乌饭树叶多糖及其制备方法、应用技术

本发明专利技术公开了乌饭树叶多糖及其制备方法、应用，乌饭树叶多糖组分相对分子质量为81563Da，其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖，摩尔比为2.13:1.56:1:1.27；乌饭树叶多糖VBLP

【技术实现步骤摘要】
乌饭树叶多糖及其制备方法、应用


[0001]本专利技术涉及一种乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2及制备方法，属于天然植物活性多糖的提取分离
本专利技术还涉及上述多糖的应用。

技术介绍

[0002]美拉德反应是食品加热或贮存过程中，还原糖中羰基(来源于糖或油脂氧化酸败产生的醛和酮)和蛋白质的氨基或游离氨基酸经缩合、聚合反应生成类黑色素的反应。晚期糖基化末端产物(Advanced Glycation End Products，AGEs)是美拉德反应的产物之一。
[0003]在食品加工工业，常通过糖基化反应提高蛋白质的功能特性(如起泡性、乳化性、抗氧化性等)，改善食品的风味、色泽和口感，但食品体系或食品蛋白在糖基化过程中也会形成对人体有害的AGEs，降低氨基酸的营养价值。研究发现，长期摄入富含AGEs的食物，会导致AGEs在机体中的积累，加速血管中胶原蛋白的交联，促进活性氧和活性碳自由基的形成，增强胰岛素抵抗，促进促炎症反应等，从而增加阿尔茨海默病、糖尿病、炎症、心血管疾病、视网膜病变等系列慢性疾病的发病率。添加AGEs抑制剂降低食品在热加工过程中的形成是提高食品安全，促进人体健康的有效方法之一。AGEs抑制剂包括合成和天然化合物两类，其中植物来源的天然AGEs抑制剂因其种类多、效果较好、副作用小等优点已成为国内外的研究热点。研究发现石榴皮提取物、欧洲布什蔓越莓汁提取物、咖啡酸、儿茶素、鞣花单宁等植物提取物和多酚类化合物可有效降低饼干焙烤过程中呋喃和丙烯酰胺的形成；添加白藜芦醇、表儿茶素和迷迭香酸，可使饼干中荧光性AGEs的形成量降低。
[0004]UHT奶经过超高温瞬时灭菌后，具有常温贮存时间长、销售方便的优点，但是UHT奶加工过程中会产生对人体有害的产物AGEs，如何降低UHT奶加工过程中产生的AGEs是急需解决的问题，但是针对UHT奶在生产过程中AGEs的控制鲜见报道。
[0005]乌饭树(Vaccinium bracteatum Thunb.)又名南烛，古称染菽，属杜鹃花科常绿灌木，是一种药食兼用的传统植物资源。乌饭树叶含花青素、类黄酮化合物、有机酸、多糖、脂溶性成分、微量元素等成分，具有抗肿瘤、抗炎、抗凝血、降血糖等药理活性。乌饭树叶多糖(Polysaccharides from Vaccinium bracteatum Thunb.Leaves，VBLP)的研究主要体现在提取、特性、应用及生物活性的研究等方面。邓梅忠研究了水提取
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超声萃取乌饭树树叶多糖工艺及在卷烟中的应用，结果表明乌饭树树叶多糖能改善烟气质,改善余味。程素娇等人利用响应面分析法优化乌饭树树叶多糖的提取工艺。利用回归分析优化得到了最佳提取工艺，多糖纯度达到38.2％。徐啟馨采用连续分级提取了乌饭树树叶多糖，测定了乌饭树树叶多糖的组成成分和基本特性，研究了乌饭树树叶多糖的流变学特性和乳化活性，分析了乌饭树树叶多糖的抗氧化活性，并对乌饭树树叶多糖四种组分的上述性质进行了比较。王立等人研究表明乌饭树叶多糖降血糖机理主要通过促进胰岛素分泌、修复糖尿病小鼠受损胰岛β细胞和提高糖尿病小鼠抗氧化能力实现。方斌等人研究发现乌饭树叶多糖可降低2型糖尿病小鼠血糖、血脂、炎症因子，促进胰岛素释放，调节NF
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κB、PPARγ蛋白表达，改善胰岛素抵抗。公开号为CN105777927A的专利文献公开了乌饭树叶多糖的分离纯化方法，但是仅仅
是对乌饭树叶多糖的初步分离纯化，并缺少对其结构特征进行表征，迄今，尚未发现乌饭树叶多糖的抗糖化作用的报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种天然成分中具有抗糖化活性成分的乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2、制备方法及其应用。
[0007]为达到上述目的，本专利技术的技术方案是：
[0008]乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2，其结构特征为：相对分子质量为81563Da，其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖，摩尔比为2.13:1.56:1:1.27。
[0009]乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2的制备方法，其包括如下步骤：
[0010](1)粗多糖的提取
[0011]乌饭树叶清洗干净，粉碎，按照料液比为1:20(g/mL)加入水，在80℃条件下提取40min，提取结束后离心得上清液，50℃减压浓缩，向浓缩液加入四倍体积无水乙醇，4℃静置24h沉淀多糖，10000r/min离心5min，收集得到沉淀，沉淀冷冻干燥后得到乌饭树叶粗多糖；
[0012](2)粗多糖的纯化
[0013]将粗多糖配制成浓度为10mg/mL的溶液，加入Sevage试剂脱蛋白3次，然后再通过透析袋(截留分子量为3500Da)透析24h，透析液冷冻干燥得到纯化多糖；
[0014](3)乌饭树叶多糖组分的分离
[0015]将乌饭树叶纯化多糖配置成浓度为15mg/mL的溶液，然后上样至DEAE
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cellulose离子交换柱，依次用浓度为去离子水、0.1、0.3、0.5、0.7mol/L的NaCl溶液洗脱，流速为1mL/min，自动收集，每管5mL，苯酚
‑
硫酸法检测OD
490
，绘制洗脱曲线，选择性收集峰面积最大的主峰所对应的洗脱液，即合并0.5mol/LNaCl溶液所对应的洗脱液，用去离子水对洗脱液透析3次，冷冻干燥得乌饭树叶多糖组分VBLP
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0.5；
[0016]将乌饭树叶多糖组分VBLP
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0.5配置成浓度为10mg/mL的溶液，上样至SephadexG
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100凝胶色谱柱，用浓度为0.2mol/L的NaCl溶液洗脱，流速为1mL/min，自动收集，每管5mL，苯酚
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硫酸法检测OD
490
，绘制洗脱曲线；根据洗脱曲线，得到两个洗脱峰VBLP
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0.5
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1和VBLP
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0.5
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2，选择性收集峰面积最大的主峰VBLP
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0.5
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2所对应的洗脱液，用去离子水对洗脱液透析24h，冷冻干燥得到本专利技术所述的乌饭树叶多糖组分VBLP
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0.5
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2。
[0017]本专利技术的乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2具有显著的抗氧化和抗糖基化的作用，可应用于抗氧化剂及UHT奶生产过程中晚期糖基化末端产物抑制剂产品的制备。
[0018]乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2在制备抗氧化剂及晚期糖基化末端产物抑制剂中的应用。
[0019]乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2作为U本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2，其特征在于结构特征为：相对分子质量为81563Da，其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖，摩尔比为2.13:1.56:1:1.27。2.乌饭树叶多糖VBLP
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0.5
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2的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)粗多糖的提取乌饭树叶清洗干净，粉碎，按照料液比为1:20(g/mL)加入水，在80℃条件下提取40min，提取结束后离心得上清液，50℃减压浓缩，向浓缩液加入四倍体积无水乙醇，4℃静置24h沉淀多糖，10000r/min离心5min，收集得到沉淀，沉淀冷冻干燥后得到乌饭树叶粗多糖；(2)粗多糖的纯化将粗多糖配制成浓度为10mg/mL的溶液，加入Sevage试剂脱蛋白3次，然后再通过透析袋透析24h，截留分子量为3500Da，透析液冷冻干燥得到纯化多糖；(3)乌饭树叶多糖组分的分离将乌饭树叶纯化多糖配置成浓度为15mg/mL的溶液，然后上样至DEAE
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cellulose离子交换柱，依次用浓度为去离子水、0.1、0.3、0.5、0.7mol/L的NaCl溶液洗脱，流速为1mL/min，自动收集，每管5mL，苯酚
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硫酸法检测OD
490
，绘制洗脱曲线，选择性收集峰面积最大的主峰所对应的洗脱液，即合并...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈义勇，柏雪，吴誉锋，彭英云，金源，徐寒雯，
申请(专利权)人：常熟理工学院，
类型：发明
国别省市：