【技术实现步骤摘要】
一种免预杂交的Northern blot杂交液及其应用
[0001]本专利技术属于分子生物学领域,具体涉及一种免预杂交的Northern blot杂交液及其应用。
技术介绍
[0002]Northern blot是主要用于检测基因mRNA表达水平变化的重要手段之一。相较于其他检测基因表达方法(如QPCR、基因芯片、RNA酶保护实验等),Northern blot具有灵敏度高、特异性强及假阳性低等特点,使得Northern blot实验被认为检测基因相对表达的最真实可靠的实验方法。Northern blot实验过程中,将探针与带有RNA的膜进行杂交是必不可少的实验步骤,但是目前无论是购买的杂交液还是公开的杂交液配方,在进行探针与膜杂交前均需要杂交液与膜进行预杂交,预杂交步骤需要0.5
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4小时不等,严重增加了实验的时长,耗费实验人员的精力。因此,研发一种免预杂交的Northern blot杂交液具有重要意义。
技术实现思路
[0003]为了解决现有技术中的不足,本专利技术的目的是提供一种免预杂 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种免预杂交的Northern blot杂交液,其特征在于,所述Northern blot杂交液的pH值为7.4,包括如下终浓度的组分:5
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SSC、20mM Na2HPO4、质量百分比为7%的SDS、质量百分比为0.02%的聚乙烯吡咯烷酮、质量百分比为0.02%的聚蔗糖400、质量百分比为0.02%的BSA、和质量百分比为0.5%的吐温
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20;所述5
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SSC含有0.75M的NaCl和0.075M的柠檬酸钠。2.权利要求1所述免预杂交的Northern blot杂交液的配置方法,其特征在于,所述配置方法包括:先用无菌水溶解Na2HPO4,调节pH值为7.4后,再分别加入其他组分充分溶解,即得。3.根据权利要求2所述的配置方法,其特征在于,所述配置方法包括:先用200mL无菌水溶解2.84g Na2HPO4,经磷酸盐调pH值为7.4后,再分别加入250mL 20
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SSC、70g SDS、0.2g聚乙烯吡咯烷酮、0.2g聚蔗糖400、0.2g BSA、和5mL吐温
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20,充分溶解后,定容至1L,即得;所述20
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SSC的pH值为7...
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