一种蛋白质热稳定性检测芯片的制备方法、检测方法和试剂盒技术

技术编号:33765747 阅读:38 留言:0更新日期:2022-06-12 14:16
本发明专利技术提供了一种蛋白质热稳定性检测芯片的制备方法、检测方法和试剂盒,用于筛选作用于新型冠状病毒(新冠病毒)靶点蛋白的药物和临床有效药物的作用靶点筛选。所述的蛋白质芯片热稳定性检测中包括新冠病毒的潜在靶点蛋白的种类包括:重组人蛋白ACE2、Cathepsin B(CTSB)、CD147、AXL、Anneixn A2、HMGB1、NFκB1(P50)、MAPK1、TAB1、重组病毒蛋白SARS

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白质热稳定性检测芯片的制备方法、检测方法和试剂盒


[0001]本专利技术属于生物医药
,具体涉及一种新型冠状病毒药物靶点蛋白质稳定性高通量检测芯片以及试剂盒。

技术介绍

[0002]蛋白质参与疾病的发生和发展过程,可以作为疾病靶标来开发特异性药物起到治疗的效果。以蛋白质作为药物靶点的药物筛选方法有很多种,例如基于SP R(Surface Plasmon Resonance)技术、等温滴定量热技术ITC(Isothermal titra tion calorimetry)等,但是这些方法也存在缺点。首先,检测通量低,每次(批) 只能检测少数样本;其次,仪器设备造价高,属于专用设备,不具有通用性。
[0003]中药具有组方快,副作用小的特点,在面对新型冠状病毒早期可以快速应用救治患者。中药具有先临床应用后药理研究的特点,目前一些疗效确切的中药和天然产物缺乏相关的靶点研究工具。
[0004]现有技术中目前没有直接检测蛋白质与药物相互作用且可以实时检测的基于蛋白热稳定性原理的蛋白质芯片,也没有针对新型冠状病毒的药物靶点作用分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质热稳定性检测芯片,用于抗新冠药物的筛选,同时也可用于中药等靶点筛选,其特征在于,所述的蛋白质芯片中包括新冠病毒相关药物靶点蛋白的纯品;所述的靶点蛋白的保存液为含有10

30%甘油,pH=6.7

7.5的磷酸盐缓冲液,所述的保存液中还包括防腐剂和信号增强剂;所述的热稳定性荧光信号信号增强剂为0.001

0.1%叠氮化钠。2.根据权利要求1所述的蛋白质热稳定性检测芯片,其特征在于,所述的靶点蛋白包括经过网络药理学筛选相关的高频药物靶点,包含宿主来源和病毒来源两部分;所述的靶点蛋白包括:重组人蛋白ACE2、Cathepsin B(CTSB)、CD147、AXL、Anneixn A2、HMGB1、NFκB1(P50)、MAPK1、TAB1、重组病毒SARS

CoV

2Nucleocapsid Protein、Non

structural protein SARS

CoV

2NSP2、SARS

CoV

23C

like Proteinase。3.根据权利要求2所述的蛋白质热稳定性检测芯片,其特征在于,所述的靶点蛋白用于热稳定性检测的序列进一步优化为SEQ ID NO.1

12。4.根据权利要求3所述的蛋白质热稳定性检测芯片,其特征在于,所述的芯片中用于热稳定性检测的NFκB1(P50)蛋白终浓度为0.045

1μg/μL。5.根据权利要求4所述的蛋白质热稳定性检测芯片,其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈鹏杨洪军崔钊黎彩凤
申请(专利权)人:中国中医科学院医学实验中心
类型:发明
国别省市:

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