一种载体骨架、基于该载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统及应用技术方案

本发明专利技术涉及微生物技术领域，特别涉及一种载体骨架、基于该载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统及应用。其中，载体骨架基因序列如SEQ ID NO.1所示，包括东方肉座菌

【技术实现步骤摘要】
一种载体骨架、基于该载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统及应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，特别涉及一种载体骨架、基于该载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统及应用。

技术介绍

[0002]木质纤维素是自然界中广泛存在的大分子多糖聚合物，属于地球上最丰富的可再生生物资源。利用纤维素酶可以将纤维素降解成可发酵利用的糖类如单糖，用以生产生物燃料(如生物乙醇)、生物基精细化工产品和药品。用来替代或者部分替代化石能源，以减少环境污染。但是纤维素酶的成本是纤维素生物化学转化工业化应用的主要瓶颈之一。
[0003]纤维素酶蛋白改造主要在大肠杆菌或者酵母中进行，但两者的表达系统跟丝状真菌存在差异，比如会造成酶的过糖基化或折叠的差异，从而造成在这两个系统中改进的酶跟在丝状真菌中表现存在差异。产纤维素酶的丝状真菌是其最佳的表达体系，但是这类丝状真菌即使在非诱导条件下也存在纤维素酶和半纤维素酶的表达，会污染表达的目的蛋白，造成纯化的困难，从而影响对工程酶的性质研究。
[0004]目前主要通过构建工程菌的方式，通过本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种载体骨架，其特征在于，其基因序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的载体骨架，其特征在于：通过在载体pUC
‑
eASP的UAsp和DAsp之间插入含有抗性筛选标记基因的表达盒得到，所述载体pUC
‑
eASP包括天冬氨酸蛋白水解酶的5
’
侧翼序列和3
’
侧翼序列。3.根据权利要求2所述的载体骨架，其特征在于：所述载体pUC
‑
eASP的序列如SEQ ID NO.2所示。4.根据权利要求3所述的载体骨架，其特征在于：所述抗性筛选标记基因为G418。5.一种基于载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统，其特征在于，包括如权利要求1～4任一项所述的载体骨架、东方肉座菌Δxyr1
‑
3、启动子和终止子；所述东方肉座菌Δxyr1
‑
3是以东方肉座菌EU7
‑
22为出发菌株，敲除xyr1基因得到的；所述东方肉座菌EU7
‑
22(Trichoderma orientalis EU7
‑
22)，其保藏编号为CCTCC NO：M20211189。6.根据权利要求5所述的基于载体骨架和东方肉...

【专利技术属性】
技术研发人员：甘礼惠，薛勇，宋阳，刘健，龙敏南，曾宪海，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：