重组蛋白的纯化方法技术

在此公开了一种重组蛋白的纯化方法。具体地说是一种采用疏水电荷诱导层析纯化重组蛋白的方法，所述方法包括对包含目标重组蛋白和宿主细胞蛋白的料液进行疏水电荷诱导层析由此去除宿主细胞蛋白，所述疏水电荷诱导层析包括以下步骤：将料液上样到经平衡的疏水电荷诱导层析介质上使得目标重组蛋白与疏水电荷诱导层析介质结合；用含有淋洗添加剂的淋洗缓冲液淋洗疏水电荷诱导层析介质，所述淋洗添加剂选自：氯化钠(NaCl)，谷氨酸，组氨酸和精氨酸盐酸；用洗脱缓冲液从疏水电荷诱导层析介质上洗脱目标重组蛋白并收集含有目标重组蛋白的洗脱液。脱液。

【技术实现步骤摘要】
重组蛋白的纯化方法


[0001]本专利技术涉及重组蛋白类生物制品生产领域，更具体地说，涉及采用疏水电荷诱导层析的重组蛋白纯化工艺。

技术介绍

[0002]中国仓鼠卵巢(CHO)细胞被广泛应用于生产药用蛋白质。伴随着目标蛋白质的表达，大量的过程相关的杂质会被释放到发酵液中，例如宿主细胞蛋白质(Host Cell Protein,HCP)和宿主DNA。其中，HCP是一类重要的污染物，会影响产品的稳定性、纯度和药效，还可能会引起机体的过敏反应。因此，在蛋白纯化过程中如何有效地去除HCP是下游工艺开发的重要组成部分。
[0003]疏水电荷诱导层析(Hydrophobic Charge Induction Chromatography，HCIC)是一种非特异性的混合模式层析，可用于抗体、Fc融合蛋白和无融合标签的其他重组蛋白的捕获和精纯步骤。HCIC层析作用原理如下：目标蛋白在相对温和、接近中性的pH条件下主要通过疏水相互作用与HCIC填料结合；通过降低流动相的pH，使填料配基的带电性质发生变化，与目标蛋白间产生静电排斥作用，从而使目标蛋白被洗脱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种采用疏水电荷诱导层析纯化重组蛋白的方法，所述方法包括对包含目标重组蛋白和宿主细胞蛋白的料液进行疏水电荷诱导层析由此去除宿主细胞蛋白，所述疏水电荷诱导层析包括以下步骤：将料液上样到经平衡的疏水电荷诱导层析介质上使得目标重组蛋白与疏水电荷诱导层析介质结合；用含有淋洗添加剂的淋洗缓冲液淋洗疏水电荷诱导层析介质，所述淋洗添加剂选自：氯化钠(NaCl)，谷氨酸，组氨酸和精氨酸盐酸；用洗脱缓冲液从疏水电荷诱导层析介质上洗脱目标重组蛋白并收集含有目标重组蛋白的洗脱液。2.如权利要求1所述的方法，其中，当所述淋洗缓冲液包含NaCl为淋洗添加剂时，NaCl的浓度≤1.0M，例如0.1
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1.0M、0.1
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0.5M或0.5
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1.0M；或者，当所述淋洗缓冲液包含谷氨酸为淋洗添加剂时，谷氨酸的浓度≤0.5M，例如0.1
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0.5M、0.2
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0.5M或0.3
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0.5M；或者，当所述淋洗缓冲液包含组氨酸为淋洗添加剂时，组氨酸的浓度≤0.5M，例如0.1
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0.5M、0.2
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0.5M或0.3
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【专利技术属性】
技术研发人员：胡翠云，孙李靖，刘娜，何林姣，许尧，罗明江，林世文，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：