DNA二代测序文库及其构建方法、构建试剂盒技术

本发明专利技术提供了DNA二代测序文库的构建方法，构建方法包括以下步骤：步骤一：将DNA样本通酶切获得片段化的原始模板DNA；步骤二：反应液的制备：将壳聚糖溶液10

【技术实现步骤摘要】
DNA二代测序文库及其构建方法、构建试剂盒


[0001]本专利技术涉及测序文库
，具体涉及DNA二代测序文库及其构建方法、构建试剂盒。

技术介绍

[0002]测序文库的构建首先准备基因组(虽然测序公司要求样品量要达到200ng，但是GnomeAnalyzer系统所需的样品量可低至100ng,能应用在很多样品有限的实验中)，然后将DNA随机片段化成几百碱基或更短的小片段，并在两头加上特定的接头(Adaptor)。如果是转录组测序，则文库的构建要相对麻烦些，RNA片段化之后需反转成cDNA，然后加上接头，或者先将RNA反转成cDNA，然后再片段化并加上接头。片段的大小(Insertsize)对于后面的数据分析有影响，可根据需要来选择。对于基因组测序来说，通常会选择几种不同的insertsize，以便在组装(Assembly)的时候获得更多的信息。
[0003]2)锚定桥接；Solexa测序的反应在叫做flowcell的玻璃管中进行，flowcell又被细分成8个Lane，每个Lane的内表面有无数的被固定的单链接头。上述步骤得到的带接本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.DNA二代测序文库的构建方法，其特征在于，构建方法包括以下步骤：步骤一：将DNA样本通酶切获得片段化的原始模板DNA；步骤二：反应液的制备：将壳聚糖溶液10
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30份送入到磁力搅拌器中，然后加入营养剂5
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10份、DTT 1
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5份、PEG400 1
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2份；步骤三：原始模板DNA采用反应液反应处理，然后进行多重PCR扩增，扩增后送入到磁化剂中反应1
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5min，反应转速为100
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500r/min；步骤四：然后进行单链接头方式进行构建DNA。2.根据权利要求1所述的DNA二代测序文库的构建方法，其特征在于，所述营养剂的制备方法为：将氯化镁1
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5份、氯化钠1
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5份和1
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2份氯化钾以100
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500r/min的转速搅拌10
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20min；然后再以500...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘连成，王运斌，周小龙，黄莉莎，
申请(专利权)人：北京组学生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：