脱蜡液及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种脱蜡液及其应用，所述脱蜡液包括脱蜡液I和脱蜡液II，其中脱蜡液I由质量份比为2～4:7的油酸甲酯：矿物油组成，脱蜡液II由质量份比为2～4:1的乙醇：环己酮组成。本发明专利技术的脱蜡液，由环保安全成分组成，既能与乙醇相溶，又能溶解石蜡，脱蜡效果与二甲苯相当。更进一步地，上述脱蜡液应用于病理检测组织脱蜡时，可以避免技术人员身体受到伤害、减轻环境污染和节约二甲苯净化成本。本发明专利技术制备的病理切片染色后在显微镜下能够观察到染色鲜明、结构清晰的细胞结构，与二甲苯脱蜡处理得到的结果基本一致，对医生阅片及诊断结果无影响。对医生阅片及诊断结果无影响。对医生阅片及诊断结果无影响。

【技术实现步骤摘要】
脱蜡液及其应用


[0001]本专利技术涉及病理学
，具体涉及一种脱蜡液及其应用。

技术介绍

[0002]苏木素(hematoxylin)和伊红(eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色法，其为石蜡切片技术里常用的染色法之一。细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大，因此细胞或组织切片经苏木素
‑
伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本的染色方法，应用及其广泛。
[0003]苏木素
‑
伊红染色法中的操作步骤，常见主要包括：脱蜡
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水化
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苏木素染色
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分化
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蓝化
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伊红染色
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脱水
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透明
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封片；待染色石蜡切片必须把切片上支撑组织的石蜡去除，这个过程称为脱蜡，脱蜡必须干净，否则会导致切片着色不均，点状或片状不着色，核浆对比不清。目前最常用的石蜡切片的脱蜡液主要是二甲苯，二甲苯也是病理制片过程中传统的组织透明剂，透明效果好，但易使组织收缩变脆、变硬，进而使切片困难。另外，二甲苯是一种高毒挥发性溶液，具有强烈刺激性气味的神经毒素，对长期接触的人员生理系统具有特殊伤害，产生靶器官效应，可出现眼及上呼吸道明显的刺激症状、眼结膜及咽充血、头晕、恶心、四肢无力、意识模糊等症状，对病理工作人员的身体健康产生严重危害；二甲苯挥发到空气中还易造成环境污染，且苯系物分解难度大，治理成本也更高。为此，寻找二甲苯的替代品已经成为当前亟待解决的问题。

技术实现思路

[0004]基于此，有必要针对上述问题，提供一种脱蜡液，采用该脱蜡液进行组织脱蜡，可以完全避免使用二甲苯，从而避免技术人员身体受到伤害、减轻环境污染和节省后续清理二甲苯的开支。
[0005]一种脱蜡液，包括脱蜡液I和脱蜡液II，所述脱蜡液I由质量份比为2～4:7的油酸甲酯：矿物油组成，所述脱蜡液II由质量份比为2～4:1的乙醇：环己酮组成。
[0006]上述脱蜡液，由环保安全的成分组成，既能与乙醇相溶，又能溶解石蜡，其中油酸甲酯和矿物油组成的脱蜡液I，能够较好的溶解组织切片中的石蜡，具有较佳的脱蜡效果，且同时兼顾了残留成分能够较好的与脱蜡液II中的环已酮和乙醇相溶，从而能够在不影响组织形态的前提下，被脱蜡液II进行置换，而脱蜡液II由乙醇和环已酮组成，其中的环己酮，一方面可避免乙醇对组织产生过度脱水的作用，另一方也能够与脱蜡液I的成分更为融合，而乙醇的存在增加了脱蜡液II的极性，提高了脱蜡液II整体成分与后续染色过程中的各成分的相融性，避免溶剂物化性质变化过快导致对组织的不利影响。最终，通过脱蜡液I和脱蜡液II的配合，达到既环保，脱蜡效果与二甲苯相当、甚至更好的目的。
[0007]在其中一个实施例中，所述脱蜡液I由质量份比为3:7的油酸甲酯：矿物油组成，所
述脱蜡液II由质量份比为3:1的乙醇：环己酮组成。
[0008]本专利技术还提供一种脱蜡液在病理学组织脱蜡染色中的应用。
[0009]在其中一个实施例中，所述染色为苏木素
‑
伊红染色。
[0010]本专利技术还提供一种苏木素
‑
伊红染色方法，包括以下步骤：
[0011](1)取组织切片，采用上述的脱蜡液Ⅰ和脱蜡液Ⅱ，依次分别脱蜡，冲洗；
[0012](2)苏木素染色，冲洗；
[0013](3)盐酸酒精分化，冲洗；
[0014](4)返蓝；
[0015](5)伊红染色，冲洗；
[0016](6)烤片：在65
±
5℃烤片1～3min；
[0017](7)透明；
[0018](8)封片。
[0019]上述染色方法整个过程不使用二甲苯，避免技术人员身体受到伤害、减轻环境污染和节约二甲苯净化成本。
[0020]并且，本专利技术采用上述脱蜡液进行组织染色，用时比传统方法中以二甲苯脱蜡时间短，全过程用时较短，有效提高苏木素
‑
伊红染色(HE染色)效率。同时，在透明处理之前，65
±
5℃烤片1～3min，加温可以取得理想的透明效果，而且相比二甲苯方法需要用润湿后封片，本专利技术由于采用了烤片过程的加温处理，之后可以直接封片，可以取得理想的透明效果和后续封片效果。
[0021]在传统方法中，由于透明和封片过程使用二甲苯，而二甲苯挥发快易引起组织干裂，该方法完全替代二甲苯，从而避免了组织干裂的问题。
[0022]在其中一些实施例中，所述步骤(1)中，所述脱蜡时间均为5
±
1min，脱蜡后直接采用水冲洗。在脱蜡后直接用水冲洗切片，省去了传统二甲苯方法脱蜡后的醇洗步骤，进一步缩短了组织的整体染色时间。
[0023]在其中一些实施例中，所述步骤(2)中苏木素染色5～6分钟；所述步骤(5)中伊红染色30秒～1分钟。具体可根据苏木素和伊红的染色情况，适当增加或减少染色时间。
[0024]在其中一些实施例中，所述步骤(3)中，所述盐酸酒精按照以下方法配制：将36wt％
‑
38wt％浓盐酸与75％的乙醇按照体积比为0.5～1:99混合，即得。
[0025]在其中一些实施例中，所述步骤(4)中，采用氨水溶液进行返蓝，所述氨水溶液按照以下方法配制：将质量体积浓度为25％的氨水与水按照体积比为0.5～0.8:99混合，即得。可以理解的，也可以使用温水或自来水进行冲洗返蓝。
[0026]在其中一些实施例中，所述步骤(7)中，采用松节油进行透明处理1～3min；所述步骤(8)中，以中性树胶直接封片。
[0027]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0028]本专利技术的脱蜡液，由环保安全成分组成，既能与乙醇相溶，又能溶解石蜡，脱蜡效果与二甲苯相当。
[0029]将上述脱蜡液应用于病理检测的组织脱蜡过程时，可以避免技术人员身体受到二甲苯的伤害、减轻环境污染和节约二甲苯净化成本。
[0030]本专利技术的苏木素
‑
伊红染色方法，一方面采用了上述脱蜡液，具有绿色环保安全的
优势，另一方面改变了染色步骤，脱蜡后直接用水冲洗切片，省去了传统二甲苯方法脱蜡后的醇洗步骤，全过程用时较常规方法短，有效提高了苏木素
‑
伊红染色(HE染色)效率。
[0031]另外，传统方法在透明和封片过程使用二甲苯，因二甲苯挥发快易引起组织干裂，该方法完全替代二甲苯，当将此脱蜡液与无二甲苯封片处理过程配合使用，如本专利技术的苏木素
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伊红染色方法，可以避免组织干裂的问题。
[0032]采用本专利技术的苏木素<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脱蜡液，其特征在于，包括脱蜡液I和脱蜡液II，所述脱蜡液I由质量份比为2～4:7的油酸甲酯：矿物油组成，所述脱蜡液II由质量份比为2～4:1的乙醇：环己酮组成。2.根据权利要求1所述的脱蜡液，其特征在于，所述脱蜡液I由质量份比为3:7的油酸甲酯：矿物油组成，所述脱蜡液II由质量份比为3:1的乙醇：环己酮组成。3.权利要求1～2任一项所述的脱蜡液在病理学组织脱蜡染色中的应用。4.根据权利要求3所述的脱蜡液在病理学组织脱蜡染色中的应用，其特征在于，所述染色为苏木素
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伊红染色。5.一种苏木素
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伊红染色方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取组织切片，采用权利要求1～2任一项所述的脱蜡液Ⅰ和脱蜡液Ⅱ，依次分别脱蜡，冲洗；(2)苏木素染色，冲洗；(3)盐酸酒精分化，冲洗；(4)返蓝；(5)伊红染色，冲洗；(6)烤片：在65
±
5℃烤片1～3min；(7)透明；(8)封片。6.根据权利要求5所述的染色为苏木素
‑
伊红染色方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述脱蜡时间均为5

【专利技术属性】
技术研发人员：刘新宇，梁伊灵，张斌，范例，李雨艳，孙配龙，王双阁，周婷婷，
申请(专利权)人：吉林金域医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：