一株成都假单胞菌及其在污废水净化领域的应用制造技术

本发明专利技术涉及一株成都假单胞菌及其在污废水的净化领域的应用，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCCNo.24300，保藏日期为：2022年1月14日，本发明专利技术提供的成都假单胞菌的有益效果是：氨氮降解能力强且起效快，能够耐受高浓度的氨氮，且耐盐，该菌株在水体中盐度不超过8％时均可正常繁殖生长，在5％以下盐度条件下生长状况最佳。下盐度条件下生长状况最佳。下盐度条件下生长状况最佳。

A Pseudomonas Chengdu strain and its application in wastewater purification

【技术实现步骤摘要】
一株成都假单胞菌及其在污废水净化领域的应用


[0001]本专利技术涉及一株成都假单胞菌、包含该成都假单胞菌的微生物菌剂及其在污废水的净化领域的应用，属于环境微生物


技术介绍

[0002]近几年，随着我国的工业迅速发展以及生活节奏的加快，城市生活污水与来自农业与工业的废水等使得水环境污染问题日趋严重。这些污水具有COD值高，氨氮含量高与臭味大等特点，对地表水与地下水等造成严重的污染。其中，水体中的氨氮是主要的污染因子之一，氨氮的大量累积会导致缓流封闭或半封闭水体富营养化的加剧，造成环境恶化，并导致水生生物中毒甚至死亡，严重影响生态平衡。
[0003]目前的污水处理方法中，氨氮的去除方法主要包括物理法、化学法与生物法。与物理法和化学法相比，生物法具有安全、经济且无二次污染等优点，已经成为了应用最为广泛的处理方法。
[0004]在氨氮的生物处理方法中，采用硝化细菌去除氨氮污染是最便捷高效的脱氮途径。硝化细菌分为自养硝化细菌与异养硝化细菌，其中自养硝化细菌由于其自身繁殖速度慢、生物密度较低且生长条件较为苛刻，难以形成优势菌种，且难以扩大生产与推广使用。自从异养硝化菌株被分离出来后，越来越多的异养硝化细菌被广泛关注。
[0005]综合现今的研发成果，多数的异养硝化细菌在处理高氨氮废水过程中存在着时间过长、且中试放大实验效果不理想等问题。因此，筛选能高效降低水体中氨氮的微生物菌种对于环境保护的意义重大。

技术实现思路

[0006]本专利技术针对现有的异养硝化细菌在处理高氨氮废水过程中所存在的不足，提供一株成都假单胞菌、包含其的微生物菌剂及其在污废水的净化领域的应用。
[0007]一株成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)Y25，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCC No.24300，保藏日期为：2022年01月14日，其16S rDNA序列如SEQ ID No:1所示，在没有特别说明的情况下，本专利技术中所述的成都假单胞菌均是指成都假单胞菌Y25菌株。
[0008]本专利技术提供的成都假单胞菌的有益效果是：
[0009]1)氨氮降解能力强且起效快，在30℃条件下，针对100mg/L的初始氨氮浓度，72h的氨氮降解率达到94
‑
95％；
[0010]2)能够耐受高浓度的氨氮，在30℃条件下，针对100
‑
400mg/L的初始氨氮浓度，72h的氨氮降解率达到92％以上；当氨氮浓度达到600mg/L时，72h的氨氮降解率仅有20％左右，因此该菌株的最高氨氮耐受浓度为600mg/L；
[0011]3)耐盐，该菌株在水体中盐度不超过8％时均可正常繁殖生长，在5％以下盐度条
件下生长状况最佳；
[0012]4)该菌株培养方法简单，环境适应性强，繁殖迅速且安全性高。
[0013]本专利技术还要求保护包含成都假单胞菌的微生物菌剂。
[0014]本专利技术还要求保护成都假单胞菌的发酵方法，包括如下步骤：
[0015](1)一级种子培养：无菌条件下，取成都假单胞菌接种于液体LB培养基中，于25
‑
35℃、150
‑
300rpm的条件下培养12
‑
24h，得到一级种子培养液；
[0016](2)二级种子培养：无菌条件下，将一级种子培养液按照1
‑
10vol％的接种量接种于液体LB培养基中，于25
‑
35℃、150
‑
300rpm的条件下培养12
‑
24h，得到二级种子培养液；
[0017](3)发酵：待发酵罐内的发酵培养基消毒完毕后，将二级种子培养液按照1
‑
10vol％的接种量接种于发酵培养基中，控制温度为25
‑
35℃、转速150
‑
300rpm，通气比为1:(1
‑
2)的条件下发酵，待溶氧开始上升时停止发酵，得发酵液；所述发酵培养基组成为：碳源40
‑
60g/L、氮源15
‑
30g/L、PO
43
‑
0.8
‑
1.5g/L、K
+
0.5
‑
1.0g/L、Mg
2+
0.05
‑
0.2g/L、Na
+
0.1
‑
0.3g/L、Mn
2+
0.03
‑
0.1g/L，溶剂为水，pH＝6～8。
[0018]本专利技术中所述的通气比是指每分钟内通入发酵罐的空气体积与发酵液总体积之比。
[0019]其中所述液体LB培养基的组成为：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L，溶剂为水，pH＝7
‑
7.5。
[0020]优选的，所述PO
43
‑
和K
+
的来源为磷酸氢二钾或磷酸二氢钾，所述Mg
2+
的来源为硫酸镁、硝酸镁或氯化镁中的一种或多种的复配，所述Na
+
的来源为氯化钠、硝酸钠或硫酸钠中的一种或多种的复配，所述Mn
2+
的来源为一水硫酸锰、四水硫酸锰、硝酸锰或氯化锰中的一种或多种。
[0021]进一步，所述碳源选自葡萄糖、蔗糖、淀粉、醋酸钠或丁二酸钠中的一种或多种。
[0022]进一步，所述氮源选自酵母浸粉、蛋白胨、尿素、硫酸铵或硝酸钾中的一种或多种。
[0023]在实际应用过程中，可根据实际的使用和存储需要来确定最终的成都假单胞菌产品的形态，当需要使用液态产品时，将发酵液稀释至所需要的浓度即可直接使用，当需要使用固态产品时，可将发酵液离心后获得菌泥，然后采用喷雾干燥或冷冻干燥工艺制得固态菌粉。
[0024]本专利技术还要求保护使用成都假单胞菌的活化液或包含成都假单胞菌的微生物菌剂净化污废水的方法，包括向污废水中接种成都假单胞菌的活化液或包含成都假单胞菌的微生物菌剂的步骤。
[0025]进一步，所述污废水中的氨氮浓度为600mg/L以下，更优选400mg/L以下，最优选100
‑
200mg/L。
[0026]进一步，所述污废水的盐度为8％以下，更优选6％以下，进一步优选5％以下，最优选3％以下。
[0027]进一步，所述成都假单胞菌的活化液或包含成都假单胞菌的微生物菌剂的接种量为100ppm以上，优选100
‑
2000ppm，最优选100
‑
1000ppm。
[0028]本专利技术还要求保护成都假单胞菌和包含成都假单胞菌的微生物菌剂在污废水净化领域的应用。
[0029]优选的，所述成都假单胞菌和包含成都假单胞菌的微生物菌剂用于降解污废水中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.24300。2.一种微生物菌剂，其特征在于，有效成分包含权利要求1所述的成都假单胞菌。3.权利要求1所述成都假单胞菌的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)一级种子培养：无菌条件下，取成都假单胞菌接种于液体LB培养基中，于25
‑
35℃、150
‑
300rpm的条件下培养12
‑
24h，得到一级种子培养液；(2)二级种子培养：无菌条件下，将一级种子培养液按照1
‑
10vol％的接种量接种于液体LB培养基中，于25
‑
35℃、150
‑
300rpm的条件下培养12
‑
24h，得到二级种子培养液；(3)发酵：待发酵罐内的发酵培养基消毒完毕后，将二级种子培养液按照1
‑
10vol％的接种量接种于发酵培养基中，控制温度为25
‑
35℃、转速150
‑
300rpm，通气比为1:(1
‑
2)的条件下发酵，待溶氧开始上升时停止发酵，得发酵液，所述发酵培养基组成为：碳源40
‑
60g/L、氮源15
‑
30g/L...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘佳琪，刘圣鹏，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝赛德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：