一种具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯及其制备方法，所述冻干微芯包括以下重量百分比的原料：纤连蛋白10

【技术实现步骤摘要】
一种具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯及其制备方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯及其制备方法。

技术介绍

[0002]敏感性皮肤是一种皮肤高度敏感的状态，在这种状态下皮肤极易受到外界因素影响，出现皮肤瘙痒、紧绷、烧灼、刺痛等不适。研究显示，全球范围内的敏感肌肤正在日益增加，敏感性皮肤在亚洲女性中发生率为40％～55％，其中我国女性的发生率在36.1％。敏感性皮肤作为现代社会人群中发生率极高的皮肤问题，已经严重影响着人们的学习、工作和生活。市场上宣称具有敏感肌修复效果的护肤类产品琳琅满目，不乏一些功效差，甚至对皮肤有害的产品。
[0003]随着基因工程技术的不断发展，生物功效性护肤品也逐渐获得人们的青睐。该技术制备的功效性蛋白护肤品无论从生物学活性、皮肤亲和性、生物相容性等等均显著优于传统的化妆品。此外生物护肤品以生物活性蛋白为核心，注重产品有效成分对生物活性的保持，不添加防腐剂，不添加人工化学成分，对皮肤无刺激，能快速修复皮肤屏障，对皮肤修护功效优于传统化妆品，但是在敏感肌修复方面尚无类似产品。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯及其制备方法，所述冻干微芯为生物功效性产品，具有促细胞增殖活性和促细胞迁移活性，在乳酸刺痛实验中显示具有舒缓刺痛的功效，且制备时不添加防腐剂、人工化学成分，对皮肤无刺激。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：
[0006]一种具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯，所述冻干微芯包括以下重量百分比的原料：纤连蛋白10
‑
15ppm，血小板衍生生长因子10
‑
15ppm，金属硫蛋白Ⅳ型10
‑
15ppm，弹性蛋白10
‑
15ppm，丝聚蛋白20
‑
40ppm，冻干保护液，余量为水。
[0007]所述冻干保护液的重量百分比为10
‑
15％。
[0008]所述冻干保护液中各原料的重量比如下：甘露醇：甘氨酸：海藻糖＝4
‑
8：4
‑
8：1.
[0009]所述冻干微芯优选为包括以下重量百分比的原料：纤连蛋白15ppm，血小板衍生生长因子15ppm，金属硫蛋白Ⅳ型15ppm，弹性蛋白15ppm，丝聚蛋白20ppm，甘露醇6％，甘氨酸6％，海藻糖1％，余量为水。
[0010]所述冻干微芯优选为包括以下重量百分比的原料：纤连蛋白10ppm，血小板衍生生长因子10ppm，金属硫蛋白Ⅳ型10ppm，弹性蛋白10ppm，丝聚蛋白40ppm，甘露醇6％，甘氨酸6％，海藻糖1％，余量为水。
[0011]本专利技术还提供了所述具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯的
制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0012](1)将配方量的各原料混合得到混合液；
[0013](2)利用高精度流体分装系统，将混合溶液逐滴滴入存于杜瓦瓶的液氮中冷冻成微芯；
[0014](3)将微芯取出装入西林瓶中，进行冷冻干燥。
[0015]步骤(2)中，每滴混合溶液的体积为5
‑
60μL，优选为5
‑
15μL，更优选为10μL。
[0016]步骤(3)中，每个西林瓶中装入2
‑
20粒冷冻后的微芯。
[0017]所述冷冻干燥具体为：35～45Kpa的真空度下
‑
35
‑
45℃预冻170
‑
190min，并在同样的条件下冻结220～260min，随后在5～15Pa的真空度下进行一期升华干燥及二期升华干燥。
[0018]所述一期升华干燥的程序设计为：
‑
34～
‑
38℃保持55～65min，
‑
31～
‑
33℃保持150～200min，
‑
28～
‑
30℃保持400～450min，
‑
20～
‑
27℃保持220～260min，
‑
10～
‑
18℃保持220～260min，
‑
5～
‑
5℃保持100～140min；所述二期升华干燥的程序设计为：20～25℃保持280
‑
320min，28～
‑
30℃保持280
‑
320min。
[0019]本专利技术提供的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯的使用方法为：将适量纯化水加入到含有冻干微芯的西林瓶中，混合待微芯完全溶解后，即可使用。
[0020]本专利技术提供的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯的配方中，纤连蛋白(FN)广泛参与细胞迁移、黏附、增殖、止血及组织修复等过程，调动单核吞噬细胞系统清除损伤组织处有害物质，具有生长因子作用；血小板衍生生长因子(PDGF)能促进皮肤细胞的生长与更新，提升皮肤组织的生理活性与新陈代谢水平，增强皮肤细胞的免疫力与自我修复能力，修复由于日光、严寒、化学物质与机械磨损伤害造成的红血丝与敏感肌肤；金属硫蛋白是富含半胱氨酸的金属结合蛋白，其巯基能强烈螯合有毒金属，并将之排出体外，从而实现解毒功能，金属硫蛋白可清除自由基实现抗衰老、抗氧化及细胞凋亡；弹性纤维可提高皮肤的延展性和回弹性，使皮肤具有良好的柔韧性和弹性；丝聚蛋白可与皮肤内的相关蛋白共同组成角质包膜而成为皮肤屏障的重要组成部分，可防止皮肤水分丢失、提升皮肤的免疫屏障。
[0021]本专利技术提供的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯为生物功效性产品，易吸收，对皮肤无任何副作用，具有促细胞增殖活性和促细胞迁移活性，在乳酸刺痛实验中显示具有舒缓刺痛的功效，且制备时不添加防腐剂、人工化学成分，对皮肤无刺激，能修复敏感肌。其制备形式相较于普通的冻干粉，更有效的降低了冻干过程对于重组蛋白的活性损失。
具体实施方式
[0022]本专利技术所涉及的纤连蛋白的制备方法如下：
[0023](1)通过GenBank查询获得纤连蛋白(FN)基因，将FN基因序列插入到pMD19
‑
T Simple Vector中，其5
’
端接NotⅠ酶切位点(GCGGCCGC)，3
’
端接XbaⅠ酶切位点(TCTAGA)，由此得到质粒pMD19
‑
T
‑
FN；
[0024](2)用内切酶Not I和内切酶Xba I分别对质粒pYES2/CT
‑
MFα及质粒pMD19
‑
T
‑
FN进行双酶切，酶切反应体系为：
[0025]双酶切体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯，其特征在于，所述冻干微芯包括以下重量百分比的原料：纤连蛋白10
‑
15ppm，血小板衍生生长因子10
‑
15ppm，金属硫蛋白Ⅳ型10
‑
15ppm，弹性蛋白10
‑
15ppm，丝聚蛋白20
‑
40ppm，冻干保护液，余量为水。2.根据权利要求1所述的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯，其特征在于，所述冻干保护液的重量百分比为10
‑
15％。3.根据权利要求1所述的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯，其特征在于，所述冻干保护液中各原料的重量比如下：甘露醇：甘氨酸：海藻糖＝4
‑
8：4
‑
8：1。4.根据权利要求1
‑
3任意一项所述的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯，其特征在于，所述冻干微芯包括以下重量百分比的原料：纤连蛋白15ppm，血小板衍生生长因子15ppm，金属硫蛋白Ⅳ型15ppm，弹性蛋白15ppm，丝聚蛋白20ppm，甘露醇6％，甘氨酸6％，海藻糖1％，余量为水。5.根据权利要求1
‑
3任意一项所述的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯，其特征在于，所述冻干微芯包括以下重量百分比的原料：纤连蛋白10ppm，血小板衍生生长因子10ppm，金属硫蛋白Ⅳ型10ppm，弹性蛋白10ppm，丝聚蛋白40ppm，甘露醇6％，甘氨酸6％，海藻糖1％，余量为水。6.根据权利要求1
‑
5任意一项所述的具有皮肤屏障修复功效的纤连弹性蛋白组合物冻干微芯的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵俊，朱何龙，刘家炉，李媛媛，周炜，夏兵兵，何志远，许高涛，王梦，
申请(专利权)人：芜湖英特菲尔生物制品产业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：