【技术实现步骤摘要】
用于检测肿瘤细胞内microRNA
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203的双光子荧光纳米探针及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及纳米材料与生物传感器
，尤其涉及一种用于检测肿瘤细胞内microRNA
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203的双光子荧光纳米探针及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]MicroRNA作为一种短链、非编码、内源性RNA，不仅广泛的参与早期发育、细胞增殖、分化、凋亡等多种生物过程的调控，同时其表达水平与各种疾病密切相关，因此microRNA可以做研究许多疾病的重要标志物。特别的是，microRNA的异常表达(上调或下调)与癌症的发生发展密切相关，被认为是不同癌症预后、诊断和治疗过程中有前景的生物标志物。由于细胞内microRNA的含量普遍较低，因此人们致力于发展能够特异性、高灵敏的检测microRNA的方法。现有技术中，反转录
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聚合酶链反应(RT
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PCR)是一种传统的检测低浓度RNA信号放大策略，但是其只能够在缓冲液中操作，无法反映在细胞中表达的差异；基于等温酶...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于检测肿瘤细胞内microRNA
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203的双光子荧光纳米探针，其特征在于，包括双光子硅纳米颗粒、羧基荧光素和发夹结构DNA，所述双光子硅纳米颗粒上修饰了发夹DNA1，发夹DNA2上修饰了所述羧基荧光素，所述双光子硅纳米颗粒作为能量供体，所述羧基荧光素作为荧光受体。2.根据权利要求1所述的用于检测肿瘤细胞内microRNA
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203的双光子荧光纳米探针，其特征在于，所述发夹DNA1的序列为：5'
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TTT AGG ACC ACT AGG GTG TGT GTG GGC TAG TGG TCC TAAACATTTCAC
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NH2‑
3'，所述发夹DNA2的序列为：5'
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GGT GTG TGT GGG(T
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FAM)TTA GGACCACTAGCC CAC ACA CAC CCT AGT GGT
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3'。3.一种如权利要求1或2所述的用于检测肿瘤细胞内microRNA
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203的双光子荧光纳米探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、合成双光子硅纳米颗粒TP
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SiNPs；S2、发夹DNA1修饰双光子硅纳米颗粒制备TP
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SiNPs@H1；S3、在发夹DNA2上修饰羧基荧光素FAM，得到H2‑
FAM。4.根据权利要求3所述的用于检测肿瘤细胞内microRNA
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203的双光子荧光纳米探针的制备方法，其特征在于，所述步骤S1具体包括：S11、将2
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萘甲酸添加到的含有DIPEA和HATU的DMF中，在冰浴中反应0.5
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1.5小时，加入APTES并在室温下搅拌1
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2小时；S12、将步骤S11得到的混合物倒入冰水中，产生沉淀，沉淀经真空过滤机分离，硅胶柱层析纯化，得到固体粗产物；S13、将TEOS溶解在乙醇中，逐滴加入步骤S12得到的固体粗产物中，再滴加三乙醇胺，搅拌反应1
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2小时，离心收集反应物并用乙醇洗涤数次；S14、...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴永祥，何康迪，喻盛容，钟红梅，刘荧，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：
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