一种山药组培快繁方法技术

本发明专利技术属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种山药组培快繁方法。以山药幼嫩茎段为外植体，消毒后置于诱导培养基中进行诱导培养，得到不定芽；将不定芽转移至增殖培养基中进行增殖培养获得丛生芽；将丛生芽转入壮苗生根培养基中进行壮苗生根培养，得到试管苗，试管苗经炼苗、移栽至基质中获得山药种苗。本发明专利技术通过IBA和D

A method of tissue culture and rapid propagation of Chinese yam

【技术实现步骤摘要】
一种山药组培快繁方法


[0001]本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种山药组培快繁方法。

技术介绍

[0002]山药Dioscorea opposite Thunb，别名薯蓣，是薯蓣科薯蓣属一年生或多年生缠绕性藤本植物。山药能形成肥大的地下肉质块茎供食用或药用"，其营养丰富，药、食皆宜，深受广大人们喜爱，具有健脾养胃、补肺益肾、止泻利湿的功效，对糖尿病、肿瘤等都有较好的防治作用。
[0003]组织培养是通过人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，可实现短时间大量繁殖。现有技术的山药组培快繁方法多注重外源激素的作用，并没有针对内源激素的变化与调控效应，制定适合特定山药品种的组培体系，造成试管苗的生根效果不是很理想，进一步降低移栽成活率。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于解决现有技术的不足，提供一种山药组培快繁方法。
[0005]本专利技术采用如下技术方案：
[0006]一种山药组培快繁方法，以山药幼嫩茎段为外植体，消毒后置于诱导培养基中进行诱导培养，得到不定芽；将不定芽转移至增殖培养基中进行
[0007]增殖培养获得丛生芽；将丛生芽转入壮苗生根培养基中进行壮苗生根培养，得到试管苗，试管苗经炼苗、移栽至基质中获得山药种苗；
[0008]其中，壮苗生根培养基以3/4MS为基本培养基，每升添加蔗糖25
‑
30g，琼脂6
‑
9g，IBA 0.4
‑
0.5mg，D<br/>‑
Arg 0.1
‑
0.15mg。
[0009]进一步的，消毒步骤具体为：将山药的幼嫩茎用流水冲洗干净，切成2
‑
3cm带1
‑
2个节间部的茎段，用75％的酒精浸泡15s，无菌水冲洗1次，然后用质量分数1％的HgCl2溶液浸泡3
‑
5min，后用无菌水冲洗3
‑
4次，再用滤纸吸干表面水分。
[0010]更进一步的，所述诱导培养基以1/2MS为基本培养基，每升添加蔗糖25
‑
30g，琼脂6
‑
9g，6
‑
BA 0.4
‑
0.6mg，NAA 0.1
‑
0.2mg。
[0011]更进一步的，所述诱导培养的条件为：培养温度为25
‑
26℃，先暗培养8
‑
10h，后光处理4
‑
5h，光强为600
‑
800lx，交替进行，直至诱导出不定芽。
[0012]更进一步的，所述增殖培养基以MS为基本培养基，每升添加蔗糖25
‑
30g，琼脂6
‑
9g，KT 0.8
‑
1mg，NAA 0.2
‑
0.3mg。
[0013]更进一步的，所述不定芽的增殖的条件为：培养温度为23
‑
24℃，光照时间为12h/d，光强为1000
‑
1200lx。
[0014]更进一步的，所述壮苗生根培养的条件为：培养温度24
‑
25℃，光照时间为12h/d，光强为1300
‑
1500lx。
[0015]本专利技术具有如下有益效果：
[0016]本专利技术结果证明，乙哚丁酸(IBA)和D
‑
精氨酸(D
‑
Arg)具有良好的协同作用，可促进丛生芽生根，提高根系的数量和质量，进一步为提高试管苗的移栽成活率提供基础。
具体实施方式
[0017]下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不应理解为本专利技术的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0018]以下实施例涉及山药品种为雅山药1号。
[0019]实施例1
[0020](1)外植体选取及消毒：以山药幼嫩茎段为外植体，将山药的幼嫩茎用流水冲洗干净，切成2
‑
3cm带1
‑
2个节间部的茎段，用75％的酒精浸泡15s，无菌水冲洗1次，然后用质量分数1％的HgCl2溶液浸泡4min，后用无菌水冲洗3次，再用滤纸吸干表面水分；
[0021](2)诱导培养：将消毒后的外植体接种于诱导培养基中进行诱导培养(接种数为100)，得到不定芽；所述诱导培养基以1/2MS为基本培养基，每升添加蔗糖26g，琼脂7g，6
‑
BA 0.5mg，NAA 0.15mg；所述诱导培养的条件为：培养温度为25℃，先暗培养8h，后光处理4h，光强为700lx，交替进行，直至诱导出不定芽；诱导培养20天后，所有的外植体均诱导出不定芽；
[0022]结果：诱导率为100％，且萌发出的不定芽长出2片以上的叶。
[0023](3)将不定芽切取单芽后转移至增殖培养基中进行不定芽的增殖(接种数为80)，培养25d，长成3
‑
5片叶的丛生芽；所述增殖培养基以MS为基本培养基，每升添加蔗糖30g，琼脂8g，KT 0.9mg，NAA 0.25mg；所述不定芽的增殖的条件为：培养温度为24℃，光照时间为12h/d，光强为1200lx；
[0024]结果：增殖系数平均可达4.8。
[0025](4)将超过3cm的丛生芽(50株)切下转入壮苗生根培养基中进行壮苗生根培养，得到试管苗；所述壮苗生根培养基以3/4MS为基本培养基，每升添加蔗糖28g，琼脂8g，IBA 0.45mg，D
‑
Arg 0.13mg；所述壮苗生根培养的条件为：培养温度25℃，光照时间为12h/d，光强为1400lx；
[0026]结果：培养35天后的生根率为100％，且试管苗根系数量平均为5.2根，长度平均为1.25cm，10天左右即可生根，根系长而粗。
[0027](5)将长至5cm高的试管苗(30株)在自然条件下，打开组培瓶瓶盖炼苗4天，然后取出试管苗，用清水洗净附着在根部的培养基，然后移栽在至基质(基质组成按质量比为菜园土：河沙：珍珠岩：粉煤灰＝4:2:2:1)中，保持湿度和透气，空气湿度为75％，温度为24℃，由此得到山药种苗，10天后的移栽成活率为100％。
[0028]实施例2
[0029]基本同实施例1，区别在于步骤(4)和步骤(5)：
[0030](4)将超过3cm的丛生芽(50株)切下转入壮苗生根培养基中进行壮苗生根培养，得到试管苗；所述壮苗生根培养基以3/4MS为基本培养基，每升添加蔗糖28g，琼脂8g，IBA 0.4mg，D
‑
Arg 0.1mg；所述壮苗生根培养的条件为：培养温度25℃，光照时间为12h/d，光强为1400lx；
[0031]结果：培养35天后的生根率为94％，且试管苗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种山药组培快繁方法，其特征在于，以山药幼嫩茎段为外植体，消毒后置于诱导培养基中进行诱导培养，得到不定芽；将不定芽转移至增殖培养基中进行增殖培养获得丛生芽；将丛生芽转入壮苗生根培养基中进行壮苗生根培养，得到试管苗，试管苗经炼苗、移栽至基质中获得山药种苗；其中，壮苗生根培养基以3/4MS为基本培养基，每升添加蔗糖25
‑
30g，琼脂6
‑
9g，IBA 0.4
‑
0.5mg，D
‑
Arg 0.1
‑
0.15mg。2.根据权利要求1所述的一种山药组培快繁方法，其特征在于，消毒步骤具体为：将山药的幼嫩茎用流水冲洗干净，切成2
‑
3cm带1
‑
2个节间部的茎段，用75％的酒精浸泡15s，无菌水冲洗1次，然后用质量分数1％的HgCl2溶液浸泡3
‑
5min，后用无菌水冲洗3
‑
4次，再用滤纸吸干表面水分。3.根据权利要求2所述的一种山药组培快繁方法，其特征在于，所述诱导培养基以1/2MS为基本培养基，每升添加蔗糖25
‑
30g，琼脂6
‑
9g，6
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：林海建，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：