茚虫威半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用制造方法及图纸

本发明专利技术公开了茚虫威半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用，涉及茚虫威半抗原、茚虫威抗原、茚虫威抗体和茚虫威胶体金层析检测装置及其制备和检测茚虫威的应用。本发明专利技术应用免疫学检测方法，对样品中残留的茚虫威进行专属检测，具有特异性好、灵敏度高、操作简便、可实现现场快速检测等优点，能更好的满足监管部门、检测机构现场监督执法的需要，为相关执法部门快速检测茶叶、果蔬、水体或者土壤中是否残留茚虫威提供技术支持。残留茚虫威提供技术支持。残留茚虫威提供技术支持。

【技术实现步骤摘要】
茚虫威半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用


[0001]本专利技术涉及农药安全检测的
，特别是涉及茚虫威半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用。

技术介绍

[0002]茚虫威（indoxacarb），化学名称为７
‑
氯
‑
2，3，4a，5
‑
四氢
‑2‑
［甲氧基羰基（４
‑
三氟甲氧基苯基）氨基甲酰基］茚并［1，2
‑
e］［1，3，4
‑
］噁二嗪
‑
ａ
‑
羧酸甲酯。茚虫威是由美国杜邦公司发现、开发和生产的兼具噁二嗪结构的氨基甲酸酯类杀虫剂，具有独特的作用机理，其在昆虫体内被迅速转化为Ｎ
‑
去甲氧羰基代谢物，由 Ｎ
‑
去甲氧羰基代谢物作用于昆虫神经细胞失活态电压门控钠离子通道，不可逆地阻断和破坏昆虫体内的神经冲动传递，导致害虫运动失调，不能进食，麻痹并最终死亡。
[0003]作为一种低毒、高效杀虫剂，茚虫威应用广泛，可有效防治粮、棉、果、蔬等作物上的多种害虫。茚虫威虽然属于低毒杀虫剂，但是使用不当，也会造成作物中残留量过高，从而对人体健康造成危害，研究证实，茚虫威在单一高剂量口服情况下，可导致人体出现痉挛、颤抖和动作不协调等诸多症状。
[0004]新型低毒高效农药茚虫威等可有效防治多种害虫, 在农业种植中已经被广泛使用。国内外已报道了茚虫威在水稻、甘蓝、豇豆和棉花等作物上的残留分析和安全性评价研究，前处理大多采用丙酮、甲醇、石油醚等试剂提取，液液萃取或固相萃取柱净化，相对来说前处理比较繁琐，主要由气相色谱仪（ECD检测器）或液相色谱仪（PDA检测器）进行检测，但过程较复杂，成本较高。很难达到快速检测的目的，不适用于现场快速检测，不能满足监管部门、检测机构现场监督执法的需要。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供了茚虫威半抗原、抗原、抗体、检测装置及其制备和应用。
[0006]根据本专利技术的一个方面，提供了茚虫威半抗原，其结构如下所示：（Ⅰ），其中，n为3、4、5或6。
[0007]根据本专利技术的另一个方面，制备茚虫威半抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1. 茚虫威原药与还原剂反应，反应完毕后，萃取、纯化，得到中间体，还原剂为硼氢化钠、硼氢化钾、硼氢化锂中的任意一种，中间体的结构式如式（Ⅱ）所示：（Ⅱ）；S2. 中间体被反应溶剂溶解后，与酸酐类化合物发生酰化反应，反应完毕后，萃取、纯化，得到茚虫威半抗原，茚虫威半抗原的结构式如式（Ⅰ）所示，反应溶剂为无水吡啶、二氯甲烷
‑
三乙胺或甲苯中的任意一种。
[0008]在一些实施方式中，步骤S1中茚虫威原药与还原剂的摩尔比为1:（1.1
‑
5）。
[0009]在一些实施方式中，步骤S2中间体与酸酐类化合物的摩尔比为1:（1.2
‑
8），酸酐类化合物为丁二酸酐、戊二酸酐、己二酸酐中的任意一种。
[0010]根据本专利技术的再一个方面，提供了茚虫威抗原，包含茚虫威半抗原以及与茚虫威半抗原偶联的载体蛋白，载体蛋白为牛血清白蛋白、牛乳铁蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白中的一种。
[0011]根据本专利技术的第四个方面，提供了茚虫威抗体，是由茚虫威抗原经动物免疫制备得到，茚虫威抗体为茚虫威单克隆抗体。
[0012]根据本专利技术的第五个方面，提供了茚虫威半抗原、茚虫威抗原或茚虫威抗体在茚虫威的免疫学检测中的应用。
[0013]根据本专利技术的第六个方面，提供了茚虫威胶体金层析检测装置，为一步法卡扣式检测卡，包括样品垫、胶体金垫、反应膜和吸水纸，反应膜上设有检测线和质控线，胶体金垫中含有胶体金标记的茚虫威抗体，检测线包被有茚虫威抗原。
[0014]根据本专利技术的第七个方面，提供了一种检测样品中茚虫威残留的方法，该方法为使用茚虫威胶体金层析检测装置对样品中含有的茚虫威进行检测。
[0015]在一些实施方式中，样品为茶叶、果蔬、水体或者土壤中的一种。
[0016]本专利技术的有益效果：本专利技术提供的茚虫威半抗原的制备方法，使用的化学试剂容易得到、操作过程简单、合成步骤简洁有效、反应产率较高、并且检测成本较低。本专利技术利用层析式免疫胶体金原理，通过检测卡中检测线与质控线之间的比色来定性检测样本中是否残留有茚虫威，应用时不需要使用液相色谱或质谱等大型仪器，达到快速检测的目的。本专利技术应用免疫学检测方法，对样品中残留的茚虫威进行专属检测，具有特异性好、灵敏度高、操作简便、可实现现场快速检测等优点，能更好的满足监管部门、检测机构现场监督执法的需要，为相关执法部门快速检测茶叶、果蔬、水体或者土壤中是否残留茚虫威提供技术支
持。
附图说明
[0017]图1为本专利技术的一种实施方案的茚虫威半抗原的质谱图。
[0018]图2为本专利技术的一种实施方案的茚虫威半抗原的合成流程图。
[0019]图3为本专利技术的一种实施方案的茚虫威胶体金层析检测装置的结构示意图。
具体实施方式
[0020]以下通过具体的实施案例对本专利技术作进一步详细的描述，应理解这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的保护范围，在阅读了本专利技术之后，本领域技术人员对本专利技术的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定。若无特殊说明，本专利技术的所有原料和试剂均为常规市场可购买的原料、试剂。
[0021]实施例1本实施例中茚虫威原药选择京博农化科技有限公司供应的95%的茚虫威原药，硼氢化钠选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯硼氢化钠，乙酸乙酯选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯乙酸乙酯，无水硫酸钠选择国药集团化学试剂有限公司供应的99%无水硫酸钠，无水吡啶选择国药集团化学试剂有限公司供应的99.5%无水吡啶，丁二酸酐选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯丁二酸酐，N，N
‑
二甲基甲酰胺选择国药集团化学试剂有限公司供应的99.8% N，N
‑
二甲基甲酰胺，三正丁胺选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯三正丁胺，氯甲酸异丁酯选择国药集团化学试剂有限公司供应的98%氯甲酸异丁酯，以下实施例2
‑
10均采用本实施例1中的试剂。
[0022]实施例2
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茚虫威半抗原的合成与鉴定茚虫威半抗原的制备方法，包括以下步骤：S1. 取一单口瓶，称取茚虫威原药1.0g加入单口瓶中，用20ml无水甲醇溶解后，在冰浴条件下分批加入硼氢化钠0.21g，室温搅拌，TLC监控至反应完全，蒸干溶剂后加入100ml蒸馏水，加入乙酸乙酯萃取、分液，得到有机相，将有机相用无水硫酸钠干燥后，柱层析纯化，得到中间体0.8g，中间体的结构式如式（Ⅱ）所示：（Ⅱ）；S2. 取中间体400mg，用无水吡啶溶解后加入丁二酸酐0.2g，升温至80℃反应过夜，反应结束后蒸干溶剂，加入水与乙酸乙酯洗涤、萃取、分液，保留有机相，用无水硫本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.茚虫威半抗原，其特征在于，其结构如式（Ⅰ）所示：（Ⅰ），其中，n为3、4、5或6。2.制备权利要求1所述的茚虫威半抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1. 茚虫威原药与还原剂反应，反应完毕后，萃取、纯化，得到中间体，所述还原剂为硼氢化钠、硼氢化钾、硼氢化锂中的任意一种，所述中间体的结构式如式（Ⅱ）所示：（Ⅱ）；S2. 所述中间体被反应溶剂溶解后，与酸酐类化合物发生酰化反应，反应完毕后，萃取、纯化，得到茚虫威半抗原，所述茚虫威半抗原的结构式如式（Ⅰ）所示，所述反应溶剂为无水吡啶、二氯甲烷
‑
三乙胺或甲苯中的任意一种。3.根据权利要求2所述的制备权利要求1所述的茚虫威半抗原的方法，其特征在于，所述步骤S1中茚虫威原药与还原剂的摩尔比为1:（1.1
‑
5）。4.根据权利要求2所述的制备权利要求1所述的茚虫威半抗原的方法，其特征在于，所述步骤S2中间体与酸酐类化合物的摩尔比为1:（1.2
‑
8），所述酸酐类化合物为丁二酸酐、戊二酸酐、己二酸酐中的任意...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨星星，王炳志，王幸幸，王耀宇，张鑫，付辉，王水树，
申请(专利权)人：深圳市通量检测科技有限公司，
类型：发明
国别省市：