一种基于NGQDs-MoS2@RGO结合适配体检测GP73的方法技术

一种基于氮掺杂石墨烯量子点（NGQDs）和二硫化钼@还原性氧化石墨烯（MoS2@RGO）的荧光共振能量转移的GP73检测方法，以GP73适配体为识别探针，GP73适配体能够特异性识别和结合GP73蛋白，基于氮掺杂石墨烯量子点(NGQDs)

【技术实现步骤摘要】
一种基于NGQDs
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MoS2@RGO结合适配体检测GP73的方法


[0001]本专利技术属于光学传感
，具体涉及一种基于荧光共振能量转移的GP73检测方法。

技术介绍

[0002]高尔基体蛋白73（GP73）又称高尔基体II型跨膜蛋白，目前市场上常用的检测GP73的方法是酶联免疫吸附测定（ELISA），但是该方法存在价格昂贵、稳定性低以及步骤繁琐等问题。专利技术专利CN113533734A涉及一种磁微粒化学发光检测高尔基体73的试剂盒，包括磁微粒悬浮溶液，生物素化标记GP73抗体溶液，碱性磷酸酶标记高尔基体73抗体溶液，校准品、洗液和底物的溶液，其中，底物在酶的作用下被催化裂解，形成不稳定的激发态中间体，当激发态中间体回到基态时便发出光子，形成发光反应，由此可测得GP73浓度。专利技术专利CN113945713A公开了一种利用新型生物芯片检测GP73等肿瘤标记物的方法，满足了大规模样本检测的需求。两项专利技术还存在GP73的检测准确度低、成本高等缺点。
[0003]核酸适配体作为一种人工合出的单链寡核苷酸片段，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非诊断目的氮掺杂石墨烯量子点NGQDs和二硫化钼@还原性氧化石墨烯MoS2@RGO的荧光共振能量转移的GP73检测方法，按以下步骤进行：步骤1：荧光共振供体NGQDs
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GP73
Apt
的制备取氮掺杂石墨烯量子点NGQDs和氨基化的高尔基体蛋白73适配体GP73
Apt
，用EDC活化NGQDs，将两者混合在振荡培养箱孵育，得到NGQDs
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GP73
Apt
溶液；步骤2：荧光共振能量转移的反应体系的构建（1）二硫化钼@还原性氧化石墨烯MoS2@RGO的制备：称取石墨烯粉末，加入超纯水定容，破碎；加入抗环血酸，搅拌，得到RGO溶液；称量二硫化钼粉末和聚乙烯吡咯烷酮PVP粉末，定容；二硫化钼破碎，破碎后将二硫化钼与PVP以及RGO混合，搅拌，离心；取沉淀，干燥，得到MoS2@RGO粉末；称量MoS2@RGO粉末，加入超纯水定容，得到MoS2@RGO溶液；（3）将MoS2@RGO溶液和NGQDs
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GP73
Apt
溶液混合，静置孵育，使NGQDs的荧光淬灭，形成NGQDs
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GP73
Apt
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MoS2@RGO FRET反应体系；用荧光分光光度计进行扫描，固定激发波长为310 nm，测量其390 nm处荧光强度，记作F0；步骤3：GP73工作曲线的绘制（1）将不同浓度的GP73溶液加入到NGQDs
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GP73
Apt
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MoS2@RGO FRET反应体系，孵育，检测310 nm处的峰值变化；用荧光分光光度计进行扫描，固定激...

【专利技术属性】
技术研发人员：李桂银，闫睿洁，陈春灌，郭菲，周治德，梁晋涛，
申请(专利权)人：桂林电子科技大学，
类型：发明
国别省市：