外泌体的分离和检测方法、以及分离和检测试剂盒技术

外泌体的分离和检测方法包括下述工序：复合体形成工序，使生物体试样、与包含针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质的捕获用分子接触，形成外泌体与上述捕获用分子的复合体；以及检测工序，使上述复合体、与包含针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质和标记物质的检测用分子接触，将上述复合体用上述检测用分子进行检测。上述捕获用分子和上述检测用分子中的至少任一方的分子中，上述在癌细胞表面表达的抗原是细胞表面波形蛋白。细胞表面表达的抗原是细胞表面波形蛋白。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】外泌体的分离和检测方法、以及分离和检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及外泌体的分离和检测方法、以及分离和检测试剂盒。

技术介绍

[0002]已知细胞将被称为外泌体的、在其内部包含蛋白质、核酸、脂质、糖等各种细胞内容物的、由脂双层膜形成的小泡释放到细胞外。外泌体作为成为用于知晓生物体病况的重要线索的物质而被关注，在以癌为代表的各种疾病中的研究盛行。
[0003]另一方面，波形蛋白为对于细胞质形成而言重要的蛋白质之一，作为细胞内的上皮间质转化(EMT)的标志物是已知的。明确了在癌细胞中波形蛋白过表达，其表达量与癌的进展具有相关。在特定的环境下波形蛋白移动到细胞表面。该移动到细胞表面的波形蛋白被称为细胞表面波形蛋白(CSV)。
[0004]明确了CSV参与自身免疫障碍、病毒感染、癌，由于在活化巨噬细胞、血小板、发生了凋亡的T淋巴细胞中CSV表达，因此CSV与炎症性疾病有关。最近，报导了将抗CSV抗体、与针对作为癌肿瘤的诊断标志物已知的上皮细胞黏附分子(EpCAM、CD326)的抗体组合，来检测外周血循环肿瘤细胞(CTC)的方法(例如本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种外泌体的分离和检测方法，包括复合体形成工序和检测工序，所述复合体形成工序是使生物体试样与捕获用分子接触，形成外泌体与所述捕获用分子的复合体的工序，所述捕获用分子包含针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质，所述检测工序是使所述复合体与检测用分子接触，将所述复合体用所述检测用分子进行检测的工序，所述检测用分子包含针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质和标记物质，所述捕获用分子和所述检测用分子中的至少任一方的分子中，所述在癌细胞表面表达的抗原是细胞表面波形蛋白。2.根据权利要求1所述的方法，针对所述细胞表面波形蛋白的特异性结合物质是抗CSV抗体。3.根据权利要求1或2所述的方法，所述捕获用分子中的针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质是抗CSV抗体，所述检测用分子中的针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质是抗CSV抗体、抗EpCAM抗体或抗PD
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L1抗体。4.根据权利要求1或2所述的方法，所述检测用分子中的针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质是抗CSV抗体，所述捕获用分子中的针对在癌细胞表面表达的抗原的特异性结合物质是抗CSV抗体、抗EpCAM抗体或抗PD
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L1抗体。5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，所述捕获用分子被固定于磁性粒子。6.根据权利要求1～5中任一项所述的方法，在所述复合体形成工序之后、并且所述检测工序之前，进一步包括洗涤工序，该洗涤工序是添加洗涤液，将除所述复合体以外的杂质除去的工序。7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，在所述检测工序中，使所述复合体与所述检测用分子接...

【专利技术属性】
技术研发人员：和久井世纪，河上裕，谷口智宪，
申请(专利权)人：学校法人庆应义塾，
类型：发明
国别省市：