一种评价化妆品产品及原料抗氧化功效的方法技术

本发明专利技术属于化妆品技术领域，公开了一种评价化妆品产品及原料抗氧化功效的方法。该方法，包括如下步骤：(1)分别取产品、溶剂与皮肤模型混合，孵育，得到产品组和空白组；(2)产品组和空白组分别进行光照射，得到产品光照射组和空白光照射组；(3)分别孵育产品光照射组和空白光照射组中皮肤模型，然后检测产品光照射组和空白光照射组中皮肤模型的指标，所述指标为氧化蛋白质含量、角质层厚度和组织形态中的至少一种。该方法以氧化蛋白质含量、角质层厚度和组织形态中的至少一种为指标，评价产品的抗氧化和皮肤屏障保护的功效，结果更客观；相对于抗氧化自由基的检测方法，更能直接体现产品在皮肤上的抗氧化功效。品在皮肤上的抗氧化功效。

【技术实现步骤摘要】
一种评价化妆品产品及原料抗氧化功效的方法


[0001]本专利技术属于化妆品
，具体涉及一种评价化妆品产品及原料抗氧化功效的方法。

技术介绍

[0002]皮肤光老化是一个日积月累的缓慢发展的过程，不同的光线波长，照射剂量、生理因素、病理因素等均可影响皮肤光老化情况的产生。
[0003]为了抵抗环境如光照对皮肤的氧化损伤，化妆品企业在化妆品中添加抗氧化物质，同时希望可通过某种方法，了解抗氧化试剂或化妆品在直接涂抹于皮肤状态时所具备的抗氧化能力。检测抗氧化能力的方法一般有纯化学检测方法和生物组织类检测方法。如DPPH清除能力评价法、SOD样活性评价法、过氧化氢清除能力评价法、过氧化脂质生成抑制作用评价法，但根据生物化学实验，无法对抗氧化剂/含抗氧化剂的化妆品基质在人体上使用后的抗氧化效果进行接近、直观、快速的评价。现有的化妆品及原料抗氧化功效的检测技术存在着检测指标不稳定，检测化妆品原料和化妆品产品的载体存在个体差异大、取样工作量大，与人体皮肤生理功能差异大的问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一方面的目的，在于提供一种评价产品抗氧化功效的方法。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
[0006]本专利技术的第一个方面，提供一种评价产品抗氧化功效的方法，包括如下步骤：
[0007](1)分别取产品、溶剂与皮肤模型混合，孵育，得到产品组和空白组；
[0008](2)产品组和空白组分别进行光照射，得到产品光照射组和空白光照射组；<br/>[0009](3)分别孵育产品光照射组和空白光照射组中皮肤模型，然后检测产品光照射组和空白光照射组中皮肤模型的指标；
[0010]步骤(3)中所述指标为氧化蛋白质含量、角质层厚度和组织形态中的至少一种；通过产品处理后氧化蛋白质含量的降低程度、角质层厚度增加程度和/或细胞损伤的降低程度来衡量产品的抗氧化功效。
[0011]上述评价产品抗氧化功效的方法，皮肤模型中的氧化蛋白质含量反映总体氧化损伤，检测指标更稳定，可以对皮肤模型中的氧化蛋白质含量进行定量和半定量，检测结果更客观，而且能够更真实的反应化妆品在皮肤应用中的抗氧化功效；以角质层厚度作为产品抗氧化功效的指标，可以有效地帮助评价皮肤屏障功能，在化妆品研发中用于测试化妆品的对于皮肤氧化损伤的功效有更客观的结果和更高的应用价值；以组织形态作为产品抗氧化功效的指标，可以直观展示产品对组织的抗光损伤作用。
[0012]优选地，步骤(3)中所述指标为角质层厚度和组织形态中的至少一种及氧化蛋白质含量；进一步为氧化蛋白质含量、角质层厚度和组织形态。
[0013]优选地，步骤(1)中所述孵育的条件为36.8～37.2℃、4.5％～5.5％CO2下孵育0.5
～5h；进一步为36.9～37.1℃、4.7％～5.3％CO2下孵育1～4h。
[0014]优选地，步骤(1)中所述溶剂为PBS。
[0015]优选地，步骤(1)中所述产品包括化妆品产品、化妆品原料和化妆品中间组合物。
[0016]优选地，所述化妆品中间组合物为化妆品配方。
[0017]优选地，步骤(1)中所述皮肤模型为3D皮肤模型；3D皮肤模型与人体皮肤结构与生理功能近似，可以更大程度地排除个体差异，重复性好，差异小，工作量小，而且不需要依赖于人体试验，更安全。
[0018]优选地，所述3D模型为SkinEthic
TM RHE表皮模型、EpiSkin
TM
三维重建表皮模型、T
‑
Skin
TM
三维体外重建全层皮肤模型、LabCyte EPI
‑
MODEL和Epikutis
‑
3D皮肤模型中的至少一种。
[0019]优选地，步骤(2)中所述光为紫外光、蓝光和红外光中的至少一种；选择紫外光/蓝光/红外光作为诱导氧化方式，用于评价抗紫外光/蓝光/红外光诱导氧化损伤的产品，从而促进企业开发抵抗光照(紫外光/蓝光/红外光)的皮肤氧化损伤的产品。
[0020]进一步优选地，步骤(2)中所述光为280～400nm的紫外光、400～500nm的蓝光和500～1400nm的红外光中的至少一种。
[0021]优选地，所述紫外光为UVA和UVB中的至少一种。
[0022]优选地，所述UVA的剂量为5～10J/cm2，所述UVB的剂量为20～1000mJ/cm2；进一步优选地，所述UVA的剂量为7～8J/cm2，所述UVB的剂量为200～800mJ/cm2。
[0023]优选地，所述UVA的光照强度为0.5～1.2mW/cm2，所述UVB的光照强度为0.8～3.0mW/cm2；进一步优选地，所述UVA的光照强度为0.8～1.0mW/cm2，所述UVB的光照强度为1.2～2.4mW/cm2。
[0024]优选地，所述蓝光的剂量为5～150J/cm2。
[0025]优选地，所述红外光的剂量为10～50J/cm2。
[0026]优选地，所述蓝光的光照强度为50～100mW/cm2。
[0027]优选地，所述红外光的光照强度为100～400mW/cm2。
[0028]优选地，步骤(2)中所述光照射的时间为0.25～166.8min。
[0029]优选地，步骤(2)中所述光为UVA时，所述光照射的时间为36～166.8min；所述光为UVB时，所述光照射的时间为0.25～25min；所述光为蓝光时，所述光照射的时间为0.8～50min；所述光为红外光时，所述光照射的时间为0.4～8min。
[0030]优选地，步骤(2)中还包括如下步骤：空白组进行避光处理，得到空白避光组。
[0031]优选地，步骤(3)中还包括如下步骤：孵育空白避光组中皮肤模型，然后检测空白避光组中皮肤模型的指标。
[0032]优选地，步骤(3)中所述孵育的条件为36.8～37.2℃、4.5～5.5％CO2下孵育22～26h；进一步为36.9～37.1℃、4.7～5.3％CO2下孵育23～25h。
[0033]优选地，步骤(3)中所述氧化蛋白质含量的检测方法为通过Fluorescein
‑5‑
Thiosemicarbazide染色检测，具体如下：将皮肤模型固定、包埋、切片、Fluorescein
‑5‑
Thiosemicarbazide染色，对染色后的皮肤模型切片拍摄至少3张图像，从图像上分离样本和背景，通过图像处理软件Image J对荧光图像进行灰度分析，然后计算图像的平均荧光强度，根据平均荧光强度与氧化蛋白质含量的关系确定皮肤模型中的氧化蛋白质含量；以皮
肤模型中的氧化蛋白质的含量作为产品抗氧化功效的评价指标，对皮肤模型的纵切片中的氧化蛋白质的含量进行拍照及荧光半定量分析可以有效地帮助评估皮肤受外界环境损伤的严重程度，有效反应产品抗氧化损伤机制，可三维多指标地观察氧化损伤状况；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种评价产品抗氧化功效的方法，包括如下步骤：(1)分别取产品、溶剂与皮肤模型混合，孵育，得到产品组和空白组；(2)产品组和空白组分别进行光照射，得到产品光照射组和空白光照射组；(3)分别孵育产品光照射组和空白光照射组中皮肤模型，然后检测产品光照射组和空白光照射组中皮肤模型的指标；步骤(3)中所述指标为氧化蛋白质含量、角质层厚度和组织形态中的至少一种。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述皮肤模型为3D皮肤模型。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中所述光为紫外光、蓝光和红外光中的至少一种；所述紫外光为UVA和UVB中的至少一种。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述UVA的剂量为5～10J/cm2，所述UVB的剂量为20～1000mJ/cm2；所述UVA的光照强度为0.5～1.2mW/cm2，所述UVB的光照强度为0.8～3.0mW/cm2；所述蓝光的剂量为5～150J/cm2，所述红外光的剂量为10～50J/cm2；所述蓝光的光照强度为50～100mW...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤丹，戴结玲，刘贤钊，陈炎欢，孙红梅，
申请(专利权)人：无限极中国有限公司，
类型：发明
国别省市：