【技术实现步骤摘要】
猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达单链抗体及其制备和应用
[0001]本专利技术属于基因工程
,尤其是涉及猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达单链抗体及其制备和应用。
技术介绍
[0002]猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染猪引起的猪的临床表现为腹泻、呕吐、食欲不振甚至导致猪死亡的一种传染性肠道疾病。不同年龄的猪感染PEDV以后,临床表现严重程度不同,感染后的7日龄以内的新生仔猪的死亡率高达100%。PED在全球多个国家均有爆发,给全世界养猪产业造成严重的经济损失。疫苗接种通常被认为是一种预防病毒性疾病的有效方法,但是由于PEDV的变异速度快,商业化疫苗在临床中的预防效果并不理想。直接给机体输入特异靶向致病原或致病原组成蛋白的抗体的被动免疫是一种有效方法。N蛋白是PEDV的结构蛋白之一,它除了参与病毒粒子的构成,还能够调控病毒的复制和翻译等,受到越来越多的关注。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达单链抗体,其特征在于,其具有如SEQ ID No.1所示的猪源抗体的重链可变区VH的氨基酸序列、如SEQ ID No.2所示的猪源抗体的轻链可变区VL的氨基酸序列和中间连接肽Linker的氨基酸序列GGGGSGGGGSGGGGS,组成顺序为VH
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Linker
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VL的猪源单链抗体片段。2.根据权利要求1所述的一种猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达单链抗体,其特征在于,其具有如SEQ ID No.3所示的氨基酸序列。3.一种如权利要求1或2所述猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达单链抗体的编码基因,其特征在于,具有如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列。4.根据权利要求3所述猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达单链抗体的编码基因,其特征在于,编码基因的核苷酸序列中进一步包含限制性内切酶位点XhoI和NotI,其中酶切位点XhoI的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示,酶切位点NotI的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。5.一种含有权利要求1或2所述猪源性抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达单链抗体的载体。6.根据权利要求5所述载体,其特征在于,所述载体为真核表达质粒。7.根据权利要求6所述载体,其特征在于,所述质粒为pCMV
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HA
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ZW1
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7真核表达质粒,其中ZW1
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7为具有如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列的猪源性抗猪流行性腹泻病毒N...
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