一种检测酪氨酸酶荧光探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种检测酪氨酸酶荧光探针及其制备方法和应用，属于化学分析检测技术领域。该检测酪氨酸酶荧光探针具有以下结构式：本发明专利技术制备的荧光探针具有荧光背景低、化学稳定性好、水溶性好、选择性高、斯托克斯位移大、抗干扰能力强、灵敏度高、检测效果好等优点；本发明专利技术制备的荧光探针本身处于荧光淬灭状态，与酪氨酸酶结合识别后，表现出强烈的荧光，荧光增强约178倍；本发明专利技术制备的荧光探针不仅能用于体外酪氨酸酶活性的检测，还能应用于酪氨酸酶抑制剂的筛选，对治疗与酪氨酸酶相关疾病具有重要意义；本发明专利技术制备的荧光探针可用于细胞和斑马鱼中内源性酪氨酸酶的检测和成像，成功用于细胞水平以及生物水平的酪氨酸酶的检测和成像。平以及生物水平的酪氨酸酶的检测和成像。平以及生物水平的酪氨酸酶的检测和成像。

【技术实现步骤摘要】
一种检测酪氨酸酶荧光探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及化学分析检测
，尤其是涉及一种检测酪氨酸酶荧光探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]酶是重要的生物大分子，是人新陈代谢的催化剂，实时准确地监测生物样品中的酶活性具有十分重要的意义。酪氨酸酶是一种普遍存在的含铜氧化酶，广泛存在于植物、动物和真菌中。酪氨酸酶可催化黑色素的形成，是黑色素生成的限速酶，被广泛认为是一种重要的生物标志物，其代谢异常与严重的疾病有关，例如，酪氨酸酶的过量表达会导致恶性黑色素瘤的产生，黑色素缺乏的人会患白化病或者白癜风，此外酪氨酸酶与精神性疾病有关，如帕金森病和精神分裂症等。因此开发一种灵敏度高、选择性好的工具来检测酪氨酸酶，对于酪氨酸酶相关疾病的诊断具有重要意义。
[0003]目前，检测酪氨酸酶的方法有比色法、电化学法和电泳法等，然而这些方法操作复杂或不适用于活体样品中酪氨酸酶的检测，因此这些方法是存在局限性的。荧光分析法具有操作简单、灵敏度高、选择性高和可用于生物活体成像等优点，是一种很好的检测酪氨酸酶的工具。研究表明，主要的荧本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测酪氨酸酶荧光探针，其特征在于，其具有以下结构式：2.一种如权利要求1所述检测酪氨酸酶荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将7
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羟基
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(三氟甲基)香豆素和间羟基苄溴在有机溶剂和碱的作用下回流反应，随后经分离纯化得到检测酪氨酸酶荧光探针HFC
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TYR；具体合成路线如下：3.根据权利要求2所述检测酪氨酸酶荧光探针的制备方法，其特征在于，所述7
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羟基
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(三氟甲基)香豆素、碱与间羟基苄溴的摩尔比为1：(2～4)：(1～3)。4.根据权利要求2所述检测酪氨酸酶荧光探针的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙腈、二甲基甲酰胺、无水二氯甲烷中的至少一种，所述碱为无水碳酸钾、碳酸铯、三乙胺、吡啶中的至少一种。5.根据权利要求2所述检测酪氨酸酶荧光探针的制备方法，其特征在于，所述回流反应的温度为40～70℃，所述回流反应的时间为12～24h。6.根据权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙琦，郭芸，李想，罗晓刚，
申请(专利权)人：武汉工程大学，
类型：发明
国别省市：