一种生产2-KLG的葡萄糖酸杆菌一步菌底盘细胞库的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种生产2

【技术实现步骤摘要】
一种生产2
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KLG的葡萄糖酸杆菌一步菌底盘细胞库的构建方法


[0001]本专利技术涉及一种生产2
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KLG的葡萄糖酸杆菌一步菌底盘细胞库的构建方法，属于基因工程及生物工程


技术介绍

[0002]葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter)是一种好氧、杆状革兰氏阴性菌，因其卓越的糖醇不完全氧化能力，在维生素C、二羟基丙酮、米格列醇等诸多产品生产中发挥着重要作用。氧化葡萄糖酸杆菌非凡的底物转化能力主要依赖于其细胞膜上或胞内众多高活性的脱氢酶。在生产维生素C前体2
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KLG的催化过程中，葡萄糖酸杆菌一步菌可使底物山梨醇经膜绑定的吡咯喹啉醌(PQQ)依赖的山梨醇脱氢酶(SLDH)高效的转化为山梨糖，然后利用膜绑定的黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)依赖的山梨糖脱氢酶(SDH)将山梨糖转化为山梨酮，最后利用胞内的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP
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)依赖的山梨酮脱氢酶(SNDH)将山梨酮转化为2
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KLG。
[0003]葡萄糖酸杆菌一步菌是实现维生素C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有2
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KLG生产能力的葡萄糖酸杆菌底盘细胞，其特征在于，以葡萄糖酸杆菌为出发菌株，过表达了内源的山梨酮脱氢酶和山梨糖脱氢酶；所述山梨酮脱氢酶的和山梨糖脱氢酶为(a)或(b)：(a)来源于Gluconobacter oxydans WSH
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004、Gluconobacter cerinus CGMCC 1.110、Gluconobacter japonicus CGMCC 1.49、或Gluconobacter oxydans WSH
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003的山梨酮脱氢酶的和山梨糖脱氢酶；(b)与(a)的山梨酮脱氢酶基因具有≥80.72％序列一致性的葡萄糖酸杆菌来源的SNDH基因，及与(a)的山梨糖脱氢酶基因具有≥77.88％序列一致性的葡萄糖酸杆菌来源的SDH基因。2.根据权利要求1所述的葡萄糖酸杆菌底盘细胞，其特征在于，过表达了内源SNDHSDH基因簇。3.根据权利要求2所述的葡萄糖酸杆菌底盘细胞，其特征在于，所述SNDHSDH基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.10所示。4.根据权利要求1～3任一所述的葡萄糖酸杆菌底盘细胞，其特征在于，所述出发菌株包括但不限于G.oxydans WSH
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003、G.oxydans WSH
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004，G.cerinus CGMCC 1.110、G.japonicus CGMCC 1.49、G....

【专利技术属性】
技术研发人员：周景文，秦志杰，李江华，陈坚，曾伟主，余世琴，堵国成，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：