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NNT基因去甲基化的sgRNA序列、编辑系统的构建方法及其应用技术方案

技术编号:34147811 阅读:36 留言:0更新日期:2022-07-14 19:23
本发明专利技术公开了一种NNT基因去甲基化的sgRNA序列,选自sgRNA1、sgRNA4、sgRNA5、sgRNA6、sgRNA9和sgRNA10中的一种,或选自sgRNA1、sgRNA6、sgRNA9和sgRNA10的组合,或选自sgRNA1至sgRNA10的组合。本发明专利技术属于基因工程技术领域,本发明专利技术从NNT基因启动子区筛选出特定的靶位点,并设计sgRNA序列,同时利用CRISPR/dCas9

【技术实现步骤摘要】
NNT基因去甲基化的sgRNA序列、编辑系统的构建方法及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
,尤其涉及NNT基因去甲基化的sgRNA序列、编辑系统的构建方法及其应用。

技术介绍

[0002]NNT基因位于人基因组5号染色体上、长度6421bp,含有22个外显子和21个内含子,编码含有1086个氨基酸的蛋白,其基因启动子区存在一个长度673bp、包含67个CpG位点的CpG岛。NNT蛋白是一种线粒体内膜蛋白,是由两条相同的多肽链构成的对称同源二聚体,在全身各种类型的细胞内普遍存在,在心脏和肝脏中的表达丰度最高。NNT蛋白通过利用质子梯度产生大量NADPH,NADPH用于各种生物合成过程,并维持由TXNRD2/TXN2/PRDX3和PRDX5组成的线粒体基质中的主要抗氧化系统,以控制过氧化物水平。
[0003]CRISPR(聚簇有规律间隔的短回文重复序列)/Cas9系统是一种后天免疫防御系统,用以保护细菌或古细菌免受外来质粒或噬菌体的侵入,这类细菌或古细菌基因组的CRISPR序列能表达与入侵者基因组序列相识别的RNA,在CRI本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种NNT基因去甲基化的sgRNA序列,其特征在于:选自sgRNA1、sgRNA4、sgRNA5、sgRNA6、sgRNA9和sgRNA10中的一种,或选自sgRNA1、sgRNA6、sgRNA9和sgRNA10的组合,或选自sgRNA1至sgRNA10的组合;所述sgRNA1的正义链为TTGGGCCAGCGCGACGTCCTCTCG,反义链为AAACCGAGAGGACGTCGCGCTGGC;所述sgRNA2的正义链为TTGGCTTTTGGTTCGGAGAGCGCG,反义链为AAACCGCGCTCTCCGAACCAAAAG;所述sgRNA3的正义链为TTGGCGCGCGCTCTCCGAACCAAA,反义链为AAACTTTGGTTCGGAGAGCGCGCG;所述sgRNA4的正义链为TTGGACGTCCTCTCGCGGCCCTCA,反义链为AAACTGAGGGCCGCGAGAGGACGT;所述sgRNA5的正义链为TTGGGTTTCGCCTGTCCCCGAGAG,反义链为AAACCTCTCGGGGACAGGCGAAAC;所述sgRNA6的正义链为TTGGGACAGGTCTCTCTCCCGGCG,反义链为AAACCGCCGGGAGAGAGACCTGTC;所述sgRNA7的正义链为TTGGTCAAAGGCTAGTTACCCCCA,反义链为AAACTGGGGGTAACTAGCCTTTGA;所述sgRNA8的正义链为TTGGGAACAGCCCCAACTCCGCGG,反义链为AAACCCGCGGAGTTGGGGCTGTTC;所述sgRNA9的正义链为TTGGCGCGCGCCTAGGGCGCAGCT,反义链为AAACAGCTGCGCCCTAGGCGCGCG;所述sgRNA10的正义链为TTGGTCCCGGGCGCAGGGTGCAT...

【专利技术属性】
技术研发人员:李道传徐驰邢秀梅
申请(专利权)人:中山大学
类型:发明
国别省市:

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