基于血清中单个外泌体转录因子TAZ水平的标志物在制备治疗肺癌诊断中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基于血清中单个外泌体转录因子TAZ水平的标志物在制备治疗肺癌诊断中的应用，本发明专利技术首次发现单个外泌体转录因子TAZ水平在肺癌血清中显著降低，且还可以作为肺癌诊断的阴性标志物；检测方法为：将血清超速离心，得到外泌体，将外泌体用磷酸缓冲盐溶液重悬，并进行浓度检测，取等量外泌体裂解并检测等量外泌体中TAZ的含量，所得的值除以外泌体数量得到单个外泌体中TAZ的蛋白水平；本发明专利技术的外泌体标志物是基于单个外泌体中转录因子TAZ蛋白的水平，基于等量外泌体的分析能提高该标志物的可靠性；外泌体TAZ蛋白水平作为一种阴性标志物可以与其他阳性标志物或阴性标志物在血清中联合使用，从而提高疾病检测的准确度。的准确度。的准确度。

【技术实现步骤摘要】
基于血清中单个外泌体转录因子TAZ水平的标志物在制备治疗肺癌诊断中的应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，涉及一种从血液中检测外泌体蛋白水平作为肺癌诊断的标志物，具体涉及单个外泌体中转录因子TAZ的含量。

技术介绍

[0002]肺癌是目前中国乃至世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，肺癌在发病的时候一般比较隐匿，早期症状并不明显，容易被患者忽视；同时，肺癌的发展比较快，大约30％的患者在就诊时就已经发生了远处转移。在出现明显症状的患者中，75％都已经发生转移或是局部晚期，50
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60％的患者在治疗过程中出现远处转移。除此以外，肺癌的疗效也一直没有明显提高，五年生存率仅仅为18％，究其根本，还是因为不能早期诊断造成的。目前对于肺癌诊断手段有CT等影像学检查以及组织活检等方法，影像学类检查在肿瘤早期病灶小的时候漏检概率很大，而组织活检由于其侵入式的特征会对患者造成痛苦，一般在影像学初步诊断后操作，存在滞后性，对患者的治疗也是不利的。
[0003]液体活检技术的出现，解决了上述的问题，也提前了癌症的诊断时间。作本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于血清中单个外泌体转录因子TAZ水平的标志物在制备治疗肺癌诊断中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述单个外泌体转录因子TAZ水平在肺癌患者血清中降低。3.一种基于血清中单个外泌体转录因子TAZ水平的标志物在作为肺癌诊断阴性标志物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：单个外泌体转录因子TAZ单独作为阴性标志物和/或其他除外泌体转录因子TAZ以外的标志物在血清中联合使用。5.一种根据权利要求1所述的基于血清中单个外泌体转录因子TAZ水平的标志物的检测方法，其特征在于：其包括如下步骤：(1)、将受试者的血液收集并常温放置15
±
0.1min，凝血之后离心，吸取上清液并将其离心；(2)、将步骤(1)离心后的上清液超速离心，取沉淀物用磷酸缓冲盐溶液重悬，再次超速离心，得到外泌体；(3)、将所述外泌体用磷酸缓冲盐溶液重悬后，稀释，并进行外泌体浓度检测；(4)、取步骤(3)的等量外泌体并加入上样缓冲液裂解，使得蛋白变性，将蛋白分离开，用TAZ蛋白的抗体孵育使其显色，所得的值除以外泌体数量得到单个外泌体转录因子TAZ水平。6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述凝血之后的离心的转速为3000
±
10rpm，时间为10
±
0.1min；吸取上清液后离心的转速为(3000
±
10)
×
g，时间为15
±

【专利技术属性】
技术研发人员：夏伟梁，程燚睿，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：