一组用于预测高危型扩张型心肌病的脂质代谢物组制造技术

本发明专利技术涉及一组用于预测高危型扩张型心肌病的脂质代谢物组，所述的血清脂质代谢物组包含：二酰基甘油DAG 36:1(18:1/18:0)、三酰基甘油TAG 46:1(16:1)、TAG 52:0(18:0)、胆固醇酯CE 16:1、磷脂酰乙醇胺PE 38:6p、PE 40:5p、神经节苷脂GM3 18:1/18:1、和葡萄糖基神经酰胺GluCerd 18:0/24:1。根据以上8种脂质代谢物和3种临床危险因素(左室射血分数、B型利钠肽、C反应蛋白)构成的联合评分能够预测扩张型心肌病患儿的复合不良事件(全因死亡/心脏移植/因心衰再住院)。因心衰再住院)。因心衰再住院)。

A group of lipid metabolites used to predict high-risk dilated cardiomyopathy

【技术实现步骤摘要】
al.Br J Pharmacol.2004)和心肌细胞凋亡(Karliner JS,et al. Biochim Biophys Acta.2002)等，这为心肌病的脂质代谢组学研究提供了分子学依据。脂质代谢组学是对生 物体内所有代谢物进行定量分析，并寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方法。通过脂质代谢组 学技术不仅可以筛选出心血管疾病特异性的血清标志物(Fan Y,et al.J Am Coll Cardiol.2016),同时可以筛选 出与病理过程相关的潜在治疗靶点(Rhodes CJ,et al.Circulation.2017)。同时，在成人扩心病队列中，已经 利用脂质代谢组学研究发现血清脂质标志物不仅与临床事件相关，而且还与中间表型——心脏形状和体积 的变化相关，探究了脂质组学与扩心病潜在的病理生理学关联(Sysi
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Aho M,et al.PLoS One.2011)。然而， 血清脂质标志物在儿童扩张型心肌病中的预测价值尚不得而知。

技术实现思路

[0005]基于上述现有的临床问题，本专利技术研究了血清中脂质代谢物水平和扩张型心肌病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一组血清脂质代谢物组水平在制备区分高危期的扩张型心肌病(Dilated Cardiomyopathy，DCM)患者的检测试剂盒中的应用；所述的血清脂质代谢物组包含：DAG(甘油二酰基)36:1(18:1/18:0)、TAG(甘油三酰基)46:1(16:1)、TAG(甘油三酰基)52:0(18:0)、CE(胆甾醇酯)16:1、PE(磷脂酰乙醇胺)38:6p、PE(磷脂酰乙醇胺)40:5p、GM3(神经节苷脂)18:1/18:1、和GluCerd(葡萄糖基神经酰胺)18:0/24:1；所述的高危期的扩张型心肌病(Dilated Cardiomyopathy，DCM)患者为确诊DCM后发生：死亡、心脏移植和因心力衰竭再住院等不良事件的患者；所述的确诊DCM为：患者至少具有下述2个临床标准：(1)有症状的心力衰竭；(2)左心室或双心室收缩功能障碍，所述收缩功能障碍为异常左室缩短分数≤25％；(3)不能以负荷异常或冠状动脉疾病解释的心室扩张，所述心室扩张为根据体表面积和年龄校正后左室舒张末径(ED)校正值>2倍标准差。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的区分高危期的扩张型心肌病(Dilated Cardiomyopathy，DCM)患者为：根据患者的血清脂质代谢物水平进行脂质评分计算，所述的脂质评分的计算方法为：脂质评分＝[0.226
×
DAG 36:1(18:1/18:0)]+[0.088
×
TAG 46:1(16:1)]+[0.206
×
CE 16:1]
‑
[0.031
×
PE38:6p]
‑
[0.287
×
PE 40:5p]
‑
[0.043
×
PG 36:2(18:0)]
‑
[0.100
×
GM3 18:1/18:1]
‑
[0.256
×
GluCer d18:0/24:1]；其中脂质代谢物的值为根据健康儿童脂质代谢物的均值和标准差进行z值转换后的值。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的区分高危期的扩张型心肌病(Dilated Cardiomyopathy，DCM)患者为：根据患者的血清脂质代谢物水平和左室射血分数、B型利钠肽和C反应蛋白数值，组合后联合评分数值大于1.2；所述的联合评分的计算方法为：联合评分＝[
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0.049
×
左室射血分数(％)]+[0.389
×
BNP(pg/mL)]+[0.036
×
C反应蛋白(umol/L)]+[0.350
×
DAG 36:1(18:1/18:0)]+[0.071
×
TAG 46:1(16:1)]+[0.055
×
TAG 52:0(18:0)]+[0.307
×
CE 16:1]
‑
[0.034
×
PE38:6p]
‑
[0.293
×
PE 40:5p]
‑
[0.206
×
GM3 18:1/18:1]
‑
[0.294
×
GluCer d18:0/24:1]；其中脂质代谢物的值为根据健康儿童脂质代谢物的均值和标准差进行z值转换后的值。4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述的血清脂质代谢物水平通过如下方法定量(1)萃取血清样品中的脂质代谢物；(2)检测脂质代谢物的含量。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)的具体方法为，1)将氯仿：甲醇＝1:2(v/v)的冰溶剂混合物900ml加入到100ml的血清样品中，涡旋，在
暗室冰上搅拌1小时；2)孵育后，向匀浆中加入0.3ml氯仿，再加入0.35ml冰水；3)将匀浆涡旋30秒，以9000转/分钟离心2分钟；4)将下层有机相转移到新的试管中，加入0.5ml冰氯仿进行再提取，并在氮气中干燥；步骤(2)的具体方法为，1)极性脂质，使用UPLC超高效液相色谱进行检测和定量分析，具体方法为：在Shimadzu Exion UPLC超高效液相色谱系统上，使用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描，并结合Sciex 6500Plus QTRAP系统进行检测和定量分析；使用Phenomenex Luna 3u硅胶柱(i.d.150
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2.0mm)进行单个极性脂质分离，条件如下:流动相A：三氯甲烷:甲醇:氢氧化铵的比例为89.5：10：0.5，流动相B：三氯甲烷:甲醇:氢氧化铵：水的比例为55：39：0.5：5.5单个极性脂质种类的定量参考内标包括：PC
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14:0/14:0、PE
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14:0/14:0、PS
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34:1/d31、PA
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17:0/17:0、PG
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14:0/14:0、PI

【专利技术属性】
技术研发人员：杜杰，李玉琳，温海初，王媛，
申请(专利权)人：北京市心肺血管疾病研究所，
类型：发明
国别省市：