一种茎尖脱毒生产广藿香种苗的方法技术

本发明专利技术公开了一种茎尖脱毒生产广藿香种苗的方法，据广藿香种苗的繁育和生长特性，建立茎尖培养脱毒方法；开发适合广藿香组织培养过程中用于愈伤组织诱导、增殖和无菌苗生根的培养基。此外，还建立了广藿香种苗体内病菌的分子检测方法，获得无菌种苗；经过一代脱毒苗

【技术实现步骤摘要】
一种茎尖脱毒生产广藿香种苗的方法


[0001]本专利技术属于植物组培
，更具体地，涉及一种茎尖脱毒生产广藿香种苗的方法。

技术介绍

[0002]广藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.属于唇形科刺蕊草属，原产于菲律宾、马来西亚、越南等东南亚国家。广藿香全草入药，历来被视为暑湿时令之良药，是著名的“十大广药”之一，具有芳香化浊、发表解暑等功效，是多种中成药的主要原料。此外，以其提取的广藿香油还在医药和轻化工业得到广泛应用，可用于配制各种药膏、药丸、化妆护肤品、定香剂和杀虫剂等。广藿香可以作为药材和香料兼用，应用前景十分广阔。
[0003]广藿香在我国很少开花，即使开花也很难结实，因此广藿香的繁育只能采用扦插或者组织培养等无性繁殖的方式，其种质无法通过有性繁殖产生变异或者进化。长期的无性繁殖使病原体逐代累积传播，导致广藿香对病虫害的抵抗性变差，产量下降、品质降低。传统的组织培养繁殖广藿香种苗的方法虽然克服了扦插繁育中繁殖系数过低的不足，但没有脱毒过程，种性没有完全恢复，同时存在苗期偏弱，生产成本也过高，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种茎尖脱毒生产广藿香种苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1. 外植体选取与消毒；S2. 茎尖剥离与愈伤组织诱导；S3. 愈伤组织增殖；S4. 愈伤组织分化；S5. 无菌苗生根；S6. 病毒检测；S7.一代脱毒苗繁育；S8. 二代脱毒苗繁育；S9. 商业种苗繁育；步骤S1中所述外植体选取的是广藿香茎段的腋芽或顶芽；所述消毒的方法为：对所述外植体先采用70%乙醇漂洗，再放入次氯酸钠溶液浸泡。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2中所述茎尖剥离与愈伤组织诱导的方法为：将步骤S1中消毒后的外植体去除多余茎段，留取顶芽，在30 ~ 40倍解剖镜下，用无菌解剖针小心地剥除顶芽的外部的叶片，切取大小0. 1 ~0. 3毫米的茎尖生长点接种于用于愈伤组织诱导的培养基，进行诱导培养，得到广藿香愈伤组织。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述70%乙醇漂洗是采用70%乙醇漂洗10～30 sec，再用无菌水冲洗；所述次氯酸钠溶液浸泡是采用10%的次氯酸钠溶液浸泡10～15min，再用无菌水洗涤；所述诱导培养的条件如下：温度为25
±
2℃，湿度为70～80%，黑暗培养18～25天。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S2中所述愈伤组织诱导的培养基的配方为：在MS培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，浓度为10～20mg/L，柠檬酸，浓度为1～5mg/L，2
‑
吗啉乙磺酸，浓度为0.1～0.5g/L；再添加6
‑
BA以及 NAA，其中6
‑
BA的浓度为1.0～3mg/L，NAA的浓度为0.1～1.0mg/L。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3中所述愈伤组织增殖的方法为：将步骤2得到的广藿香愈伤组织接入愈伤组织增殖培养基中进行继代增殖培养，扩大广藿香愈伤组织；所述愈伤组织增殖培养的条件是温度为26
±
2℃，湿度为60～80%，光照时间为14小时/天，光照强度为800～12001x；培养时间为20～25天。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤S3中愈伤组织增殖培养基配方为：在MS培...

【专利技术属性】
技术研发人员：王继华，周芳，顾艳，梅瑜，蔡时可，徐世强，孙铭阳，李静宇，
申请(专利权)人：广东省农业科学院作物研究所，
类型：发明
国别省市：