一种从灵芝单孢杂交育种获得高腺苷含量的杂交菌株的方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种从灵芝单孢杂交育种获得高腺苷含量的杂交菌株的方法和用途，所述方法包括如下步骤：1)筛选无锁状联合和不出菇的单核菌株，由若干所述单核菌株组成群；2)将所述单核菌株两两配对配制成多个杂交组，将单个所述杂交组接种于培养料中，在黑暗条件下进行菌丝培养；3)菌丝成熟后，在光照条件下进行出菇培养，得到子实体；出菇培养期间观察出菇情况，测定所述子实体的腺苷含量；4)根据出菇情况和腺苷含量测定结果，筛选能出菇和腺苷含量高的杂交组，得到所述高腺苷含量的杂交菌株。本发明专利技术的单孢杂交育种方法便于操作，缩短了杂交流程，得到的杂交菌株在栽培袋内生长满袋的时间短，出菇时间短，转换率高，且腺苷含量高。且腺苷含量高。

【技术实现步骤摘要】
一种从灵芝单孢杂交育种获得高腺苷含量的杂交菌株的方法和用途


[0001]本专利技术属于菌类栽培
，具体涉及一种从灵芝单孢杂交育种获得高腺苷含量的杂交菌株的方法和用途。

技术介绍

[0002]紫灵芝(Ganoderma sinense J.D.Zhao,L.W.Hsu&X.Q.Zhang)，隶属于Ganoderma灵芝属、Polyporaceae多孔菌科、Polyporales多孔菌目、Agaricomycetes伞菌纲、Basidiomycota担子菌门、Fungi真菌界。紫灵芝为我国特有种，子实体1年生，有柄，木栓质至木质；菌盖半圆形或近似匙形，宽2.5～9cm，厚0.4～1.2cm，表面紫黑色至近黑色，或紫褐色，有似漆样光泽，有明显或不明显的同心环沟和纵纹；边缘薄或钝，近截形，较盖面色淡或淡黄褐色；菌肉褐色至深褐色，厚1～3mm；菌管长0.3～lcm，污白色；管口污白色至深褐色。经济价值及栽培状况紫芝为著名药用菌，《神农本草经》早有记载，《圣济总录》和《御药院方》中有“紫芝丸”和“紫芝丹”。性温，味淡。能补中强智，宁心益胃。可用于治疗神经衰弱、失眠、胃痛、消化不良、口疮，并可解毒覃中毒。
[0003]研究证明，灵芝中的核苷类化合物能抑制血小板的过度聚集，降低血液的粘度，从而改善人体血液循环，对年老血稠或有瘀血倾向者具有良好的抗血凝效果，能防止血栓病如脑血栓、心肌梗塞等的发生。
[0004]本专利技术主要是筛选并选育高腺苷含量的紫灵芝，从而利用这些优良品种的产高腺苷的优点，为更多的人带来健康。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种从灵芝单孢杂交育种获得高腺苷含量的杂交菌株的方法和用途。
[0006]为了实现上述目的以及其他相关目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]本专利技术的目的在于保护，一种从灵芝单孢杂交育种获得高腺苷含量的杂交菌株的方法，包括如下步骤：
[0008]1)筛选无锁状联合和不出菇的单核菌株，由若干所述单核菌株组成群；
[0009]2)将所述单核菌株两两配对配制成多个杂交组，将单个所述杂交组接种于培养料中，在黑暗条件下进行菌丝培养；
[0010]3)菌丝成熟后，在光照条件下进行出菇培养，得到子实体；出菇培养期间观察出菇情况，测定所述子实体的腺苷含量；
[0011]4)根据出菇情况和腺苷含量测定结果，筛选能出菇和腺苷含量高的杂交组，得到所述的杂交菌株。
[0012]优选地，步骤1)中，所述单核菌株的筛选方法为：
[0013]1‑
1)孢子采集；
[0014]1‑
2)孢子稀释；将孢子和水混合，进行梯度稀释，得到孢子液；
[0015]1‑
3)孢子分离：将所述孢子液涂布于培养基上进行萌发，得到单菌落，挑取单菌落进行培养；
[0016]1‑
4)孢子鉴定：培养后通过镜检，筛选无锁状联合的菌株；将所述无锁状联合的菌株继续培养，筛选出不出菇的菌株；筛选出所述单核菌丝。
[0017]更优选地，步骤1
‑
2)中，所述孢子液的浓度为1
×
105～1
×
106个/mL。
[0018]更优选地，步骤1
‑
4)中，所述镜检的方法为：当单菌落在平板上长至菌落1cm大小时，挑取菌丝于载玻片上进行显微镜镜检，观察菌丝形态，挑选无锁状联合的菌株。
[0019]优选地，步骤2)中，所述培养料包括干料，所述干料包括以下重量份的原料组分：
[0020][0021]更优选地，所述促进剂选自茶梗、茶渣和甘蔗渣中的一种或多种。
[0022]本专利技术经研究发现，在传统灵芝培养基配方(如麸皮、木屑、玉米粉、石膏和石灰)的基础上，添加促进剂能促进灵芝中腺苷含量的提高。
[0023]更优选地，所述干料中促进剂的重量份可以为10～25份，也可以为20～35份，也可以为30～40份。在某个优选的实施方式中，为30份、28份。
[0024]更优选地，所述干料中木屑的重量份可以为30～41份，也可以为38～42份，也可以为41～50份。在某个优选的实施方式中，为45份。
[0025]更优选地，所述干料中麸皮的重量份可以为15～22份，也可以为17～24份，也可以为23～30份。在某个优选的实施方式中，为20份。
[0026]更优选地，所述干料中玉米粉的重量份可以为玉米粉0.5～5.5份，也可以为5.2～8.6份，也可以为7.8～9份。在某个优选的实施方式中，为3份、5份。
[0027]更优选地，所述干料中石膏的重量份可以为0.1～0.6份，也可以为0.5～0.8份，也可以为0.7～1.2份。在某个优选的实施方式中，为1份。
[0028]更优选地，所述干料中蔗糖的重量份可以为0.2～0.6份，也可以为0.4～1.1份，也可以为1.0～1.5份。在某个优选的实施方式中，为1份。
[0029]更优选地，所述干料还包括功能性缓释颗粒；所述功能性缓释颗粒由牡蛎提取液和蚯蚓粪组成。
[0030]进一步选地，以干料总质量为基准计，所述功能性缓释颗粒的质量百分比为1～5％。
[0031]较佳地，所述功能性缓释颗粒的质量百分比可以为1～2.8％，也可以为2.2～3.8％，也可以为3.7～5％。在某个优选实施方式中，为2.8％。
[0032]进一步选地，所述蚯蚓粪与牡蛎提取液的料液比为(6～11)g/mL。
[0033]较佳地，所述功能性缓释颗粒的制备方法为：牡蛎提取液和蚯蚓粪混合，干燥后制成颗粒，然后对颗粒热处理，得到。
[0034]较佳地，所述热处理为以5～10℃/min的升温速率升温至150～180℃，保持50～70min。采用本专利技术上述特定的热处理条件，形成较为稳定的功能性缓释颗粒，发挥高效的保水、保肥功效。
[0035]本专利技术中牡蛎提取液可以通过市售渠道获得，也可以通过现有技术获得。本专利技术中将牡蛎去壳洗净，用超声波处理，经高速离心提取上清液，得到牡蛎提取液，其中离心速度为10000～15000r/min，离心时间5～20min。
[0036]本专利技术的牡蛎提取液中含有大量的氨基酸，能够满足灵芝对于养分的需求，同时，牡蛎提取物中含有大量的锌元素，而锌元素能促进灵芝中腺苷的积累，此外，上述的牡蛎提取物需要采用缓释的方式进行长期有效的释放。而蚯蚓粪具有很多孔隙结构、通气好、排水好和保水性好，同时，蚯蚓粪本身营养成分丰富，其所含的营养成分及微量元素等非常适合灵芝。牡蛎提取与蚯蚓粪的微孔结构互相配合，相辅相成，共同构成了本专利技术功能性缓释颗粒。
[0037]优选地，所述培养料还包括水，所述干料与水的重量份之比为(30～50)：60。
[0038]更优选地，所述干料与水的重量份之比可以为(30～42)：60，也可以为(38～46)：60，也可以为(45～50)：60。在某本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从灵芝单孢杂交育种获得高腺苷含量的杂交菌株的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)筛选无锁状联合和不出菇的单核菌株，由若干所述单核菌株组成群；2)将所述单核菌株两两配对配制成多个杂交组，将单个所述杂交组接种于培养料中，在黑暗条件下进行菌丝培养；3)菌丝成熟后，在光照条件下进行出菇培养，得到子实体；出菇培养期间观察出菇情况，测定所述子实体的腺苷含量；4)根据出菇情况和腺苷含量测定结果，筛选能出菇和腺苷含量高的杂交组，得到所述高腺苷含量的杂交菌株。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述单核菌株的筛选方法为：1
‑
1)孢子采集；1
‑
2)孢子稀释：将孢子和水混合，进行梯度稀释，得到孢子液；1
‑
3)孢子分离：将所述孢子液涂布于培养基上进行萌发，得到单菌落，挑取单菌落进行转接培养；1
‑
4)孢子鉴定：转接培养后通过镜检，筛选无锁状联合的菌株；将所述无锁状联合的菌株继续培养，筛选出不出菇的菌株；筛选出所述的单核菌株。3.如权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：管同刚，孙达锋，刘绍雄，张俊波，鲁淼，魏春梅，方庆秋，
申请(专利权)人：中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所若也南京生物科技研究有限公司，
类型：发明
国别省市：