一种测定复方苦参注射液总糖含量的方法技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种测定复方苦参注射液总糖含量的方法，所述方法包括：(1)复方苦参注射液供试品溶液的制备，(2)D

【技术实现步骤摘要】
一种测定复方苦参注射液总糖含量的方法


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种测定复方苦参注射液总糖含量的方法。

技术介绍

[0002]复方苦参注射液一种由苦参和白土苓组成的中药注射液，具有清热利湿，凉血解毒，散结止痛的功效。主要用于癌肿疼痛、出血。
[0003]目前复方苦参注射液的研究主要集中在生物碱及黄酮类成分，对于糖类物质的研究相对较少，且近年来，中药糖类作为一类生物活性成分，具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、抗肺癌等多种功能，已成为各类学者研究的热点。
[0004]对于中药中糖类的检测多数采用苯酚硫酸法和硫酸蒽酮法测定总糖(包括多糖、单糖和糖醛酸)，但是由于该方法检测的是存在于反应液中的单糖形式，其原理共通点为硫酸水解糖链，生成单糖并迅速脱水成为糠醛及衍生物，糠醛及衍生物与苯酚或蒽酮缩合形成有色反应物，这种方法的缺点在于只要中药材中存在有糖链的物质例如皂苷均会产生单糖参与显色反应，使所测含量与总糖实际含量出现偏差。目前文献尚未发现更为效果的复方苦参注射中有关总糖含量检测方法，其研究情况大致如下：
[0005]陈晨等人发表了近红外透反射光谱法用于复方苦参注射液渗漉过程在线检测(《中草药》第44卷第1期，2013年1月，第47～51页)，所述方法包括将渗漉液直接进行显色后用苯酚
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硫酸法进行检测。但是，复方苦参注射液在渗漉过程中，含有非常多的杂质例如皂苷、纤维素等带有糖链的物质，直接用渗漉液测定其中总糖的含量，仅是粗略的测定，所测得含量具有非常大的偏差；其次该方法若用于复方苦参注射液成品的测定，该方法中没有总糖纯化部分，故无法排除带有糖链的非糖物质干扰，所测得含量仍然不准确。
[0006]陈彦旭等人发表了苦参多糖的提取分离、理化性质及免疫调节活性研究(《国际药学研究杂志》第45卷第8期，2018年8月，第611～618页)所述方法包括采用苯酚硫酸法测定总多糖(SFP
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100)、多糖组分、多糖亚组分的糖含量。但是，该方法在测定总多糖(SFP
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100)含量时，由于未经过纯化步骤，含有过多带糖链的非糖物质的杂质，使含量测定偏高，实验结果不准确；测定经过DEAE
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纤维素获得的多糖组分时，该方法较大孔树脂更繁琐，大孔树脂直接用水即可洗脱完成，该方法除第一步用水外，还分别需要两步碳酸氢钠洗脱；测定经过Sephadex G
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100凝胶柱的多糖亚组分时，由于经分离纯化处理最终得到的成分为总糖中的几个具有代表性的成分，该方法仅能测定部分糖类成分，不适合总糖的测定。
[0007]因此，为更加有效测定复方苦参注射液总糖含量，开发一种改进的复方苦参注射液总糖含量测定方法，以去除皂苷等非糖物质的干扰，使检测结果更加准确、可靠是非常必要的。

技术实现思路

[0008]针对以上技术现状，本专利技术提供一种改进的复方苦参注射液总糖含量测定方法。具体专利技术如下：
[0009]本专利技术提供了一种测定复方苦参注射液总糖含量的方法，所述方法包括：
[0010](1)复方苦参注射液供试品溶液的制备，(2)D
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无水葡萄糖对照品溶液的制备：(3)复方苦参注射液供试品的检测，其中采用苯酚硫酸法测定供试品溶液总糖含量；优选采用苯酚硫酸法；
[0011]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(1)中复方苦参注射液供试品溶液的制备包括如下：复方苦参注射液加水稀释，在大孔吸附树脂柱进行上样，用水洗脱，收集滤出液，加水稀释，作为样品溶液。
[0012]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(1)中大孔吸附树脂包括但不限于AB
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8、HPD100或D101；优选AB
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8。
[0013]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述方法进一步包括步骤(1)中AB
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8柱的床容积(BV)为15ml，规格为高15cm，直径Ф1.5cm。
[0014]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述方法进一步包括步骤(1)中复方苦参注射液上样量为1～3.5ml、优选1ml，上样浓度为稀释1～5倍、优选5倍上样。
[0015]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述方法进一步包括步骤(1)中上样后吸附0～4h，优选不进行吸附，直接洗脱。
[0016]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述方法进一步包括步骤(1)中用1BV～8BV、优选3BV水洗脱。
[0017]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述方法进一步包括步骤(1)中所述滤出液加水稀释250
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2000倍，优选650
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1400倍，最佳为900
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1300倍，作为样品溶液。
[0018]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(1)中进一步包括收集滤出液至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。
[0019]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(1)中复方苦参注射液供试品溶液的制备包括如下：精密量取复方苦参注射液2ml至10ml量瓶中，用水稀释刻度，摇匀，精密量取稀释液5ml在AB
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8大孔吸附树脂柱上进行上样，用水洗脱，洗脱流速为0.566ml/cm2·
min，用量为3BV，收集滤出液至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。
[0020]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(2)中D
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无水葡萄糖对照品溶液的制备包括如下：精密称取D
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无水葡萄糖适量，加水溶解，配成1mg/ml的对照品标准品溶液，备用。
[0021]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(3)中苯酚溶液既可以选择市售产品直接用于本专利技术，也可采用本领域常规的方法进行制备，
[0022]作为实施方案之一，所述苯酚溶液优选采用如下方法的制备：称取苯酚，加入碳酸氢钠，常压蒸馏，接收馏分，放置阴凉干燥处，备用；然后称取此馏分苯酚5g，加水溶解，转移至100ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得5％苯酚溶液，备用。
[0023]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(3)中苯酚溶液的制备包括如下：称取苯酚100g，加碳酸氢钠0.05g，置于250ml圆底烧瓶中，常压蒸馏，接收180℃馏分，用包覆铝箔的三角瓶收集，放置阴凉干燥处，备用；称取此馏分苯酚5g，加水溶解，转移至100ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得5％苯酚溶液，备用。
[0024]本专利技术方法中，作为实施方案之一，所述步骤(3)进一步包括复方苦参注射液供试品的检测包括如下：精密量取D
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无水葡萄糖样品溶液1.0ml，空白取1.0ml蒸馏水，分别置15ml具塞试管中，加入5％苯酚溶液1.0ml，充分振摇后迅速加入浓硫酸5ml，振摇，迅速移至本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复方苦参注射液总糖含量的检测方法，其特征在于，所述方法包括：(1)复方苦参注射液供试品溶液的制备，(2)D
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无水葡萄糖对照品溶液的制备，(3)复方苦参注射液供试品的检测，其中采用苯酚硫酸法或蒽酮硫酸法测定供试品溶液总糖含量；优选采用苯酚硫酸法；所述步骤(1)中复方苦参注射液供试品溶液的制备包括如下：复方苦参注射液加水稀释，在大孔吸附树脂柱进行上样，用水洗脱，收集滤出液，加水稀释，作为样品溶液。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中大孔树脂包括AB
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8、HPD100或D101；优选AB
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8。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中AB
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8柱的床容积(BV)为15ml，规格为高15cm，直径Ф1.5cm。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括复方苦参注射液上样量为1～3.5ml、优选1ml，上样浓度为稀释1～5倍、优选5倍上样。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括上样后吸附0～4h；优选不进行吸附，直接洗脱。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括用1BV～8BV、优选3BV水洗脱。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括所述滤出液加水稀释250
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2000倍，优选650
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1400倍，最佳为900
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1300倍，作为样品溶液。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中进一步包括收集滤出液至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中复方苦参注射液供试品溶液的制备包括如下：精密量取复方苦参注射液2ml至10ml量瓶中，用水稀释刻度，摇匀，精密量取稀释液5ml在AB
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8大孔吸附树脂柱上进行上样，用水洗脱，用量为3BV，收集滤出液至100ml量瓶中，用水稀释至刻度，精密量取1ml至10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中D
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无水葡萄糖对照品溶液的制备包括如下：精密称取D
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无水葡萄糖适量，加水溶解，配成1mg/ml的对照品标准品溶液，备用。11.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：海丽娜，段秀梅，王洪玲，秦文杰，王红宇，
申请(专利权)人：北京振东光明药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：