筛选B细胞淋巴细胞的方法技术

本发明专利技术涉及筛选B细胞淋巴细胞的方法，具体而言，本文描述了用于在微流体环境中筛选抗体产生细胞的方法。抗体产生细胞可以是B细胞淋巴细胞，其可以是记忆B细胞或浆细胞。可以使目标抗原靠近抗体产生细胞，并且可以监测抗体产生细胞产生的抗体与抗原的结合。还描述了从抗体产生细胞获得测序文库的方法。抗体产生细胞获得测序文库的方法。抗体产生细胞获得测序文库的方法。

【技术实现步骤摘要】
筛选B细胞淋巴细胞的方法
[0001]本申请是申请号为2017800800812，申请日为2017年10月23日，专利技术 名称为“筛选B细胞淋巴细胞的方法”的中国专利申请的分案申请。
[0002]本申请是一项非临时申请，根据35 U.S.C.119(e)要求2016年10月 23日提交的美国临时申请号62/411,690和2016年10月24日提交的美国临 时申请号62/412,092的优先权，其各自的公开内容通过引用整体并入本文。

技术介绍

[0003]筛选和识别产生能够特异性结合目标抗原的抗体的细胞是有意义的，包 括在杂交瘤开发领域内。此外，有意义的是识别高度表达的抗体产生细胞。 提供适合于抗体产生细胞的生长环境的合适环境以及提供可以容易地监测结 合/表达测定的环境一直是一项艰巨的挑战。此外，期望提供测定结果与特定 细胞的相关性，其证明其分泌的抗体的所需表达/结合特性。本文提供了对抗 体开发领域的这些方面的改进。

技术实现思路

[0004]本专利技术部分基于以下发现：可以在微流体装置内筛选B细胞淋巴细胞， 包括原代B细胞，以确定B细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测表达特异性结合目标抗原的抗体的B细胞的方法，该方法包括：将包含记忆B细胞的样品引入微流体装置，其中所述微流体装置包括：具有流动区域和隔离坞的外壳，其中所述隔离坞包括具有单个开口的分离区域和连接区域，所述连接区域在所述分离区域和所述流动区域之间提供流体连接，并且其中所述隔离坞的分离区域是所述微流体装置的未扫过区域；将单个记忆B细胞从所述样品加载到所述隔离坞；给所述记忆B细胞提供含有IL
‑
6和BAFF的培养基；将所述目标抗原引入所述外壳的所述流动区域，使得所述目标抗原靠近所述记忆B细胞；并且，监测所述目标抗原与所述记忆B细胞表达的所述抗体的结合，从而检测表达抗体的目标记忆B细胞。2.如权利要求1所述的方法，其进一步包括裂解所述目标记忆B细胞，从而释放具有足以制备cDNA文库的质量的RNA。3.如权利要求2所述的方法，其中裂解所述目标记忆B细胞包括在裂解前从所述微流体装置输出所述目标记忆B细胞。4.如权利要求1所述的方法，其中所述隔离坞的所述分离区域包括至少一个条件化的表面，并且其中所述至少一个条件化的表面包含共价连接的亲...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：伯克利之光生命科技公司，
类型：发明
国别省市：