评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系制造技术

本发明专利技术公开了评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，涉及调控免疫评价技术领域，该评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，如下步骤：S1、干细胞原位移植：采集与冻存；预处理；免疫重建；S2、检测：取骨髓样本查看骨髓间充质干细胞数量前后差异；检测骨髓间充质干细胞具有抑制T淋巴细胞增殖的能力，检测骨髓间充质干细胞表面抗原的种类及数量；S3、评价：细胞免疫功能检查，评价干细胞的免疫调节能力。本发明专利技术通过干细胞原位移植以及检测等步骤对干细胞原位移植脑内调控免疫作用的生物有效性进行评价，对进一步的试验具有重要意义。义。

To evaluate the system of regulating immune function in brain after stem cell transplantation in situ

【技术实现步骤摘要】
评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系


[0001]本专利技术涉及调控免疫评价
，具体为评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系。

技术介绍

[0002]干细胞具有自我更新和多向分化潜能，在不同的诱导条件下，可分化为成熟的功能细胞，替代和修复死亡、受损细胞，在多项临床研究中表现出良好的免疫调节和组织修复的作用。研究人员发现，血液干细胞具有免疫记忆，动物实验显示移植特定的血液干细胞可增强免疫功能，法国卫生和医学研究所等机构研究人员日前在美国学术期刊《细胞
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干细胞》上发表论文说，他们先让小鼠接触大肠杆菌表面的一种分子，然后从这些小鼠体内提取血液干细胞，将其注入另一些免疫系统已被破坏的小鼠体内。随后，后一批小鼠被感染了绿脓杆菌，结果发现其死亡率仅25％。而对照组小鼠的死亡率为75％。这说明血液干细胞具有免疫记忆，将接触过病原体的血液干细胞移植可增强接受移植小鼠的免疫功能。研究人员还发现，血液干细胞的这种免疫记忆不限于最初遇到的病原体，能产生范围更广的免疫保护作用。
[0003]间充质干细胞是干细胞的一种，间充质干细胞具有向损伤部位迁移、向功能细胞分化、分泌生长因子和抗炎因子的免疫调节能力，维持或重塑其细胞功能。是一种具有多向分化潜能的成体干细胞，能够分化为骨、软骨、脂肪、肌肉等多种组织细胞。间充质干细胞主要来源于骨髓，还可以来源于成人的组织如脐带、脂肪、肝脏、肺、肌肉以及肾脏等，间充质干细胞除了因很强的自我更新能力及多向分化潜能而具有促进损伤组织再生修复能力外，它对机体的免疫功能也具有很强的调控作用，主要表现为通过影响免疫细胞的增殖、分化和免疫因子分泌而抑制免疫反应，因此，间充质干细胞显示出较强的抗炎能力。
[0004]大量研究证实，间充质干细胞可以通过旁分泌机制以及间充质干细胞与免疫细胞间的相互作用，介导调节免疫反应平衡，最终促使局部炎症反应下调，减轻组织炎症损伤。间充质干细胞对炎症免疫反应的调节主要包括对先天免疫和获得性免疫反应的调节。
[0005]干细胞的动物安全性评价还属于新兴领域，为了检验干细胞原位移植在免疫调控功能方面的生物有效性，我们提供评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，对进一步的试验具有重要意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，解决对干细胞原位移植脑内调控免疫作用的生物有效性的评价。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，如下步骤：
[0008]S1、干细胞原位移植：采集与冻存；预处理；免疫重建；
[0009]S2、检测：取骨髓样本查看骨髓间充质干细胞数量前后差异；检测骨髓间充质干细
胞具有抑制T淋巴细胞增殖的能力，特定淋巴细胞亚群的比例变化量，检测骨髓间充质干细胞表面抗原的种类及数量；
[0010]S3、评价：细胞免疫功能检查，评价干细胞的免疫调节能力。
[0011]优选的，在步骤S1中，将经传代培养稳定的骨髓间充质干细胞置于细胞培养基中，获得处理后的骨髓间充质干细胞用于细胞移植。
[0012]优选的，用于骨髓间充质干细胞基础培养基为DEME。
[0013]优选的，骨髓间充质干细胞培养在37℃下，在CO2体积浓度5％、空气体积浓度95％的混合气体中以及避光、饱和湿度条件下进行，获得处理后的骨髓间充质干细胞。
[0014]优选的，所述骨髓间充质干细胞培养完全培养液的成分包括：100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素和低糖DEME培养基。
[0015]优选的，所述骨髓间充质干细胞培养完全培养液中含有血清替代物。
[0016]本专利技术提供了评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，具备以下有益效果：
[0017]本专利技术通过干细胞原位移植以及检测等步骤对干细胞原位移植脑内调控免疫作用的生物有效性进行评价，对进一步的试验具有重要意义。
具体实施方式
[0018]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0019]本专利技术提供一种技术方案：评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，包括如下步骤：
[0020]S1、干细胞原位移植：采集与冻存；预处理；免疫重建；
[0021]S2、检测：取骨髓样本查看骨髓间充质干细胞数量前后差异；检测骨髓间充质干细胞具有抑制T淋巴细胞增殖的能力，特定淋巴细胞亚群的比例变化量，检测骨髓间充质干细胞表面抗原的种类及数量；
[0022]S3、评价：细胞免疫功能检查，评价干细胞的免疫调节能力。
[0023]作为本专利技术的一种技术优化方案，在步骤S1中，将经传代培养稳定的骨髓间充质干细胞置于细胞培养基中，获得处理后的骨髓间充质干细胞用于细胞移植。
[0024]作为本专利技术的一种技术优化方案，用于骨髓间充质干细胞基础培养基为DEME。
[0025]作为本专利技术的一种技术优化方案，骨髓间充质干细胞培养在37℃下，在CO2体积浓度5％、空气体积浓度95％的混合气体中以及避光、饱和湿度条件下进行，获得处理后的骨髓间充质干细胞。
[0026]作为本专利技术的一种技术优化方案，骨髓间充质干细胞培养完全培养液的成分包括：100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素和低糖DEME培养基。
[0027]作为本专利技术的一种技术优化方案，骨髓间充质干细胞培养完全培养液中含有血清替代物。
[0028]综上可得，本专利技术通过干细胞原位移植以及检测等步骤对干细胞原位移植脑内调
控免疫作用的生物有效性进行评价，对进一步的试验具有重要意义。
[0029]需要说明的是，在本文中，诸如术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
[0030]尽管已经示出和描述了本专利技术的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本专利技术的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本专利技术的范围由所附权利要求及其等同物限定。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，其特征在于：包括如下步骤：S1、干细胞原位移植：采集与冻存；预处理；免疫重建；S2、检测：取骨髓样本查看骨髓间充质干细胞数量前后差异；检测骨髓间充质干细胞具有抑制T淋巴细胞增殖的能力，特定淋巴细胞亚群的比例变化量，检测骨髓间充质干细胞表面抗原的种类及数量；S3、评价：细胞免疫功能检查，评价干细胞的免疫调节能力。2.根据权利要求1所述的评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，其特征在于：在步骤S1中，将经传代培养稳定的骨髓间充质干细胞置于细胞培养基中，获得处理后的骨髓间充质干细胞用于细胞移植。3.根据权利要求2所述的评价干细胞原位移植脑内调控免疫作用的体系，...

【专利技术属性】
技术研发人员：高谋，
申请(专利权)人：高谋，
类型：发明
国别省市：