一种生乳中体细胞的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种生乳中体细胞的测定方法，步骤包括：染色溶液的制备；新鲜牛乳制膜染色；制样片；将样片置于显微镜下观察，计算体细胞个数。本发明专利技术所述方法对生牛乳中体细胞染色清晰，分辨度高，使得生牛乳中体细胞数量测定精确，误差较小。误差较小。

【技术实现步骤摘要】
一种生乳中体细胞的测定方法


[0001]本专利技术属于细胞检测
，尤其涉及一种生乳中体细胞的测定方法。

技术介绍

[0002]体细胞是动物及生物体中最小的功能单位，不同部位、不同种类生物体，所拥有的细胞具有不同的功能和特征。生乳中的体细胞主要来源有2个，一是来自乳腺分泌组织中的上皮细胞，也称腺细胞；二是来自与炎症、病毒进行抵抗过程中而死亡的白细胞。体细胞数是反映奶牛健康与牛奶卫生的重要指标。一是体细胞数可以准确反应牛群乳房炎等疾病的发病率。饲养者关注体细胞数的变化，可以随时了解奶牛群的健康状态与饲养水平，体细胞数提高，是奶牛群或者个体发出疾病的信号，饲养者可以提早行动而减少奶牛业损失。二是体细胞数指标可以反映乳品质量的优劣。国际乳业通识，体细胞数越低，鲜奶质量越高；体细胞数越高，对鲜奶的质量影响越大，并对鲜奶的保质期和下游其它乳制品如酸奶、奶酪等的产量、质量、风味等产生极大的不利影响。因此体细胞数被各国专家认为是鲜奶质量标准中最重要的指标之一。

技术实现思路

[0003]为解决准确测量生乳中的体细胞，本专利技术提供了一种生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生乳中体细胞的测定方法，其特征在于，步骤包括：1)在容器内配置硝酸铈的水溶液，搅拌条件下向溶液中加入氢氧化钠溶液，加料完成后密封容器，加热至170
±
5℃，保温10h以上，然后空冷至常温，打开容器，过滤，收集固相，固相用去离子水洗涤，烘干，获得固相A；2)配置正硅酸乙酯、氯铱酸的混合溶液，溶剂为无水乙醇和异丙醇的混合溶液，将所述固相A按固液质量比固/液＝1:10～20的比例浸泡在所述正硅酸乙酯、氯铱酸的混合溶液中5min，浸泡完成后将固相滤出，100
±
5℃环境下烘干10～15min，然后置于420～450℃环境下煅烧1～2h，煅烧完成后的固相按照固液比固/液＝1g:20～30mL的比例加入氢氧化钠溶液中，80
±
5℃水浴恒温搅拌浸泡2～3h，然后固液分离，固相用去离子水洗涤，烘干，获得固相B；3)将固相B加入二氯甲烷中获得混合物，常温条件下向混合物中滴加氯磺酸，加料完成后搅拌混合物60～70min，然后常温下静置30h以上，过滤，固相用乙醇洗涤，烘干，获得固相C；4)将杜仲叶清洗干净，置于60
±
5℃环境下烘干5h，然后粉碎获得杜仲叶粉，将所述杜仲叶粉加入纤维素酶溶液中，所述杜仲叶粉加入纤维素酶溶液中的料液比料/液＝1g/50～60mL，用稀盐酸调节溶液pH至5，55
±
5℃温度范围内水浴恒温超声波环境下提取60～70min，过滤去除固相，液相减压浓缩至未浓缩前体积的1/6，然后向浓缩后的液相中加入所述固相C，浓缩后的液相中加入固相C的质量比浓缩后的液相：固相C＝100:5～7；加料完成后水浴恒温至40
±
5℃，恒温搅拌8～10h，恒温搅拌结束后空冷至常温，过滤去除固相，液相减压浓缩至未浓缩前体积的1/2，获得液相D；5)在三角瓶中加入乙醇和四氯乙烷，混合均匀后水浴恒温至65
±
5℃保温3～5min，然后加入亚甲基蓝，混合均匀，空冷至常温，再加入冰醋酸，混匀后用砂芯漏斗过滤，依次向滤液中加入所述液相D、赖氨酸、聚乙二醇辛基苯基醚，搅拌10～12h，获得染色溶液，常温储存备用；6)采集待测新鲜牛乳，将新鲜牛乳在35
±
5℃的水浴锅中加热5～8min，然后冷却至常温获得牛乳试样；用无水乙醇清洗载玻片，并用无尘镜头纸擦拭干净；再用干净的微量注射器针头吸取所述牛乳试样，注射到所述载玻片上，涂抹均匀，...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭冬英，吴闯，冷顺琳，
申请(专利权)人：安徽华好阳光乳业有限公司，
类型：发明
国别省市：