基互
补配对的原则与靶标序列形成双链结构。
[0013]本专利技术中，“互补”指的是，两个核苷酸在杂交条件下能够配对，例如，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)或尿嘧啶(U)之间的关系，以及胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)之间的关系。
[0014]术语“核酶”是指具有催化特定生物化学反应的功能的RNA分子。
[0015]术语“siRNA”是指能够抑制靶基因表达、包括正义RNA片段区域和反义RNA片段区域的核糖核酸(RNA)。
[0016]术语“miRNA”是指真核生物中广泛存在的一种长约21到23个核苷酸的核糖核酸(RNA)分子，可调节其他基因的表达。
[0017]在本专利技术中，反义寡核苷酸、核酶、siRNA或miRNA可被设计成靶向目的基因或者调节序列，例如需要抑制其表达的基因或其调控序列，以便抑制或降低其表达。所针对的基因或其调控序列可以是需要抑制或降低其表达的任何基因或其调控序列，例如来自病原体的、或者参与疾病形成和发展的那些，特别是靶向PERK。本专利技术的反义寡核苷酸、核酶、siRNA或miRNA可按照常规方法设计。
[0018]siRNA的常规设计方法可参考文献(如：ReynoldsA等，自然生物技术，2004年，22卷：326
‑
330)或Amhion、Qiagen等公司网站的公开资料。miRNA的常规设计方法可参考文献(Lo HL等，基因治疗，2007年，14卷：1503
‑
1512页)，选择靶序列的方法与siRNA的设计方法相似，例如可将设计的含有靶序列的正义链及相应的反义链替换到pri
‑
microRNA上，使构建的miRNA可阻止含有靶序列的mRNA的表达。核酶的常规设计方法可参考文献(Haseloff J等，自然，1988年，334卷：585
‑
591页)，例如可将与靶序列的前后序列互补的核苷酸序列分别置于核酶保守性核心的序列(如锤头结构)前后，使构建的核酶能在靶序列处切割含有靶序列的核酸。反义寡核苷酸的常规设计方法可参考文献(Matveeva OV等，核酸研究，2003年，31卷：4989
‑
4994页)。
[0019]术语“正义链”指的是，具有和基因编码链相同的序列的核苷酸链。
[0020]术语“反义链”是指siRNA的这样一条链，所述链包含与靶序列完全或基本互补的区域。其中，术语“互补区域”是指反义链上与靶mRNA序列完全或基本互补的区域。在互补区域与靶序列不完全互补的情况下，错配可以位于分子的内部或末端区域中。通常，最耐受的错配位于末端区域中，例如，在5
’
和/或3
’
端的5、4、3、2或1个核苷酸内。对错配最敏感的反义链部分被称为“种子区”。
[0021]本专利技术的反义寡核苷酸、核酶、siRNA或miRNA包括对构成反义寡核苷酸、核酶、siRNA或miRNA的磷酸骨架和/或核糖和/或碱基等构成部分进行化学修饰的修饰产物，修饰方法是本领域已知的，适合于本专利技术的修饰可选自包括下列的组：锁核酸(LNA)、非锁核酸(UNA)、2
′‑
甲氧基乙基、2
′‑
O
‑
烷基、2
′‑
O
‑
甲基、2
′‑
O
‑
烯丙基、2
′‑
C
‑
烯丙基、2
′‑
氟、2
′‑
脱氧、2
′‑
羟基、磷酸骨架、荧光探针、配体修饰或其组合。
[0022]进一步，所述的核酸抑制剂为siRNA。
[0023]进一步，所述的siRNA的序列如SEQ ID NO.1所示。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可用于预防或治疗雌性生殖功能紊乱或卵巢病变的抑制剂，其特征在于，所述的抑制剂为PERK的抑制剂。2.根据权利要求1所述的抑制剂，其特征在于，所述的抑制剂包括核酸抑制剂，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子。3.根据权利要求2所述的抑制剂，其特征在于，所述的抑制剂为核酸抑制剂，优选的，所述的核酸抑制剂包括反义寡核苷酸、siRNA、miRNA、核酶。4.根据权利要求3所述的抑制剂，其特征在于，所述的核酸抑制剂为siRNA，优选的，所述的siRNA的序列如SEQ ID NO.1所示。5.根据权利要求1所述的抑制剂，其特征在于，所述的抑制剂为GSK2606414或其立体异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或其水合物。6.一种药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物包含权利要求1
‑
5任一项所述的抑制剂和药学上可接受的载体。7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述的药学上可接受的载体包括稀释剂、缓冲剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、包囊剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、喷雾剂、透皮吸收剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、着色剂、矫味剂或吸附载体。8.如下任一项所述的应用：(1)权利要求1
‑
5任一项所述的抑制剂、或权利要求6或7所述的药物组合物在制备预防或治疗雌性生殖功能紊乱的药物中的应用；(2)权利要求1
‑
5任一项所述的抑制剂、或权利要求6或7所述的药物组合物在制备预防或治疗卵巢病变的药物中的应用；(3)检测样本...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋伦，刘琨，丁萌楠，卢亚蓉，黄欣，邢陈，张艺凡，王伟，张冲冲，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：