利用玉米植株表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法技术方案

本发明专利技术公开了一种利用玉米植株表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法，属于分子生物学与基因工程领域，具体涉及一种玉米植株高效表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法。本发明专利技术的目的是获得一种玉米植株高效表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法，通过密码子优化，将紫杉醇合成途径中的Geranylgeranyl Pyrophosphate Synthase、Taxadiene Synthase、Taxadiene 5

【技术实现步骤摘要】
利用玉米植株表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法


[0001]本专利技术公开了一种利用玉米植株表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法，属于分子生物学与基因工程领域，具体涉及一种玉米植株高效表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法。

技术介绍

[0002]紫杉醇（paclitaxel，C47H51NO4，）是从红豆杉属植物中提取的一种三环二萜类次生代谢产物。最初从太平洋红豆杉树皮中得到。紫杉醇类药物具有独特的抗肿瘤作用机制，它是一种抗微管药物，能与 β
‑
微管蛋白结合而加速蛋白质的聚合作用，从而促进微管形成和稳定已形成微管，最终使肿瘤细胞分裂周期停止而凋亡，同时其具有放射增敏作用，可能是使细胞中止于G2 和 M 期，这个时期的细胞于对放疗很敏感。紫杉醇对多种癌症具有高效的治疗作用，特别是卵巢癌和乳腺癌。由于紫杉醇高效、低毒、广谱的抗癌效果，它已成为迄今国际市场上最热门的抗癌药物，具有巨大的市场需求，但是紫杉醇的来源非常有限，严重制约了其商业化应用。
[0003]紫杉醇的主要来源是从红豆杉属植物中提取，但是红豆杉属植物中紫本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用玉米植株表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法，包括以下步骤：玉米植株高效表达紫杉醇合酶基因系统的建立，根据NCBI已经报道的Geranylgeranyl Pyrophosphate Synthase、Taxadiene Synthase、Taxadiene 5
‑
alpha Hydroxylase、5
‑
alpha
‑
Taxadienol
‑
10
‑
beta
‑
Hydroxylase、Taxane 13
‑
alpha
‑
Hydroxylase、Taxadienol Acetyl Transferase 、10
‑
Deacetylbaccatin III
‑
10
‑
O
‑
Acetyl Transferase 、Taxane 2
‑
alpha
‑
O
‑
Benzoyltransferase、Baccatin
ꢀ‑
Aminophenylpropanoyl
‑
13
‑
O
‑
Transferase、3'
‑
N
‑
debenzoyltaxol N
‑
Benzoyltransferase基因的cDNA序列，按照受体物种玉米的密码子偏爱性进行密码子优化，将优化后的基因序列，通过化学合成的方式，将所有基因串联在一起形成一个紫杉醇合酶表达系统(Paclitaxel Synthase Expression System，PSES，图1)，并克隆到植物双元表达载体pCAMBIA3301（图2）形成pCAMBIA3301
‑
PSES。2.根癌农杆菌介导玉米胚乳愈伤组织获得玉米转基因再生植株，根癌农杆菌介导的玉米遗传转化以农杆菌菌株EHA101为工程菌株，将pCAMBIA3301
‑
PSES（图1）表达载体通过玉米胚乳愈伤组织转入受体品种。3.根据权利要求1所述的一种利用玉米植株表达紫杉醇合酶基因系统生产紫杉醇的方法，其特征在于，所述的玉米植株高效表达紫杉醇合酶基因系统，所选用的基因在NCBI登录号分别为：Geranylgeranyl Pyrophosphate Synthase（EF417576）、Taxadiene Synthase（AY007207）、Taxadiene 5
‑
alpha Hydroxylase（AY289209）、5
‑
alpha
‑
Taxadienol
‑
10
‑
beta
‑
Hydroxylase（AF318211）、Taxane 13
‑
alpha
‑
Hydroxylase（AY056019）、Taxadienol Acetyl Transferase（AF190130）、10
‑
Deacetylbaccatin III
‑
10
‑
O
‑
Acetyl Transferase（AF193765） 、Taxane 2
‑
alpha
‑
O
‑
Benzoyltransferase（AY675557）、Baccatin
ꢀ‑
Aminophenylpropanoyl
‑
13
‑
O
‑
Transferase（KC988329）、3'
‑
N
‑
debenzoyltaxol N
‑
Benzoyltransferase（AY563629）。4.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：晋玉宽，晋志高，王亚飞，
申请(专利权)人：北京研佑科技有限公司，
类型：发明
国别省市：