一种检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法，至少包括以下步骤：(1)配制琼脂培养基，所述琼脂培养基包括不相融合的底层琼脂培养基和上层琼脂培养基，所述底层琼脂培养基中包括0.9％(M/V)的琼脂溶液，所述上层琼脂培养基中包括0.3

【技术实现步骤摘要】
一种检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法。

技术介绍

[0002]间充质干细胞是一种多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力。间充质干细胞的来源广泛，主要来源于发育早期的中胚层和外胚层，可以在骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉和脐带等多种组织中分离，具有向成骨细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞、骨髓基质、神经细胞、肝脏细胞、胰岛细胞和心肌细胞等多向分化的潜能。并且间充质干细胞易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，不存在免疫排斥的特性。一些细胞在体外培养时，存在体外成瘤的可能性，但是现有的关于间充质干细胞在体外培养时，体外成瘤的检测方法准确度不高且稳定性不好，不能有效的判断人间充质干细胞在体外培养时成瘤的可能性。

技术实现思路

[0003]为解决上述技术问题，本专利技术的第一个方面提供了一种检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法，至少包括以下步骤：
[0004](1)配制琼脂培本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：(1)配制琼脂培养基，所述琼脂培养基包括不相融合的底层琼脂培养基和上层琼脂培养基，所述底层琼脂培养基中包括0.9％(M/V)的琼脂溶液，所述上层琼脂培养基中包括0.3
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0.9％(M/V)的琼脂溶液；(2)将人间充质干细胞、人宫颈癌细胞和人胚肺成纤维细胞接种于琼脂培养基中进行培养，并设置空白对照组，连续培养21天后于显微镜下，观察人间充质干细胞、人宫颈癌细胞和人胚肺成纤维细胞的集落状况，从而判定细胞的体外成瘤状况。2.根据权利要求1所述的检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法，其特征在于，所述步骤(2)中观察人间充质干细胞、人宫颈癌细胞和人胚肺成纤维细胞的集落状况时，以50μm作为判断标准，＜50μm为非集落细胞，≥50μm且大于16个细胞为集落细胞，存在集落细胞认定为存在体外成瘤的可能性。3.根据权利要求1所述的检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法，其特征在于，所述底层琼脂培养基的制备原料还包括RPMI1640培养基，所述琼脂溶液与RPMI1640培养基之间的体积比为：1：1。4.根据权利要求1所述的检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法，其特征在于，所述上层琼脂培养基的制备原料还包括RPMI1640培养基，所述琼脂溶液与RPMI1640培养基之间的体积比为：(1
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3)：1。5.根据权利要求3或4中所述的检测结果稳定的检测人间充质干细胞体外成瘤的方法，其特征在于，所述RPMI1640培...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书八页，
申请(专利权)人：上海时茵昔生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：