细胞冷冻保存培养基制造技术

本发明专利技术提供用于任何种类细胞的冷冻保存组合物和方法，包括用于过继细胞疗法的细胞，所述细胞是现成细胞。用于冷冻保存的细胞可以是表达嵌合抗原受体的扩增NK细胞。在特定情况下，所述冷冻保存培养基包含冷冻保护剂，诸如DMSO、甘油或羟乙基淀粉；血清或非血清替代物，诸如血小板裂解物；和一种或多种天然的、经修饰的、合成的或重组的细胞因子。合成的或重组的细胞因子。合成的或重组的细胞因子。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞冷冻保存培养基
[0001]本申请要求以下美国临时专利申请的优先权：于2019年8月29日提交的美国临时专利申请系列号62/893,597，以及于2020年4月22日提交的美国临时专利申请系列号63/013,823，二者通过引用整体上并入本申请。
[0002]背景
1.

[0003]本专利技术整体上涉及细胞生物学、分子生物学、生物化学、免疫学和医学领域。
2.
技术介绍

[0004]用于体外研究或用于向人或动物施用的离体培养物的细胞(例如哺乳动物细胞)的培养是研究和治疗人类疾病的重要工具。细胞培养广泛用于产生各种生物学活性产物，诸如病毒疫苗、单克隆抗体、多肽生长因子、激素、酶和肿瘤特异性抗原。然而，许多用于培养细胞的培养基或方法包含可能对培养物中的细胞生长和/或细胞维持具有不利影响的组分。
[0005]另外，目前存在一些细胞库，用于储存细胞(例如人胎盘或脐带干细胞)以供将来的医疗用途。还存在储存在例如生物反应器中培养以用于科学目的以及用于医学疗法的细胞的细胞库。所有细胞库的共同点为通常通过在液氮中冷冻保存来储存细胞。本专本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种冷冻保存培养基组合物，其包含至少一种冷冻保护剂、至少一种血清或血清的非血清替代物和至少一种细胞因子和/或至少一种生长因子。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述冷冻保护剂为二甲亚砜(DMSO)、丙三醇、甘油、羟乙基淀粉(hydroxyethol starch)或其组合。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述非血清替代物包含血小板裂解物和/或血液制品裂解物或者人或动物血清白蛋白。4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述至少一种细胞因子是天然蛋白、重组蛋白、合成蛋白或其混合物。5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述至少一种细胞因子为美国食品药品监督管理局(FDA)批准的细胞因子。6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含两种或更多种细胞因子。7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中所述至少一种细胞因子为IL
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1、IL
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2、IL
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3、IL
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4、IL
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6、IL
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7、IL
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9、IL
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10、IL
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12、IL
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13、IL
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15、IL
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17、IL
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18、IL
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21、IL
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22、干扰素、肿瘤坏死因子、干细胞因子、FLT3
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配体、APRIL、血小板生成素、红血球生成素或其组合。8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中所述血清为动物来源的血清。9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述动物来源的血清为人血清或牛血清。10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述人血清是人AB血清。11.根据权利要求2至10中任一项所述的组合物，其中所述冷冻保护剂占所述组合物的4％至6％。12.根据权利要求2至10中任一项所述的组合物，其中所述冷冻保护剂占所述组合物的5％至10％。13.根据权利要求1至12中任一项所述的组合物，其中所述血清占所述组合物的5％至99％。14.根据权利要求1至13中任一项所述的组合物，其中所述血清占所述组合物的95％。15.根据权利要求3至14中任一项所述的组合物，其中所述血小板裂解物占所述组合物的5％至99％。16.根据权利要求3至15中任一项所述的组合物，其中所述血小板裂解物占所述组合物的95％。17.根据权利要求7至16中任一项所述的组合物，其中所述IL
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2以1至5000U/mL的浓度存在。18.根据权利要求7至16中任一项所述的组合物，其中所述IL
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2以400U/mL的浓度存在。19.根据权利要求7至18中任一项所述的组合物，其中所述IL
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21以10至3000ng/mL的浓度存在。20.根据权利要求7至19中任一项所述的组合物，其中所述IL
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21以20ng/mL的浓度存在。21.根据权利要求7至19中任一项所述的组合物，其中所述IL
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15以10至2000ng/mL的浓度存在。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含：(a)血小板裂解物、PlasmaLyte和Roswell Park Memorial Institute(RPMI)培养基中的一种或多种；(b)葡聚糖、白蛋白和DMSO中的一种或多种；以及(c)IL
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2、IL
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15和IL
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21中的一种或多种。23.根据权利要求22所述的组合物，其中所述血小板裂解物为所述组合物的50％至90％。24.根据权利要求22或23所述的组合物，其中所述血小板裂解物为所述组合物的约50％。25.根据权利要求22或23所述的组合物，其中所述血小板裂解物为所述组合物的约90％。26.根据权利要求22至25中任一项所述的组合物，其中所述PlasmaLyte为所述组合物的约32.5％至70％。27.根据权利要求22至26中任一项所述的组合物，其中所述PlasmaLyte为所述组合物的约32.5％。28.根据权利要求22至26中任一项所述的组合物，其中所述PlasmaLyte为所述组合物的约35％。29.根据权利要求22至26中任一项所述的组合物，其中所述PlasmaLyte为该组合物的约50％。30.根据权利要求22至26中任一项所述的组合物，其中所述PlasmaLyte为所述组合物的约70％。31.根据权利要求22至30中任一项所述的组合物，其中所述RPMI为所述组合物的32.5％至50％。32.根据权利要求22至31中任一项所述的组合物，其中所述RPMI为所述组合物的约32.5％。33.根据权利要求22至31中任一项所述的组合物，其中所述RPMI为所述组合物的约35％。34.根据权利要求22至31中任一项所述的组合物，其中所述RPMI为所述组合物的约50％。35.根据权利要求22至34中任一项所述的组合物，其中所述葡聚糖为所述组合物的约25％至40％。36.根据权利要求22至34中任一项所述的组合物，其中所述葡聚糖为所述组合物的约25％。37.根据权利要求22至34中任一项所述的组合物，其中所述葡聚糖为所述组合物的约40％。38.根据权利要求22至37中任一项所述的组合物，其中所述白蛋白为所述组合物的约1％至99％。39.根据权利要求22至38中任一项所述的组合物，其中所述白蛋白为所述组合物的约20％。
40.根据权利要求22至39中任一项所述的组合物，其中所述DMSO为所述组合物的约5％至7.5％。41.根据权利要求22至40中任一项所述的组合物，其中所述DMSO为所述组合物的5％。42.根据权利要求22至40中任一项所述的组合物，其中所述DMSO为所述组合物的7.5％。43.根据权利要求1至42中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含以下中之一：
44.根据权利要求1至43中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含以下中之一：
45.根据权利要求1至44中任一项所述的组合物，其进一步包含多个细胞。46.根据权利要求44所述的组合物，其中所述细胞为NK细胞、T细胞、B细胞、iNKT细胞、γ
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δT细胞、MSC、巨噬细胞、单核细胞、树突细胞、衍生自成熟细胞的NKT细胞、肿瘤细胞、干细胞、诱导性多能干细胞、MSC或其混合物。47.根据权利要求46所述的组合物，其中所述NK细胞是经扩增的NK细胞。48.一种药物组合物，其包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：K，
申请(专利权)人：得克萨斯大学体系董事会，
类型：发明
国别省市：