SARS-CoV-2病毒B.1.1.529突变株DNA疫苗及应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种SARS

【技术实现步骤摘要】
SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株DNA疫苗及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种编码SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529 突变株抗原的DNA分子、DNA疫苗及应用。

技术介绍

[0002]SARS
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CoV
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2是具有包膜结构的单股正链RNA病毒，极易发生突变。其中，目前新出现流行的奥密克戎（英文名：Omicron，编号：B.1.1.529）突变株刺突蛋白S蛋白上有32个突变，针对受体结合域（RBD）区就有15处突变，包括K417N、S477N、T478K、E484K、N501Y、G339D、S371L、S373P、S375F、N440K、G446S、Q493R、G496S、Q498R和Y505H（吴俣, 刘珏, 刘民,等.中国全科医学, 2022），并且具有阿尔法（Alpha）、贝塔（Beta）、伽马（Gamma）和德尔塔（Delta）突变株刺突蛋白的重要氨基酸突变位点，例如，在阿尔法和贝塔突变株中出现的N501Y突变，可以提高刺突蛋白与血管收缩素转化酶2（ACE2）的结合能力，从而增强病毒的传染性；在贝塔和伽马突变株中出现的E484K突变，可以帮助变异毒株逃逸当前疫苗免疫的关键位点；此外，B.1.1.529突变株罕见地同时拥有两个位于弗林蛋白酶切割位点附近的突变，分别是P681H和N679K，这两处突变可能会加强其免疫逃逸能力，让刺突蛋白更容易被切割，从而增强病毒的感染能力。因而，需要开发出针对突变株的更为有效的疫苗。

技术实现思路

[0003]本专利技术中所述奥密克戎突变株即为编号B.1.1.529的SARS
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CoV
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2病毒突变株。
[0004]本专利技术的目的之一在于提供一种编码SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株抗原的DNA分子，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。
[0005]本专利技术的目的之二在于提供包括上述DNA分子的生物材料。
[0006]本专利技术的目的之三在于提供上述生物材料的应用。
[0007]本专利技术的目的之四在于提供包括上述DNA分子的SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株DNA疫苗。
[0008]本专利技术的目的之五在于提供上述DNA疫苗的制备方法。
[0009]本专利技术的目的之六在于提供上述DNA疫苗的应用。
[0010]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：本专利技术提供了编码SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株抗原的DNA分子，所述DNA分子具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列具有至少90%一致性的核苷酸序列。
[0011]本专利技术还提供了生物材料，所述生物材料包括：（a）重组表达载体，包括上述的DNA分子；（b）细胞，包括上述的DNA分子或（a）所述的重组表达载体；（c）多肽，由上述的DNA分子编码。
[0012]进一步的，所述重组表达载体包括真核表达载体，所述真核表达载体包括pVAX1。
[0013]优选地，所述细胞包括HEK293、CHO、COS
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7等细胞。
[0014]本专利技术还提供了上述的DNA分子或生物材料在如下（A）或（B）中的应用：（A）制备预防和/或治疗SARS
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CoV
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2病毒感染的疫苗；（B）制备预防和/或治疗SARS
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CoV
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2病毒引起的相关疾病的药物。
[0015]进一步的，所述SARS
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CoV
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2病毒包括B.1.1.529突变株、野生株、B.1.1.7突变株、B.1.351突变株、P.1突变株、B.1.2突变株、B.1突变株、B.1.525突变株、B.1.526突变株、C.37突变株、B.1.617.1突变株或B.1.617.2突变株。
[0016]本专利技术还提供了SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株DNA疫苗，包括上述的DNA分子。
[0017]进一步的，所述DNA分子存在于重组表达载体中，所述重组表达载体包括pVAX1。
[0018]进一步的，所述DNA疫苗还包括药学上可接受的佐剂、载体、稀释剂或赋形剂；和/或，至少一种对SARS
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CoV
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2病毒有治疗作用的药物。
[0019]优选地，所述佐剂包括铝佐剂和/或TLRs 配体和/或金属离子如Mn
2+
、Zn
2+
和/或细胞因子和/或趋化因子佐剂等。
[0020]本专利技术还提供了上述的DNA疫苗的制备方法，将包括上述的DNA分子的重组载体导入宿主细胞并进行培养，提取宿主细胞中的重组载体，得到DNA疫苗。
[0021]此外，本专利技术还提供了上述的DNA疫苗的应用，包括如下（i）
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（iii）：（i）调整机体的免疫功能；（ii）抗SARS
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CoV
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2病毒感染；（iii）防止免疫病理损伤；所述SARS
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CoV
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2病毒包括B.1.1.529突变株、野生株、B.1.1.7突变株、B.1.351突变株、P.1突变株、B.1.2突变株、B.1突变株、B.1.525突变株、B.1.526突变株、C.37突变株、B.1.617.1突变株或B.1.617.2突变株。
[0022]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术利用不同优化原则对SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株Spike蛋白的编码DNA序列进行优化，得到具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列或与SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列具有至少90%一致性的核苷酸序列的DNA分子。该DNA分子能够高效转录并表达SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株Spike抗原，并且具有免疫原性，能够诱导特定的体液免疫和细胞免疫应答。
[0023]基于上述编码SARS
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CoV
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2病毒B.1.1.529突变株抗原的DNA分子的有益效果，本专利技术还提供了包括上述DNA分子的DNA疫苗。该DNA疫苗不仅在哺乳动物细胞内能够有效转录和表达，同样也具有良好的免疫原性，对于体液免疫应答，该DNA疫苗在加强免疫后第7天能够显著激发实验动物产生抗原特异性抗体，不仅可以产生针对新冠野生型抗原的抗体，还能产生针对新冠B.1.1.529突变株抗原的抗体；对于细胞免疫应答，该DNA疫苗不本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种DNA分子，其特征在于，所述DNA分子具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。2.生物材料，其特征在于，所述生物材料包括（a）
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（c）至少一种：（a）重组表达载体，包括权利要求1所述的DNA分子；（b）细胞，包括权利要求1所述的DNA分子或（a）所述的重组表达载体；（c）多肽，由权利要求1所述的DNA分子编码。3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于，所述重组表达载体为真核表达载体，所述真核表达载体的载体骨架为pVAX1。4.权利要求1所述的DNA分子或权利要求2或3所述的生物材料在如下（A）或（B）中的应用：（A）制备预防和/或治疗SARS
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CoV
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2病毒感染的疫苗；（B）制备预防和/或治疗SARS
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CoV
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2病毒引起的相关疾病的药物。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述SARS
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CoV
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2病毒包括B.1.1.529突变株、野生株、B.1.1.7突变株、B.1.351突变株、P.1突变株、B.1.2突变株、B.1突变株、B.1.525突变株、B.1.526突变株、C.37突变株、B.1.617.1突变株或B.1.617.2突变株。6.一种DNA疫苗，其特征在于，包括权利要求1所述的DNA分子或者权利要求2或3中所述的重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵干，张志宇，侯佳望，丁媛，俞庆龄，
申请(专利权)人：艾棣维欣苏州生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：