一种自淬灭荧光的引物及其设计方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种自淬灭荧光的引物及其设计方法及应用。所述引物的序列含有“TG”碱基、“GT”碱基、“CG”碱基或“GC”碱基，“TG”碱基、“GT”碱基、“CG”碱基或“GC”碱基的T碱基或C碱基标记有荧光染料；所述引物的序列不含有“TG”碱基、“GT”碱基、“CG”碱基或“GC”碱基的引物序列，引物的5

【技术实现步骤摘要】
一种自淬灭荧光的引物及其设计方法及应用


[0001]本专利技术涉及荧光PCR
，更具体地，涉及一种自淬灭荧光的引物及其设计方法及应用。

技术介绍

[0002]实时荧光PCR检测技术同时具备灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低等多种优点，是病原微生物检测最常用的方法。目前多重荧光PCR方法基于上是荧光探针技术或荧光染料法进行检测。基于荧光探针法的多重PCR技术，是指在多重PCR扩增时，在加入多对引物的同时加入不同荧光标记的特异性的探针，探针的两端分别标记不同的荧光基团和淬灭基团，在PCR扩增过程中依赖DNA聚合酶的5
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外切酶活性将探针酶切水解，使荧光基团和淬灭基团分开，从而产生不同的荧光信号，最后根据荧光信号的差别来区分所检测物质；缺点是，相同荧光通道不能区分不同的检测物质、检测突变的能力不足、不能进行溶解曲线分析。基于荧光染料的多重PCR检测方法，是指在多重PCR扩增时加入荧光染料，然后进行熔解曲线分析，根据不同检测物质TM值的不同来区分相应的检测物质，缺点是，只能进行单通道检测，容易产生非特异性。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种自淬灭荧光的引物，其特征在于，所述引物的序列为16～30个碱基；所述引物的序列含有“TG”碱基、“GT”碱基、“CG”碱基或“GC”碱基，“TG”碱基、“GT”碱基、“CG”碱基或“GC”碱基的T碱基或C碱基标记有荧光染料；所述引物的序列不含有“TG”碱基、“GT”碱基、“CG”碱基或“GC”碱基的引物序列，引物的5
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端额外设置有含“TG”碱基或“GT”碱基的接头序列，所述接头序列中“TG”碱基或“GT”碱基的T碱基标记有荧光染料，或者引物的5
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端额外设置有含“CG”碱基或“GC”碱基的接头序列，所述接头序列中“CG”碱基或“GC”碱基的C碱基标记有荧光染料。2.根据权利要求1所述引物，其特征在于，所述引物的3
’
端无封闭修饰。3.根据权利要求1所述引物，其特征在于，所述引物长度为18～28个碱基。4.根据权利要求1所述引物，其特征在于，所述引物的序列含有“TG”碱基，“TG”碱基的T碱基标记有荧光染料；所述引物的序列不含有“TG”碱基的引物序列，引物的5
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端额外设置有含“TG”碱基的接头序列，所述接头序列中“TG”碱基的T碱基标记有荧光染料。5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：周玲玲，麻昕雨，温清娜，
申请(专利权)人：广州博懿瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：