一种PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途制造技术

本发明专利技术提出了一种PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途。实现了PLK1抑制剂对肾间质纤维化的保护作用。所述PLK1抑制剂通过抑制自噬流抑制肾间质成纤维细胞的活化，抑制肾小管上皮细胞的partial

【技术实现步骤摘要】
一种PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途


[0001]本专利技术涉及PLK1抑制剂的新用途，具体地涉及一种PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途。

技术介绍

[0002]近年来，随着社会经济发展和人类生活方式的改变，慢性肾脏病(CKD)发病率逐年上升，成为不容忽视的世界性的公共健康问题。在我国，约有1.25亿人患有CKD，已成为影响我国国民健康的主要疾病。CKD具有患病率高、治疗费用昂贵、死亡率高等特点，CKD一旦进入终末期肾病(ESRD)，则必须依赖肾脏替代治疗，如血液透析、腹膜透析或肾移植来维持生命。
[0003]肾脏纤维化是多种CKD发展至ESRD的共同病理途径，慢性肾脏病的病理过程主要可以归结为以肾脏小管损伤启动成纤维细胞参与的修复过程为起始，小管修复的不充分及成纤维细胞的过度活化导致肾脏结构被细胞外基质(ECM)替代，从而导致整个肾脏的萎缩，肾功能的丧失。成纤维细胞的过度活化和小管细胞部分上皮
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间质表型转化(partial
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Epithelial
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Mesenchymal Transition，partial
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EMT)是肾功能恶化的重要因素，也是减缓疾病进展的重要靶标。目前，对慢性肾病的防治尚缺乏有效的药物，也未见通过细胞周期蛋白干预肾脏成纤维细胞活化治疗肾脏纤维化的药物。
[0004]Polo
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like kinase
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1(PLK1)属于Polo样激酶家族，是一类广泛存在于真核细胞中的丝氨酸/苏氨酸激酶，该家族都在N端有一个高度保守的具有催化活性的激酶域，和C端一到两个无催化功能的Polo
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box domain调节域。目前在哺乳动物发现的PLK家族成员有5个，PLK
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1(also known as STPK13)，PLK
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2(also known as SNK)，PLK
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3(also known as CNK，FNK and PRK)，PLK
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4(also known as SAK and STK18)and PLK
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5，其中PLK1的研究最为深入。PLK1在细胞周期各个阶段表达不同。在G2期，PLK1在CDK1作用下表达开始上调，在有丝分裂期达到高峰。激活的PLK1参与G2/M期的进展、有丝分裂启动、退出及胞质分裂。目前，PLK1的应用主要集中在肿瘤发生发展的治疗上。此外，有文献报道抑制PLK1还存在独立于细胞周期作用之外的作用，可以减弱血管平滑肌弹力。我们的研究表明在肾间质纤维化模型中，PLK1表达量升高，体内给予PLK1抑制剂BI6727，小鼠的肾脏纤维化程度明显缓解。这些都支持PLK1是肾间质纤维化的潜在治疗靶点。
[0005]BI6727是PLK1抑制剂，已作为肿瘤治疗药物已进入三期临床试验,有很好的应用前景。本研究从体内、外证明低剂量BI6727通过阻断自噬流抑制成纤维细胞的活化，并抑制肾小管上皮细胞的partial
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EMT,减少胞外基质的沉积，是一种潜在的肾间质纤维化相关病症的治疗药物。目前尚无BI6727用于肾间质纤维化相关病症治疗的相关报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了一种PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途。实现了PLK1抑制剂对肾间质纤维化的保护作用。
[0007]一种PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途。
[0008]所述PLK1抑制剂通过抑制自噬流抑制肾间质成纤维细胞的活化和肾小管上皮细胞的partial
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EMT，从而减少胞外基质的沉积，进而缓解肾脏纤维化。
[0009]所述的PLK1抑制剂为BI6727。
[0010]所述的肾纤维化相关病症为慢性肾脏病、肾间质纤维化中的任意一种。
[0011]所述的肾间质纤维化为单侧输尿管结扎(UUO)造成的肾间质纤维化，其中，在单侧输尿管结扎造成的肾间质纤维化小鼠肾组织中检测到PLK1蛋白水平显著高表达。
[0012]在TGF
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β1诱导的增殖活化的成纤维细胞中检测到PLK1蛋白水平显著高表达。BI6727在制备针对减轻肾间质纤维化相关病症的药物中的应用，从而为肾间质纤维化相关病症提供一种新的候选化合物。
[0013]通过药效试验证明，BI6727能够抑制UUO梗阻肾组织中自噬流的上调。BI6727能够抑制TGF
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β1诱导的成纤维细胞中自噬流上调。BI6727能够抑制单侧输尿管结扎造成的肾间质纤维化小鼠肾组织胞外基质沉积。BI6727能够降低TGF
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β1诱导的FN、I型以及III胶原蛋白的高表达。BI6727能够抑制成纤维细胞的活化。BI6727能够抑制肾小管上皮细胞partial
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EMT。因此BI6727应用于减轻肾间质纤维化相关病症具有显著效果。
附图说明
[0014]图1为Western blot法检测小鼠肾脏UUO术后一周小鼠左侧肾脏组织中LC3的蛋白水平图。
[0015]图2为q
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PCR法检测UUO术后一周小鼠左侧肾脏组织中FN、CollagenI、CollagenIII、α
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SMA的mRNA表达水平图。
[0016]图3A为UUO术后一周小鼠左侧肾脏组织中进行Masson染色结果图。
[0017]图3B为Western blot法检测UUO术后一周小鼠左侧肾脏组织中FN、α
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SMA的蛋白水平图。
[0018]图3C为免疫组化法检测UUO术后一周小鼠左侧肾脏组织中CollagenIII沉积水平图。
[0019]图4A为乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒检测不同浓度的BI6727(图中简称BI)对鼠肾脏成纤维细胞(NRK
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49F)的安全浓度范围。
[0020]图4B为BI6727(图中简称BI)抑制TGF
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β1诱导的NRK49F细胞中LC3的蛋白水平图。
[0021]图4C为BI6727(图中简称BI)抑制TGF
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β1诱导的NRK49F细胞自噬流LC3
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dot堆积的动态分布荧光图。
[0022]图4D为BI6727(图中简称BI)处理后的NRK49F细胞溶酶体的pH值升高，并能够抑制TGF
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β1诱导的NRK49F细胞溶酶体pH值降低。
[0023]图4E为BI6727(图中简称BI)处理后抑制了的NRK49F细胞溶酶体膜上依赖ATP的质子泵V
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ATP酶(V
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ATP)的磷酸化。
[0024]图5为BI6727(图中简称BI)抑制TGF
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β1诱导的NRK49F细胞活本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途。2.根据权利要求1所述的PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途，其特征在于：所述PLK1抑制剂通过抑制自噬流抑制肾间质成纤维细胞的活化，抑制肾小管上皮细胞的partial
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EMT，从而减少胞外基质的沉积，进而缓解肾脏纤维化。3.根据权利要求1所述的PLK1抑制剂在制备用于缓解肾脏纤维化药物中的用途，其特征在于：所述的PLK...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玥，杜阳，郭燕，陈爽，钱云，贾占军，张爱华，黄松明，
申请(专利权)人：南京市儿童医院，
类型：发明
国别省市：