以HIV-1gp120与CD20为双靶点的CAR-T细胞制备方法及其应用技术

本发明专利技术属生物医学技术领域，涉及感染性疾病与肿瘤并发症免疫技术，具体涉及一种以HIV

【技术实现步骤摘要】
以HIV
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1 gp120与CD20为双靶点的CAR
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T细胞制备方法及其应用


[0001]本专利技术属于生物工程领域，涉及一种以HIV
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1包膜蛋白gp120与CD20为双靶点的CAR
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T细胞的制备方法及在制备抗艾滋病相关淋巴瘤的活细胞药物中的应用。

技术介绍

[0002]据报道，艾滋病已经成为当今世界严重的公共卫生问题和社会问题。目前临床上采用的抗逆转录病毒疗法(Antiretroviral Therapy，ART)可以有效降低病人血浆病毒载量，却无法治愈艾滋病。同时艾滋病相关淋巴瘤仍然占HIV相关恶性肿瘤的50％以上，是艾滋病相关死亡的主要原因。因此迫切需要寻找一种新的疗法来同时治愈艾滋病和艾滋病相关淋巴瘤。
[0003]嵌合抗原受体T细胞疗法(chemical antigen receptor T cell therapy，CAR
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T therapy)最早在上世纪90年代就开展了治疗HIV
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1病人的临床实验。通过将可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种嵌合型抗原受体，其特征在于，该嵌合型抗原受体包括：靶向HIV
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1gp120的单链抗体ScFv、IgG4铰链区、CD8跨膜区、4
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1BB、白细胞抗原分化群3的ζ链。2.如权利要求1所述的嵌合型抗原受体，其特征在于，所述的嵌合型抗原受体还包括CD8前导肽、靶向CD20的单链抗体ScFv、CD8铰链区、CD8跨膜区、4
‑
1BB、白细胞抗原分化群3的ζ链。3.如权利要求1所述的嵌合型抗原受体，其特征在于，所述的嵌合型抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或者SEQ ID NO.3所示。4.权利要求1
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3中任意一种嵌合型抗原受体的编码序列。5.一种以HIV
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1gp120与CD20作为双靶的慢病毒载体，其特征在于，所述的载体包括3BNC117
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CD20 CAR的编码序列；所述的3BNC117
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CD20 CAR通过下述方法获得：pCDH
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CMV
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MCS
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EF1α
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Puro质粒为骨架，使用内切酶切开MCS区；以pTRPE
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3BNC117
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G4H
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BBz质粒为模板，扩增出3BNC117 CAR片段；将酶切产物与3BNC117 CAR片段连接；得到阳性质粒pCDH
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CMV
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3BNC117
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EF1α；以pCDH
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CMV
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3BNC117
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EF1α质粒为模板，利用内切酶去除Puro片段；以CD20
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【专利技术属性】
技术研发人员：朱焕章，姜正涛，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：