一种鉴别荞麦属植物的方法技术

本发明专利技术公开了一种鉴别荞麦属植物的方法，该方法包含：(1)对待鉴定样本进行总DNA提取；(2)以总DNA为模板，用SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物进行PCR扩增；(3)对扩增产物测序峰图进行校对拼接，去除低质量序列及引物区，进行多重序列比对后，去除两端的多余序列，处理后的序列用于序列分析；计算序列的K‑2‑P距离，分析比较序列的种间遗传距离，并构建系统进化树，从而通过对不同种荞麦的MATK序列的聚类来区分荞麦物种。本发明专利技术使用matK基因序列进行物种鉴别，以使实验数据具有足够的可靠性，从而为确保其种质资源的正确性及保障药用的安全提供重要的分子依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物鉴别方法，具体涉及一种鉴别荞麦属植物的方法。

技术介绍

1、荞麦属(fagopyrum mill)，属原始花被亚纲蓼科，是一年生、多年生草本，稀半灌木，该属共有15种，广布于亚洲及欧洲。dna分子标记作为现有的先进准确性高的一项技术，可以弥补和克服传统鉴定方法上的一些缺陷和难题。但是，每一种分子标记技术都有其自身的特质和适用范围以及通用性普遍较差的问题。目前，dna条形码技术可以利用相对较短的标准dna片段对物种进行快速准确鉴定，在学术界被广泛使用，在物种鉴定领域也得到了有效地应用，可快速、准确地鉴别植物种类(li xw etal.plant dna barcoding:from geneto genome[j].biol rev,2015，90:157-166)。该技术在中药材鉴定中得到了广泛的应用从而使其快速发展，在药用植物及植物源药材鉴定等方面均获得了突出成果(yang jbetal.applying plant dna barcodes toidentify species of parnassia(parnassiaceae本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，该方法包含：

2.根据权利要求1所述的鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为：ddH2O、2×Taq PCR MasterMix、SEQ ID NO.1所示的引物、SEQ ID NO.2所示的引物和模板DNA。

3.根据权利要求2所述的鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为：ddH2O 9.0μL、2×TaqPCR MasterMix 12.0μL、SEQ ID NO.1所示的引物2.5μmol/L 1μL、SEQID NO.2所示的引物2.5μmol/L 1μL和模板DNA 50ng/...

【技术特征摘要】

1.一种鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，该方法包含：

2.根据权利要求1所述的鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，所述pcr扩增的体系为：ddh2o、2×taq pcr mastermix、seq id no.1所示的引物、seq id no.2所示的引物和模板dna。

3.根据权利要求2所述的鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，所述pcr扩增的体系为：ddh2o 9.0μl、2×taqpcr mastermix 12.0μl、seq id no.1所示的引物2.5μmol/l 1μl、seqid no.2所示的引物2.5μmol/l 1μl和模板dna 50ng/μl 2.0μl。

4.根据权利要求1所述的鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，所述pcr扩增的程序为：95℃预变性5min；然后进入循环，每个循环95℃变性50sec，54℃退火30sec，72℃延伸60sec，共30个热循环；最后延伸73℃延伸7min；4℃冷却后取出。

5.根据权利要求1所述的鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，待鉴定样本叶片按照ctab法提取总dna，使用rna酶a纯化总dna样本后，用紫外分光光度计测定260nm和280nm下的光密度值，当测得dna纯度达到od260/od280的比值在1.6～1.8之间，则进行步骤(2)pcr反应；反之，则需要重新提取dna。

6.根据权利要求1所述的鉴别荞麦属植物的方法，其特征在于，所述荞麦属植物选自fagopyrum leptopodum、fago...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘起麟，冯光燕，李金泽，王烁理，程子铭，何定鸿，古康圆，郝飞翔，李顺凤，边昊阳，汪霞，李小港，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：