一种低鱼粉环境友好型对虾饲料制造技术

本发明专利技术公开了一种低鱼粉环境友好型对虾饲料，以鱼粉、豆粕、玉米渣、麦麸等为主要原料，黑曲霉、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、粪肠球菌和植物乳杆菌为发酵菌种，进行先好氧后厌氧混菌发酵，可大幅度提高以植物源蛋白原料为主要蛋白源的对虾饲料的营养价值；同时本发明专利技术制备的对虾发酵饲料对养殖水体有一定的改良作用，利于水体氨氮、亚盐、pH、总碱度等理化指标的保持，可显著提高养殖对虾存活率；本发明专利技术制备的饲料可以显著提高养殖对下抗氧化能力(氧化胁迫耐受能力)，显著改善对虾肠道健康状态，维持肠道微生物稳态，降低肠道中潜在致病微生物的相对丰度，提升肠道微生物的抗病(免疫)功能。提升肠道微生物的抗病(免疫)功能。提升肠道微生物的抗病(免疫)功能。

【技术实现步骤摘要】
一种低鱼粉环境友好型对虾饲料

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[0001]本专利技术涉及对虾饲料领域，具体涉及一种低鱼粉环境友好型对虾饲料。

技术介绍
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[0002]目前对虾养殖产量增加，多归功于传统养殖模式向高密度、集约化养殖模式的转变。然而，集约化养殖在高效、高产的同时，因放养密度大、管理难，发病率高，风险也越来越超出人为可控范围。高密度集约化养殖模式中疾病的预防和控制，已成为水产养殖行业瓶颈问题。目前为预防和控制对虾集约化养殖中疾病的爆发，多采用的方式是在养殖过程中拌喂市场上现有的保肝、抑菌产品，更甚在疾病爆发后过量使用呋喃唑酮、氯霉素等抗生素类产品。然而，市场上现有保肝、抑菌产品往往成本高、见效慢，且因养殖环境差异导致效用的适用性、稳定性也较差；使用抗生素类产品虽见效快，性价比高，但其大量、长期使用会使病原菌产生耐药性，抑或抗生素在环境中富集，甚至导致养成的水产品具有潜在食用风险。水产动物摄食的营养状态与其机体健康、免疫能力强弱密切相关。在饲料趋于“无抗化”的今天，从饲料营养和配方角度研发出绿色、环境友好型对虾饲料，有效预防和控制对虾养殖中疾病爆发，在解决行业瓶颈问题的同时，兼顾生态环境友好和食品绿色安全，已成为行业亟待解决的问题之一。
[0003]绿色、环境友好型饲料的研发主要包括饲料配方优化、加工工艺改进和饲养管理水平提高等方面。近年来，由于海洋环境持续恶化及对渔业资源的过度捕捞，全球鱼粉产量只能维持在500
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700万吨的较低水平且有逐年下降趋势。与此同时全球水产养殖业却一直持续迅猛发展，全球水产品养殖量的持续增长，在一定程度上加剧了水产饲用鱼粉的供应压力。保护竭尽的野生渔业资源，寻找可以替代鱼粉的新型蛋白源及加工技术研究，是环境友好型饲料研发一直持续努力的方向。
[0004]植物源蛋白原料，种类丰富、市场供应稳定、价格低廉，且同类原料营养组成差异小，是保证水产养殖饲料产业可持续发展的理想选择。水产养殖业的持续迅猛发展，鱼粉的有限市场供应以及由此引起的价格生长，必将导致在接下来的几十年里水产饲料中鱼粉使用量的下降，也将最终导致水产养殖行业对植物源蛋白原料的使用量远远大于鱼粉。通常鱼粉在对虾饲料中的占比为30
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50％。鱼粉在水产饲料中占比降低，随之植物源蛋白原料占比增加将可能成为一种必然且长期的存在。然而，植物性蛋白原料因缺乏一种或几种限制性氨基酸、含有多种抗营养因子等，其在水产饲料(尤其低鱼粉占比水产饲料)中的较高比例往往会对养殖动物的健康造成影响，引起生产性能的下降，进而也限制了其在饲料中的添加比例。更加充分地利用植物源蛋白原料的蛋白营养价值，经济、有效地缓解水产养殖产业飞速发展而鱼粉相对短缺的现实压力，在几乎保留原料中全部蛋白质营养价值的同时，去除其含有的、潜在的会对水产动物生长造成负面影响的组分，提高植物性蛋白原料(降低鱼粉)在虾饲料中的占比意义重大。
[0005]利用微生物发酵技术可以显著提升植物源蛋白原料为主饲料的营养价值。同时发酵饲料中益生菌和益生素的作用，可提高养殖动物机体的抗氧化能力，降低肠道潜在致病
菌的相对丰度，维持养殖动物肠道健康，提高对虾存活率。除此，饲喂发酵饲料可以改善养殖水环境，降低水体中氨氮及亚硝盐含量。本课题组前期工作参见CN 108157673 A，公开了一种发酵对虾配合饲料的制备方法，采用固体和液体混合发酵的工艺，优选出产酶丰富且能共同生长的黑曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌，进行联合发酵，并通过好氧和厌氧两步发酵，充分发挥黑曲霉及枯草芽孢杆菌产酶丰富的优点，使基础发酵原料得到全面的分解，大分子蛋白质分解为肽和氨基酸，纤维素降解为可发酵的糖类、淀粉分解为可发酵的葡萄糖、木聚糖分解为木糖、葡聚糖等，从而使厌氧阶段的罗伊氏乳杆菌的生长繁殖获得大量营养物质的支持，但还需进一步改进。

技术实现思路
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[0006]本专利技术目的是提供一种低鱼粉环境友好型对虾饲料，以鱼粉、豆粕、玉米渣、麦麸等为主要原料，以黑曲霉、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、粪肠球菌和植物乳杆菌为发酵菌种，经先好氧后厌氧的“两步”发酵工艺，可大幅度提高以植物源蛋白原料为主要蛋白源的对虾饲料的营养价值；同时本专利技术制备的对虾发酵饲料对养殖水体有一定的改良作用，利于水体氨氮、亚盐、pH、总碱度等理化指标的保持，可显著提高养殖对虾存活率；本专利技术制备的饲料可以显著提高养殖对虾抗氧化能力(氧化胁迫耐受能力)，显著改善对虾肠道健康状态，维持肠道微生物稳态，降低肠道中潜在致病微生物的相对丰度，提升肠道微生物的抗病(免疫)功能。
[0007]本专利技术是通过以下技术方案予以实现的：
[0008]一种低鱼粉环境友好型对虾饲料，按总质量百分比为100％计，所述原料包括鱼粉15％、豆粕35
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45％、玉米渣25
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35％、对虾复合预混合饲料0.5
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1％，余为麸皮，所述饲料制备方法如下：将原料破碎至粒径1
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3mm后、加水至水分质量含量为40
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45％，混合均匀，121℃高温熟化30min后冷却至室温，接种黑曲霉二级菌液、枯草芽孢二级菌液及酿酒酵母二级菌液，28
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32℃好氧发酵至物料表面铺满菌丝(～4d)后，接种粪肠球菌二级菌液和植物乳杆菌二级菌液，28
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32℃进行厌氧发酵，制备得到呈褐色、酱香味对虾发酵饲料；黑曲霉二级菌液、枯草芽孢杆菌二级菌液、酿酒酵母菌二级菌液、粪肠球菌二级菌液和植物乳杆菌二级菌液分别由黑曲霉一级菌种液、枯草芽孢杆菌一级菌种液、酿酒酵母菌一级菌种液、粪肠球菌一级菌种液和植物乳杆菌一级菌种液扩大培养得到。黑曲霉、枯草芽孢、酿酒酵母、粪肠球菌和植物乳杆菌二级菌液接种至物料时，菌液中的活菌数均为(1～9)*108cfu/kg。
[0009]优选地，黑曲霉二级菌液、枯草芽孢杆二级菌液、酿酒酵母二级菌液、粪肠球菌二级菌液及植物乳杆菌二级菌液的接种量为分别为0.4％、0.06％、0.02％、2％和2％。
[0010]一级发酵菌种液的制备方法分别为：
[0011](1)黑曲霉发酵菌种液的制备：黑曲霉菌粉用无菌水稀释后，接种至灭菌后PDA液体培养基中28℃培养24h，得到黑曲霉一级菌种液；其中，PAD液体培养基的制备方法为：去皮马铃薯200g、切碎煮汁后过滤去渣，蔗糖20g、蛋白胨10g、琼脂18g，再加水定容至1L，调节pH至7.0。
[0012](2)枯草芽孢杆菌发酵菌种液的制备：挑取枯草芽孢杆菌斜面菌种，37℃活化16h后，接种至灭菌的LB培养基中，180r/min，37℃培养24h，得到枯草芽孢杆菌一级菌种液；其中，LB培养基制备方法为：胰蛋白胨10g、酵母粉5g和氯化钠10g，蒸馏水完全溶解后，调节pH
至7.0，并定容至1L。
[0013](3)酿酒酵母发酵菌种液的制备：挑取酿酒酵母斜面菌种接种到灭菌的PDA液体培养基中，28℃摇床活化24h，然后将活化好的菌液按质量比2％接种量接种到灭菌的一级种子培养基中，28℃培养2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低鱼粉环境友好型对虾饲料，其特征在于，按总质量百分比为100％计，所述原料包括鱼粉15％、豆粕35
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45％、玉米渣25
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35％、对虾复合预混合饲料0.5
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1％，余为麸皮，所述饲料制备方法如下：将原料破碎至粒径1
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3mm后、加水至水分质量含量为40
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45％，混合均匀，121℃高温熟化30min冷却至室温，接种黑曲霉二级菌液、枯草芽孢杆菌二级菌液及酿酒酵母菌二级菌液，28
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32℃好氧发酵至物料铺满白色菌丝后接种粪肠球菌二级菌液和植物乳杆菌二级菌液，进行28
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32℃厌氧发酵制备得到呈褐色、酱香味对虾发酵饲料；黑曲霉二级菌液、枯草芽孢杆菌二级菌液、酿酒酵母菌二级菌液、粪肠球菌二级菌液和植物乳杆菌二级菌液分别由黑曲霉一级菌种液、枯草芽孢杆菌一级菌种液、酿酒酵母菌一级菌种液、粪肠球菌一级菌种液和植物乳杆菌一级菌种液扩大培养得到；黑曲霉、枯草芽孢、酿酒酵母、粪肠球菌和植物乳杆菌二级菌液接种至物料时，菌液中的活菌数为(1～9)*108cfu/kg。2.根据权利要求1所述的对虾饲料，其特征在于，黑曲霉二级菌液、枯草芽孢杆二级菌液、酿酒酵母二级菌液、粪肠球菌二级菌液及植物乳杆菌二级菌液的接种量为分别为0.4％、0.06％、0.02％、2％和2％。3.根据权利要求1所述的对虾饲料，其特征在于，黑曲霉一级菌种液的制备方法为：黑曲霉菌粉用无菌水稀释后，接种至灭菌后PDA液体培养基中28℃培养24h，得到黑曲霉一级菌种液；其中，PAD液体培养基的制备方法为：去皮马铃薯200g、切碎煮汁后过滤去渣，蔗糖20g、蛋白胨10g、琼脂18g，再加水定容至1L，调节pH至7.0。4.根据权利要求1所述的对虾饲料，其特征在于，枯草芽孢一级菌种液的制备方法为：挑取枯草芽孢杆菌斜面菌种，37℃活化16h后，接种至灭菌的LB培养基中，1...

【专利技术属性】
技术研发人员：成艳波，许国焕，张丽，李志朋，苏奎英，
申请(专利权)人：广东碧德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：