蜂蜜中雷公藤甲素的测定方法技术

本发明专利技术提供了一种蜂蜜中雷公藤甲素的测定方法，属于食品安全检测技术领域。本发明专利技术针对目前采用高效液相法基质干扰大，灵敏度低，检出限高等问题，无法满足蜂蜜这类基质复杂样品对该类化合物检测的要求。本发明专利技术中采用乙酸乙酯提取蜂蜜中雷公藤甲素，经N

【技术实现步骤摘要】
蜂蜜中雷公藤甲素的测定方法


[0001]本专利技术属于食品安全检测


技术介绍

[0002]GB 14963
‑
2011《食品安全国家标准蜂蜜》中明确指出，蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露应安全无毒，不得来源于雷公藤、博落回等有毒蜜源植物。然而，近几年食用蜂蜜中毒事件仍频有发生，且多数为有毒蜜源植物雷公藤。因此，迫切需要制定蜂蜜中雷公藤甲素的补充检验方法，提高蜂蜜的食品安全监管靶向性，提早发现问题和风险，以避免雷公藤毒蜜源中毒事件再次发生。
[0003]目前国内还没有关于蜂蜜中雷公藤甲素的检测方法标准，而且只有极少几篇对雷公藤甲素检测方法的报道。对蜂蜜中雷公藤甲素的测定主要为高效液相法(HPLC)和超高效液相色谱法等方法，上述方法存在基质干扰大，灵敏度低，检出限高等问题，无法满足蜂蜜这类基质复杂样品对该类化合物检测的要求。
[0004]液相色谱
‑
串联质谱法(LC
‑
MS/MS)作为目前报道较多的方法，其具有专属性强，分辨率高的特点，山东农业大学硕士论文《雷公藤甲素和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蜂蜜中雷公藤甲素的测定方法，其特征在于，该方法的步骤如下：1)试样的制备与保存：对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀；对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时必须注意防止水分挥发；装入洁净容器，密封，标明标记；2)试样的提取：称取蜂蜜试样2.000g置于50mL离心管中，加入4mL水与蜂蜜充分混匀，加入乙酸乙酯15mL，经涡旋震荡和超声处理后，离心分离取上清液，沉淀再加入乙酸乙酯15mL，重复提取1次，合并上清液，旋转蒸发至干；3)试样的净化：残渣用2mL乙酸乙酯溶解，过N
‑
丙基乙二胺固相萃取柱，用乙酸乙酯5ml洗脱，收集洗脱液，氮气吹干；准确量取甲醇溶液1mL溶解残余物，经0.22μm微孔滤膜过滤，供液相色谱
‑
串联质谱测定；5)系列基质标准工作溶液的制备：准确量取雷公藤甲素标准中间液，用空白样品提取液溶解稀释，配制成雷公藤甲素的系列基质标准工作溶液；所述的雷公藤甲素标准中间液为1μg/mL的雷公藤甲素甲醇溶液；所述的空白样品提取液，不加试样重复步骤2)和步骤3)获得；6)液相色谱
‑
串联质谱测定A、液相色谱条件：色谱柱：C18柱，柱长75mm以上，粒径2.7μm；流动相：A为0.1wt％的甲酸溶液，B为甲醇；梯度洗脱程序如下：0～4min 90％A和10％B，4～6min 5％A和95％B，6～7min 3％A和97％B，7～10min 90％A和10％B；流速：300μL/min；柱温：室温；进样量：5μL；B、质谱参考条件：离子源：电喷雾离子源；检测方式：多反应模式；扫描方式：正离子模式扫描；电喷雾电压：5500V；气帘气：20L/min；雾化气压力：55L/min；辅助气压力：40L/min；离子源温度：500℃；定性离子对为361.1/141.2或361.1/104.9、定量离子对为361.1/128.0、去簇电压100V、碰撞能量定量测定为80eV、定性测定为80或60eV、碰撞室入口电压10V、碰撞室出口电压13V；C、定性测定通过试样色谱图的保留时间与相应标准品的保留时间、色谱峰的特征离...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丹彧，马彧，刘丽，李正刚，温铁岩，韩凤，
申请(专利权)人：四平市食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：