一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂及其制备方法和应用。本发明专利技术包括以下组分：精油基础液500

【技术实现步骤摘要】
一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于红螯螯虾养殖的
，特别是指一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]红螯螯虾(Cherax quadricariratus)，又名澳洲淡水龙虾，是指澳大利亚及周边地区的淡水螯虾，隶属于甲壳纲(Crustaoea)，十足目(Decapoda)，拟螯虾科(Parastacidae)，滑螯虾属(Cherax)，具有生长快、抗逆强、肉质细嫩、出肉率高等特点，是世界名贵经济虾类之一。
[0003]胚胎离体孵化是一种通过剥离卵进行人工孵化的方法，这种孵化方法不仅可以减少对抱卵虾蟹的饲养管理成本，还能减少抱卵过程中的卵掉落或者碰撞损坏几率，有助于提高孵化率，而且，孵化同步性较高，有利于实现繁育的智能化与自动化，可以发展“订单育苗”和“反季育苗”，完成批量化生产优质苗种。
[0004]然而，消毒剂处理被普遍认为是淡水螯虾类胚胎离体孵化成功与否的关键因素之一。现有技术中淡水螯虾类在胚胎离体孵化过程中常用的消毒剂是甲醛，消毒方法是采用3000ppm的甲醛浸泡15min。甲醛对环境和人体具有危害，很多地方已经限制了甲醛的使用。因此，这种甲醛消毒剂在淡水螯虾类胚胎离体孵化中的应用受到了很大的限制。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂及其制备方法和应用，旨在解决现有技术中淡水螯虾类胚胎离体孵化应甲醛消毒剂对环境和人体具有危害从而使其应用受到限制的问题。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术主要是通过以下技术方案加以实现的：
[0007]在一个方面，本专利技术的一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂，所述消毒剂包括以下浓度的组分：精油基础液500
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1000ppm，超氧化物歧化酶6000
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1000u/mg，海藻糖15
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30mmol/L，牛血清蛋白100
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200mmol/L，虾青素15
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30mmol/L，余量为水；所述精油基础液是由以下体积百分含量的组分组成：麝香草精油28
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32％，鼠尾草精油28
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32％，蓝桉树精油18
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22％，薄荷精油18
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22％。
[0008]本专利技术以麝香草精油、鼠尾草精油、蓝桉树精油和薄荷精油组成精油基础液，这种精油基础液溶解能力强，而且具有很好的消毒效果。在精油基础液中加入超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)至关重要，由于红螯螯虾胚胎在消毒时应激反应会产生大量氧自由基，这些氧自由基会影响胚胎的孵化及孵出幼虾的体质，加入抗氧化剂可以降低氧自由基对胚胎的伤害，而抗氧化剂中最为有效的是SOD；因此，加入SOD可减少消毒对胚胎的氧化损伤并修复受损细胞；所以，SOD的加入能够在不影响精油基础液消毒效果的前提下保护红螯螯虾胚胎。由于SOD具有一个致命的弱点，那就是稳定性较差，容易失去活性；本专利技术中加入海藻糖的主要作用是保护SOD，干燥后的海藻糖呈现玻璃态，以一种非常紧密的网架
结构将SOD支撑包裹起来，有效防止了SOD分子发生三维结构的变化，从而避免了SOD的失活；其次，海藻糖还具有保持胚胎细胞活性、抗应激、维持膜完整性等作用。海藻糖的保护作用是有限的，特别是在不良环境中，牛血清蛋白作为一类白蛋白缺乏卵黄富含的不饱和脂肪酸，具有良好的调节胶体渗透压的作用，还具有携带激素、生长因子、脂肪性维生素、药物、微量元素等物质的功能；而且牛血清蛋白是酶稳定剂，牛血清蛋白的加入，可以对海藻糖形成互补，两者相互协作，从而减轻不利环境因素引起的变性。其次，SOD加入到消毒剂中时部分SOD可能失活，虾青素具有恢复抗氧化酶的作用，虾青素与SOD匹配可以更大幅度地增加胚胎抵抗自由基能力，还能够加速对自由基清除的能力；因此，虾青素的加入可以恢复SOD的活性。本专利技术中精油基础液、SOD、海藻糖、牛血清蛋白和虾青素相互补充，相互协同，相互促进，所得的消毒剂无毒无害，绿色环保，消毒效果好，对胚胎具有很好的保护作用，稳定性好，使用方便，可以替代现有的甲醛消毒剂，孵化率高，出苗率好。
[0009]作为一种优选的实施方案，所述精油基础液是由以下体积百分含量的组分组成：麝香草精油30％，鼠尾草精油30％，蓝桉树精油20％，薄荷精油20％。本专利技术的精油基础液中麝香草精油、鼠尾草精油、蓝桉树精油和薄荷精油均为植物精油，这些植物精油绿色天然，无副作用，对胚胎无伤害，对环境和人体也没有任何伤害；而且，溶解性好，消毒杀菌效果好；这些植物精油相互溶解，作用相互协同，使用效果好。
[0010]作为一种优选的实施方案，所述精油基础液的制备方法是：1)取麝香草叶，风干，蒸馏，得麝香草精油；取鼠尾草叶，风干，蒸馏，得鼠尾草精油；取蓝桉树茎，风干，蒸馏，得蓝桉树精油；取薄荷叶，风干，蒸馏，得薄荷精油；2)取麝香草精油、鼠尾草精油、蓝桉树精油和薄荷精油，混合，得精油基础液。
[0011]本专利技术的麝香草精油是从麝香草叶中提取而来，鼠尾草精油是从鼠尾草叶中提取而来，蓝桉树精油是从蓝桉树茎中提取而来，薄荷精油是从薄荷叶中提取而成，这些精油的原料来源广，容易取得，提取方便。
[0012]麝香草(Thymus vulgaris)叶、鼠尾草(Salvia officinalis)叶、蓝桉树(Eucalyptus globulus)茎以及薄荷(Mentha piperita)叶均为天然植物，所得的麝香草精油、鼠尾草精油、蓝桉树精油和薄荷精油直接混合成精油基础液，也可以添加乳化剂，经过乳化剂的乳化作用之后，得到精油基础液。所得的精油基础液采用GC/MS进行分析，GC/MS分析为Elmer
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Clarus 500毛细管气相色谱仪直接连接到质谱仪系统，应用SGE非极性熔融石英毛细管柱，在以下条件下：烘箱温度程序从60℃(10min)到250℃，温度为4℃/min，最终温度保持10min；喷油器温度220℃；氦气作为载气，流速为1.5mL/min；注入体积为1ul己烷稀释基础液；无分流注射技术；电子电离(EI)模式下的电离能为70eV；离子源温度200℃；扫描质量范围为35
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425m/z，接口线温度为250℃。根据一系列烷烃(C4
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C28)作为对照品的保留时间及其质谱与对照品的相似性，对该精油基础液的成分进行了鉴定、计算和分析。
[0013]作为一种优选的实施方案，所述海藻糖、所述牛血清蛋白和所述虾青素的摩尔比为3:20:3。本专利技术中海藻糖和虾青素是为了与SOD匹配的，牛血清蛋白是为了与海藻糖匹配，三者环环相扣，紧密联系，控制海藻糖、牛血清蛋白和虾青素的比例，从而提高消毒剂的综合效果。
[0014]在另一个方面，本专利技术的一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂的制备方法，包括以下步骤：1)取SOD、海藻糖、牛血清蛋白和虾青素，依次加入水中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂，其特征在于，所述消毒剂包括以下浓度的组分：精油基础液500
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1000ppm，超氧化物歧化酶6000
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1000u/mg，海藻糖15
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30mmol/L，牛血清蛋白100
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200mmol/L，虾青素15
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30mmol/L，余量为水；所述精油基础液是由以下体积百分含量的组分组成：麝香草精油28
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32％，鼠尾草精油28
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32％，蓝桉树精油18
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22％，薄荷精油18
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22％。2.根据权利要求1所述的红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂，其特征在于：所述精油基础液是由以下体积百分含量的组分组成：麝香草精油30％，鼠尾草精油30％，蓝桉树精油20％，薄荷精油20％。3.根据权利要求1或2所述的红螯螯虾胚胎离体孵化用消毒剂，其特征在于，所述精油基础液的制备方法是：1)取麝香草叶，风干，蒸馏，得麝香草精油；取鼠尾草叶，风干，蒸馏，得鼠尾草精油；取蓝桉树茎，风干，蒸馏，得蓝桉树精油；取薄荷叶，风干，蒸馏，得薄荷精油；2)取麝香草精油、鼠尾草精油、蓝桉树精油和薄荷精油，混合，得精油基础液...

【专利技术属性】
技术研发人员：程顺，顾志敏，迟美丽，郑建波，贾永义，刘士立，李飞，刘一诺，韦永春，
申请(专利权)人：浙江省淡水水产研究所，
类型：发明
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