环状核酸分子、其制备方法以及核酸探针和检测方法技术

发明专利技术公开了一种环状核酸分子、其制备方法以及核酸探针和检测方法，涉及分子检测技术领域。该环状核酸分子其不含碱基C，其线性核苷酸序列为(GGTTATTATT)

【技术实现步骤摘要】
环状核酸分子、其制备方法以及核酸探针和检测方法


[0001]本专利技术涉及分子检测
，具体而言，涉及一种环状核酸分子、其制备方法以及核酸探针和检测方法。

技术介绍

[0002]滚环扩增Rolling Circle Amplification(RCA)是一种基于核酸的生物信号放大技术，能以环状核酸分子为模板，在聚合酶作用下将环状核酸分子复制上千上万倍，使得低浓度目标分子介导产生的信号放大从而能被检测。与目前最广泛应用的PCR技术相比，RCA由于具有不需要热循环步骤以及不需要特殊的设备的优势，目前已经广泛应用于生物标志物的检测。构建超快速且高灵敏的RCA技术对于床旁诊断(Point
‑
Of
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Care Testing,POCT)和生物传感领域尤其重要。但现有的滚环扩增的效率较低。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种环状核酸分子、其制备方法以及核酸探针和检测方法。本专利技术提供的环状核酸分子仅含有三种碱基，具有最少二级结构，以此序列为模板进行RCA，具有较高的扩增效率，可广本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于RCA反应作为模板获取长单链核酸分子的环状核酸分子，其特征在于，其不含碱基C，其线性核苷酸序列为(GGTTATTATT)
n
，其中n≥3；n为整数。2.根据权利要求1所述的环状核酸分子，其特征在于，n＝4
‑
6，优选地，n＝5。3.根据权利要求1或2所述的环状核酸分子，其特征在于，所述环状核酸分子的线性核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示：GGTTATTATTGGTTATTATTGGTTATTATTGGTTATTATTGGTTATTATT。4.一种用于制备如权利要求1
‑
3任一项所述的环状核酸分子的前体核酸分子，其特征在于，其为直链结构，其通过成环反应形成如权利要求1
‑
3任一项所述的环状核酸分子；优选地，所述前体核酸分子的核苷酸序列为P
‑
(GGTTATTATT)
n
，其中n≥3，n为整数，P为磷酸基团。5.根据权利要求4所述的前体核酸分子，其特征在于，n＝4
‑
6，优选地，n＝5。6.如权利要求1
‑
3任一项所述的环状核酸分子的制备方法，其特征在于，其包括：成环反应步骤，所述成环反应步骤包括：将权利要求4或5所述的前体核酸分子置于成环反应体系中进行反应以获得所述环状核酸分子。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述成环反应体系含有环化连接酶、ATP、氯化锰、以及缓冲液。8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于，进行环化反应的条件为：58
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62℃孵育0.5
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1小时，80
‑
99℃孵育8
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12分钟。9.一种进行RCA反应以获取长单链核酸分子的方法，其特征在于，其包括：使用权利要求1
‑
3任一项所述的环状核酸分子作为模板进行RCA反应；优选地，进行RCA反应所用的引物序列如SEQ ID NO.4所示。10.由权利要求9的所述的方法得到的长链核酸分子。11.一种携带检测信号的核酸探针，其特征在于，其包括：至少一个主核酸链、以及至少一个信号核酸链；其中，所述主核酸链为权利要求10所述的长单链核酸分子；所述信号核酸链与所述主核酸链直接结合或间接结合，所述信号核酸链修饰有可被检测的信号标记物；所述主核酸链的端部用于与检测分子结合，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘国珍，龙轶，
申请(专利权)人：香港中文大学深圳，
类型：发明
国别省市：