表达T调节性细胞的抗CD83嵌合抗原受体制造技术

披露了用于抑制而不杀伤同种异体反应性和/或自身反应性淋巴细胞的组合物和方法。这些方法可用于预防正接受供体细胞或正治疗自身免疫的受试者中的移植物抗宿主病(GVHD)。具体而言，披露了可与过继细胞转移一起使用以抑制同种异体反应性或自身反应性淋巴细胞的嵌合抗原受体(CAR)多肽。还披露了经工程化以表达这些CAR的调节性T细胞。因此，还披露了抑制有需要的受试者中的同种异体反应性或自身反应性淋巴细胞的方法，这些方法包括过继转移披露的调节性T细胞，这些调节性T细胞被工程化以表达披露的CAR。表达披露的CAR。表达披露的CAR。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】表达T调节性细胞的抗CD83嵌合抗原受体
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年8月16日提交的美国临时申请号62/888,055的权益，将其通过引用以其全文特此并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含作为创建于2020年8月13日的名称为“320803_2420_Sequence_Listing_ST25”的ASCII.txt文件的以电子形式提交的序列表。将序列表的内容以其全文并入本文。

技术介绍

[0005]同种异体造血细胞移植(HCT)是血液恶性肿瘤的有效疗法，但它受急性移植物抗宿主病(GVHD)的限制。GVHD在供体T细胞响应于宿主细胞上的遗传限定蛋白时出现，并且是与HCT相关的高死亡率的关键原因。当前用以控制GVHD的免疫抑制措施广泛地抑制介导GVHD的同种异体反应性T细胞，但也损害了促进免疫耐受性的有益调节性T细胞(Treg)。此外，使用钙调神经磷酸酶抑制剂(如他克莫司抑制剂)甚至限制了由供体免疫介导的移植物抗白血病(GVL)，这是allo
‑
HCT预防疾病复发的关键宗旨。

技术实现思路

[0006]本文披露了抑制受试者中的同种异体反应性和自身反应性细胞的方法，如接受移植的供体造血细胞或实体器官同种异体移植物的受试者或具有自身免疫疾病的受试者，该方法涉及向受试者施用有效量的经遗传修饰以表达靶向CD83的嵌合抗原受体(CAR)的调节性T(Treg)细胞。CD83在同种异体反应性T细胞上而非在Treg上差异表达。因此，所披露的CD83 CAR Treg将靶向导致GVHD的T细胞并免除GVL。即使当供体是完全HLA匹配的，次要的HLA差异或者H
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Y抗原的存在足以导致GVHD。此外，并非所有供体与受体都是HLA匹配的，如HLA
‑
DP不匹配，这也可导致严重的GVHD。CD83 CAR Treg的独特益处是，它可以抑制而非杀伤同种异体反应性T细胞，以避免淋巴细胞减少症。
[0007]在一些实施例中，该方法涉及用有效量的披露的CD83 CAR Treg细胞治疗受试者，以治疗GVHD或自身免疫疾病，而不会引起临床相关的淋巴细胞减少症，如白细胞减少症。在T淋巴细胞减少症中，存在过少T淋巴细胞，但存在正常数量的其他淋巴细胞。在T淋巴细胞减少症中，存在过少B淋巴细胞，但可能存在正常数量的其他淋巴细胞。它导致并表现为体液免疫缺乏。在NK淋巴细胞减少症中，存在过少自然杀伤细胞，但存在正常数量的其他淋巴细胞。
[0008]在成人中，白细胞减少症是总WBC计数<3700个细胞/mm3。大多数病例由绝对中性粒细胞减少症导致(<2500个细胞/mm3)；罕见病例继发于绝对淋巴球减少症(<1000个细胞/mm3)。
[0009]在一些实施例中，当全部血细胞计数显示低于适龄的参考区间(例如，在成人中低于1.0x109个/L)的淋巴细胞计数时，可诊断出淋巴细胞减少症。
[0010]在一些实施例中，当CD4细胞计数小于300个细胞/微升(包括小于100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300个细胞/微升)时，诊断出淋巴细胞病。
[0011]在一些实施例中，当小于20％(包括小于5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％或20％)的T淋巴细胞为CD4+时，诊断出淋巴细胞减少症。
[0012]因此，本文披露了抑制受试者中的同种异体反应性或自体反应性淋巴细胞的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的调节性T(Treg)细胞以抑制但不杀伤表达CD83的同种异体反应性或自身反应性淋巴细胞，其中该Treg细胞经基因修饰以表达嵌合抗原受体(CAR)多肽，该多肽包含CD83抗原结合结构域、跨膜结构域、细胞内信号传导结构域和共刺激信号传导区，从而抑制该受试者中的同种异体反应性供体细胞。在一些实施例中，受试者是移植供体细胞的受体。例如，在一些实施例中，供体细胞与受试者不是HLA匹配的。在其他实施例中，这些移植供体细胞具有少于3、4、5或6个与该受试者HLA匹配的标记。在一些实施例中，受试者未曾接受免疫抑制剂。
[0013]在其他实施例中，受试者患有自身免疫疾病。例如，在一些实施例中，自身免疫疾病选自由以下组成的组：贲门失弛缓症；急性播散性脑脊髓炎(ADEM)；阿狄森病；痛性肥胖症；成人斯蒂尔病；无丙种球蛋白血症；斑秃；淀粉样变性；强直性脊柱炎；抗GBM/抗TBM肾炎；抗N
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甲基
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D
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天冬氨酸(抗NMDA)受体脑炎；抗磷脂综合征；抗合成酶综合征；再生障碍性贫血；自身免疫性血管性水肿；自身免疫性自主神经功能障碍；自身免疫性脑脊髓炎；自身免疫性肠病；自身免疫性肝炎；自身免疫性内耳病(AIED)；自身免疫性淋巴增生综合征；自身免疫性心肌炎；自身免疫性卵巢炎；自身免疫性睾丸炎；自身免疫性胰腺炎；自身免疫性多内分泌腺病综合征(APS)1型；自身免疫性多内分泌腺病综合征(APS)2型；自身免疫性多内分泌腺病综合征(APS)3型；自身免疫性视网膜病；自身免疫性荨麻疹；轴突和神经元神经病(AMAN)；巴洛病(Bal
ó
disease)；白塞病；良性黏膜类天疱疮；Bickerstaff脑炎；大疱性类天疱疮；卡斯特曼病(CD)；乳糜泻；查加斯病；慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病(CIDP)；慢性复发性多灶性骨髓炎(CRMO)；Churg
‑
Strauss综合征(CSS)或嗜酸性肉芽肿病(EGPA)；瘢痕性类天疱疮；科根综合征(ogan
’
s syndrome)；冷凝集素病；先天性心脏传导阻滞；柯萨奇心肌炎；CREST综合征；克罗恩病；疱疹样皮炎；皮肌炎；德维克病(Devic
’
s disease)(视神经脊髓炎)；盘状狼疮；德雷斯勒综合征(Dressler
’
s syndrome)；药物诱发性狼疮；子宫内膜异位症；附着点炎症相关性关节炎；嗜酸性食道炎(EoE)；嗜酸性筋膜炎；获得性大疱性表皮松解症；结节性红斑；原发性混合型冷球蛋白血症；埃文斯综合征(Evans syndrome)；费尔蒂综合征(Felty Syndrome)；纤维肌痛；纤维化肺泡炎；巨细胞动脉炎(颞动脉炎)；巨细胞心肌炎；肾小球肾炎；Goodpasture综合征；多血管炎性肉芽肿病；格雷夫斯病(Graves
’
disease)；格林
‑
巴利综合征；桥本氏脑病(Hasimoto
’
s encephalopathy)；桥本氏甲状腺炎；溶血性贫血；亨
‑
舒综合症(Henoch
‑
Schonlein purpura，HSP)；妊娠本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抑制受试者中的同种异体反应性或自体反应性淋巴细胞的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的调节性T(Treg)细胞以抑制但不杀伤表达CD83的同种异体反应性或自身反应性淋巴细胞，其中该Treg细胞经基因修饰以表达嵌合抗原受体(CAR)多肽，该多肽包含CD83抗原结合结构域、跨膜结构域、细胞内信号传导结构域和共刺激信号传导区，从而抑制该受试者中的同种异体反应性供体细胞。2.如权利要求1所述的方法，其中该受试者是移植供体细胞的受体。3.如权利要求2所述的方法，其中这些供体细胞与该受试者不是HLA匹配的。4.如权利要求2所述的方法，其中这些移植供体细胞具有少于3、4、5或6个与该受试者HLA匹配的标记。5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中该受试者未曾接受免疫抑制剂。6.如权利要求1所述的方法，其中该受试者患有自身免疫疾病。7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中这些同种异体反应性或自身反应性淋巴细胞是表达CD83的T淋巴细胞。8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中该CD83抗原结合结构域是特异性结合CD83的抗体的单链可变片段(scFv)。9.如权利要求8所述的方法，其中该抗CD83 scFv包含具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变重(V
H
)结构域和具有CDR1、CDR2和CDR3序列的可变轻(V
L
)结构域，其中该V
H
结构域的CDR1序列包含氨基酸序列SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:7、或SEQ ID NO:13；该V
H
结构域的CDR2序列包含氨基酸序列SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:8、或SEQ ID NO:14；该V
H
结构域的CDR3序列包含氨基酸序列SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9、或SEQ ID NO:15；该V
L
的CDR1序列包含氨基酸序列SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:10、或SEQ ID NO:16；该V
L
结构域的CDR2序列包含氨基酸序列SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:11、或SEQ ID NO:17；并且该V
L
结构域的CDR3序列包含氨基酸序列SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:12、或SEQ ID NO:18。10.如权利要求9所述的方法，其中该抗CD83 scFv V
H
结构域包含氨基酸序列SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、或SEQ ID NO:...

【专利技术属性】
技术研发人员：M达维拉，B贝茨，
申请(专利权)人：H李莫菲特癌症中心和研究所股份有限公司，
类型：发明
国别省市：