一种提高植物基础抗逆的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高植物抗逆性的方法。本发明专利技术将含有CSD1+CCS双基因的表达载体和CSD1+反义CCS双基因的表达载体转化植物，得到抗寒、抗盐和抗镉胁迫的植物。本发明专利技术通过在植物细胞中用载体引入CSD1+CCS双基因和CSD1+反义CCS双基因，来提高铜锌超氧化物歧化酶的活性从而提高植物的抗逆性，为培育高抗的植物提供了一条重要途径。供了一条重要途径。

【技术实现步骤摘要】
一种提高植物基础抗逆的方法


[0001]本专利技术涉及生物工程领域中提高植物基础抗逆的一种方法。

技术介绍

[0002]植物遭受到严重的环境胁迫时，会产生大量的ROS(活性氧)，当细胞利用活性氧的能力低于活性氧的生成量时，就会产生氧化胁迫。植物可以通过产生抗氧化剂来清除ROS。超氧化物歧化酶(SOD)是一种普遍存在的金属酶，能有效的清除ROS。目前发现的SOD有以下几种：Cu/ZnSOD、MnSOD、FeSOD以及NiSOD。其中Cu/ZnSOD(SOD1)是生物体中主要的超氧化物清除剂。CCS是一种铜伴侣蛋白，它能将铜输送到Cu/ZnSOD并催化其形成分子内二硫键，从而使Cu/ZnSOD成熟且具有活性。
[0003]Cu/ZnSOD是植物中线粒体、细胞核和细胞质主要的超氧化物清除剂，从原核生物到真核生物都有关于Cu/ZnSOD在氧化应激反应中的作用的研究，在植物中也发现了Cu/ZnSOD 在参与氧化应激反应中的积极作用。Chrystalla等人发现藜苜蓿在遭受到干旱胁迫和螨虫侵染时，Cu/ZnSOD的表达会增加以响应胁迫，参与抗逆反应本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：将含有Cu/ZnSOD+CCS双基因的表达载体和/或将含有Cu/ZnSOD+反义CCS双基因的植物表达载体转化植物，得到抗逆性提高的植物。2.根据权利要求1所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：所述Cu/ZnSOD+CCS是具有SEQ ID NO:3的多核苷酸序列。3.根据权利要求1所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：所述Cu/ZnSOD+反义CCS基因是具有SEQ ID NO:8的多核苷酸序列。4.根据权利要求1所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：表达载体的出发载体为Ti类质粒载体。5.根据权利要求4所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：所述的Ti质粒载体为植物二元双基因表达载体PBDGR。6.根据权利要求1所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：所述含有Cu/ZnSOD+CCS基因的表达载体为pBD
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EuCSD1+CCS；所述含有Cu/ZnSOD+反义CCS基因的表达载体为pBD
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EuCSD1+antiCCS。7.根据权利要求1所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：转化方法为农杆菌介导转化法、基因枪介导转化法或花粉管通道法。8.根据权利要求1所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：所述植物为草本植物或木本植物。9.根据权利要求8所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：所述木本植物为桉树。10.根据权利要求1至9任一项所述的一种提高植物抗逆性的方法，其特征在于：所述的抗逆包括抗寒、耐盐和耐重金属镉中的至少一种。11.一种提高植物抗逆性的方法，包括如下步骤：1)pBD
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EuCSD1+CCS植物二元表达载体的构建植物二元表达载体选用pBDGR，将pBDGR和pMD
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EuCSD1的质粒用XhoI和HpaI进行双酶切，回收pBDGR和pMD
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EuCSD1质粒双酶切产物，10
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15℃连接过夜，热激法转化大肠杆菌后平板培养，挑取pBD
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EuCSD1转化液涂布的LB平板中单菌落，接种于含有40
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60mg/L的Kan的LB液体培养基中，35
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37℃150
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250rpm摇床培养14
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16h；提取pBD
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EuCSD1质粒，经XhoI和HpaI双酶切凝胶检测载体是否构建成功；PCR扩增ZCCS的质粒为模板，和引物LoCS1：5
’
CTCT AGAATGGCATTTCTGAGGT 3
’
，LoCS2：5
’
CCCCGGGTCAGACTTTGCTG GTG 3
’
，凝胶回收ZCCS片段与pMD
‑
1...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵艳玲，刘红艳，姚婕，阮珂鑫，
申请(专利权)人：华侨大学，
类型：发明
国别省市：