本发明专利技术提供一种微量核酸真空离心浓缩装置与微量核酸溶液浓缩方法，微量核酸真空离心浓缩装置包括真空锅、气溶胶吸附件、离心机构及抽真空机构；真空锅的壳壁上设有抽气孔，抽气孔与抽真空机构连通，抽真空机构用于对真空锅的内部环境进行抽真空处理；离心机构包括离心转子，离心转子可转动地设于真空锅内，离心转子上用于安装微量离心试管，以对微量离心试管内的微量核酸样本进行离心；气溶胶吸附件设于抽气孔中，气溶胶吸附件用于吸附真空锅的内部环境中的核酸气溶胶。本发明专利技术在防止微量核酸样本过渡离心丢失，防止核酸样本间气溶胶交叉污染的情形下，保留核酸的理化特性，获得符合人体和石蜡样本基因文库质量标准的高浓度的微量核酸溶液样本。微量核酸溶液样本。微量核酸溶液样本。
【技术实现步骤摘要】
微量核酸真空离心浓缩装置与微量核酸溶液浓缩方法
[0001]本专利技术涉及核酸提取
，尤其涉及一种微量核酸真空离心浓缩装置与微量核酸溶液浓缩方法。
技术介绍
[0002]在核酸提取领域，合格提取的新鲜生物核酸样本在加入体系反应量为1～3ul时，应达到20ng/ul，以用于下游的PCR反应。石蜡组织样本有很多核酸断裂短碎片，为提取质量核酸的困难检材样本，对循环肿瘤细胞、培养细胞、脱落细胞、穿刺细胞、长期保存的石蜡组织等微量检材提取的浓度在1～5ng/ul以下的样本称之为微量核酸样本，提取浓度达到0.1ng/ul的样本称之为痕量核酸样本。不久前微量或痕量核酸样本一般在法医学而不在医疗实验室临床应用，在后续PCR反应、测序等实验反应中认为不能利用微量核酸样本完成稳定的实验反应。因此，对医学上采用穿刺或微创等新技术检查病人的微少样本，在进行常规基因应用检查上基本被放弃利用,但是，随着微创新技术在医疗上的逐渐推广，约有50％的肿瘤非手术病例得不到常量检材样本，所产生的微量核酸无法在精准医疗的新技术中应用获益。
[0003]随着近年来医学基因组临床功用逐步深入到肿瘤石蜡陈旧样本(含石蜡HE染色片)、微创手术小样本、穿刺取材小样本、液体活检样本、遗传生殖培养细胞、呼吸腔道粘膜细胞样本及污染环境的体液排泄物可疑感染类病原体基因检测样本，这些小标本核酸获取量常常在1
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5ng/ul以下，有很多病例的病种需要针对微量核酸，甚至痕量核酸的富集和浓缩。
[0004]真空浓缩技术是随着现代生物食品、农林和药物工程的生产需求而发展起来的，采用的仪器为真空离心浓缩仪。真空离心浓缩仪主要包括离心机、真空泵及加持蒸发设备，真空浓缩仪通过抽真空降低液体沸点来提高蒸发，在浓缩过程中，液体疏松容积扩张，使得液体密度降低，蒸发流动速度加快。
[0005]然而，现有的真空浓缩仪主要适用于蛋白产品、多糖产品、肽类制品等多种样本的浓缩富集，其主要用于将液体样本离心浓缩到200ul以上，或冷冻到干燥粉末，很少应用于微量核酸样本的离心浓缩到额定液态，不能满足全基因组文库需要的加样7ul
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10ul以下液体文库模板制备所需要的60ng核酸量(60ng/7
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10ul)的需求，也达不到NGS,Sager测序、微卫星多重PCR及qPCR等要求达到的在1
‑
2ul加样量中含有5ng以上微量核酸的质控标准。
[0006]在实际应用中，即使采用真空浓缩仪离心获得10ul以下的微量液体，但是，为了加快液体蒸发速度，当前在真空浓缩中通常设置蒸发温度在60℃以上，并添加酸碱有机溶剂，这种浓缩方式会导致微量核酸各种长片段也被蒸发、冻融或加热，对核酸的理化特性造成严重的破坏。与此同时，在加热蒸发浓缩过程中，核酸样本存在气溶胶交叉污染的风险，难以确保检测结果的准确性。
技术实现思路
[0007]本专利技术提供一种微量核酸真空离心浓缩装置与微量核酸溶液浓缩方法，用以解决或改善现有技术存在的至少一种技术问题，以实现在一定程度上消除浓缩过程中核酸样本间的交叉污染风险，获得高浓度的核酸溶液。
[0008]本专利技术提供一种微量核酸真空离心浓缩装置，包括：真空锅、气溶胶吸附件、离心机构及抽真空机构；所述真空锅的壳壁上设有抽气孔，所述抽气孔与所述抽真空机构连通，所述抽真空机构用于对所述真空锅的内部环境进行抽真空处理；所述离心机构包括离心转子，所述离心转子可转动地设于所述真空锅内，所述离心转子上用于安装微量离心试管，以对所述微量离心试管内盛装的微量核酸样本进行浓缩；所述气溶胶吸附件设于所述抽气孔中，所述气溶胶吸附件用于吸附所述真空锅的内部环境中的核酸气溶胶，其中，所述微量核酸样本包括核酸溶液与石蜡切片组织核酸样本，所述核酸溶液为包含循环肿瘤细胞、培养细胞、液体提取细胞、穿刺细胞或脱落细胞的核酸溶液样本，所述石蜡切片组织核酸样本为石蜡切片细胞样本。
[0009]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，所述气溶胶吸附件包括底座、核酸吸附膜及压盖；所述底座的第一端设有转接端口，所述底座的第二端设有安装槽；所述转接端口与所述安装槽的槽底连通；所述转接端口与所述抽气孔可拆卸式连接；所述压盖与所述安装槽的槽壁可拆卸式连接；所述核酸吸附膜设于所述压盖与所述安装槽的槽底的相对壁面之间；所述核酸吸附膜用于吸附所述核酸气溶胶，以及供所述真空锅的内部环境中除所述核酸气溶胶之外的气体通过。
[0010]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，所述气溶胶吸附件还包括滤网；所述滤网设于所述安装槽的槽底，并与所述转接端口相对；所述核酸吸附膜的第一表面与所述压盖的表面贴合，所述核酸吸附膜的第二表面与所述滤网的表面贴合。
[0011]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，所述核酸吸附膜包括硅胶膜、醋酸纤维素滤膜、硝酸纤维素膜当中的任一种。
[0012]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，所述真空锅的壳壁上设有回气孔，所述回气孔与回气管的一端连通，所述回气管上装有回气阀。
[0013]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，所述真空锅的壳壁上设有恒温控制装置；所述恒温控制装置用于控制所述真空锅的内部环境的温度维持在25℃～37℃。
[0014]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，还包括：人机交互模块；所述人机交互模块分别与所述离心机构、所述抽真空机构、所述回气阀及所述恒温控制装置连接；所述人机交互模块用于接收开机指令、接收选择微量核酸处置类别以及进行浓缩参数的配置；所述浓缩参数包括离心时间、抽真空时间、回气时间、真空度及离心温度当中的至少一种。
[0015]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，所述离心机构包括：离心电机与所述离心转子；所述离心转子包括角转子或平板转子，所述离心转子上设有多个管孔，所述管孔内用于插装所述微量离心试管；所述离心转子可转动地安装于所述真空锅内；所述离心电机设于所述真空锅的外侧，所述离心电机的输出端与所述离心转子连接。
[0016]根据本专利技术提供的一种微量核酸真空离心浓缩装置，所述抽真空机构包括真空泵
与真空管；所述真空管的第一端与所述抽气孔连通，所述真空管的第二端与所述真空泵连通；所述真空锅的直径为19～29cm，高度为12～15cm；所述真空管的内径为10～12mm。
[0017]本专利技术还提供一种如上任一项所述的微量核酸真空离心浓缩装置的微量核酸溶液浓缩方法，包括：
[0018]接收对人机交互模块的第一浓缩输入指令；
[0019]响应于所述第一浓缩输入指令，分别控制离心机构与抽真空机构启动，在室温条件下对装有待浓缩核酸溶液的微量离心试管进行一次真空离心操作，控制对微量离心试管的离心时长大于对真空锅的抽真空时长，得到浓缩后的核酸溶液；
[0020]其中，所述待浓缩核酸溶液的体积小于或等于50μl，初始浓度小于1～5ng/μl，所述浓缩后的核酸溶液的体积为7
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种微量核酸真空离心浓缩装置，其特征在于，包括：真空锅、气溶胶吸附件、离心机构及抽真空机构；所述真空锅的壳壁上设有抽气孔，所述抽气孔与所述抽真空机构连通，所述抽真空机构用于对所述真空锅的内部环境进行抽真空处理；所述离心机构包括离心转子，所述离心转子可转动地设于所述真空锅内，所述离心转子上用于安装微量离心试管，以对所述微量离心试管内盛装的微量核酸样本进行浓缩；所述气溶胶吸附件设于所述抽气孔中，所述气溶胶吸附件用于吸附所述真空锅的内部环境中的核酸气溶胶；其中，所述微量核酸样本包括核酸溶液与石蜡切片组织核酸样本，所述核酸溶液为包含循环肿瘤细胞、培养细胞、液体提取细胞、穿刺细胞或脱落细胞的核酸溶液样本，所述石蜡切片组织核酸样本为石蜡切片细胞样本。2.根据权利要求1所述的微量核酸真空离心浓缩装置，其特征在于，所述气溶胶吸附件包括底座、核酸吸附膜及压盖；所述底座的第一端设有转接端口，所述底座的第二端设有安装槽；所述转接端口与所述安装槽的槽底连通；所述转接端口与所述抽气孔可拆卸式连接；所述压盖与所述安装槽的槽壁可拆卸式连接；所述核酸吸附膜设于所述压盖与所述安装槽的槽底的相对壁面之间；所述核酸吸附膜用于吸附所述核酸气溶胶，以及供所述真空锅的内部环境中除所述核酸气溶胶之外的气体通过。3.根据权利要求2所述的微量核酸真空离心浓缩装置，其特征在于，所述核酸吸附膜包括硅胶膜、醋酸纤维素滤膜、硝酸纤维素膜当中的任一种。4.根据权利要求1至3任一所述的微量核酸真空离心浓缩装置，其特征在于，所述真空锅的壳壁上设有回气孔，所述回气孔与回气管的一端连通，所述回气管上装有回气阀。5.根据权利要求4所述的微量核酸真空离心浓缩装置，其特征在于，所述真空锅的壳壁上设有恒温控制装置；所述恒温控制装置用于控制所述真空锅的内部环境的温度维持在25℃～37℃。6.根据权利要求5所述的微量核酸真空离心浓缩装置，其特征在于，还包括：人机交互模块；所述人机交互模块分别与所述离心机构、所述抽真空机构、所述回气阀及所述恒温控制装置连接；所述人机交互模块用于接收开机指令、接收选择微量核酸处置类别以及进行浓缩参数的配置；所述浓缩参数包括离心时间、抽真空时间、回气时间、真空度及离心温度当...
【专利技术属性】
技术研发人员：赖仁胜，王君凯，沈洪波，邓文海，王远宁，白玲，姜丽红，付同亮，王燕，奎翔，孟斌，印明柱，朱雄增，施达仁，赖陆杨，赵龙，闫莎，谭金祥，王朝夫，陈琼荣，徐传彬，宋迪，吕敦宁，谢玲，郑燕影，孙怡，陈劼，杨邦杰，吴春，陈昱江，王丽，柯尊富，章建国，胡建军，何建芳，王志蕙，樊祥山，徐新宇，李丽，赵子龙，张建兵，朱虹光，张樱，吴冀峰，茹怡，刘沈林，刘兰，唐源，侯英勇，戴运华，张庆玲，何向蕾，孙世珺，戴文斌，张蔚，周晓莉，鲁常青，李秀凤，邵牧民，王刚平，牧启田，芦敏华，李菲，李桂梅，吴丽莉，孙荣超，孙伟东，李艳东，张帆，
申请(专利权)人：江苏基智诊疗有限公司，
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