细胞的分化状态的评价方法技术

本发明专利技术是有关于一种对自诱导性多能干细胞(iPS细胞)向视网膜色素上皮细胞的分化诱导步骤中的、细胞的分化状态进行评价的方法。进而，本发明专利技术是有关于一种对自胚胎干细胞(ES细胞)向视网膜色素上皮细胞的分化诱导步骤中的、细胞的分化状态进行评价的方法。细胞的分化状态进行评价的方法。细胞的分化状态进行评价的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞的分化状态的评价方法


[0001]本专利技术是有关于一种对自人诱导性多能干细胞(Induced Pluripotent Stem cells，iPS细胞)向视网膜色素上皮细胞的分化诱导步骤中的、细胞的分化状态进行评价的方法。进而，本专利技术是有关于一种对自人胚胎干细胞(Embryonic Stem cells，ES细胞)向视网膜色素上皮细胞的分化诱导步骤中的、细胞的分化状态进行评价的方法。
现有技术
[0002]高龄黄斑变性症为位于视网膜中心的黄斑部的功能降低的疾病，是发达国家中导致老年人失明的主要疾病之一。高龄黄斑变性有渗出型及萎缩型。视网膜色素上皮(Retinal Pigment Epithelium，RPE)细胞形成存在于有黄斑的视网膜的外侧的片状单层细胞层，对于维持视网膜的视细胞而言重要。于RPE细胞层的更外侧，存在富含血管的脉络膜。为了获得正常的视力，需要位于视网膜的外侧的RPE细胞及脉络膜正常地发挥功能。渗出型高龄黄斑变性为如下疾病：因高龄所致的RPE细胞的功能降低或损伤等，来自脉络膜的异常的新生血管贯穿视网膜色素上皮并形成于视本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种方法，其是在自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的分化诱导步骤中，对所述多能干细胞的分化状态进行评价的方法，包括：步骤1：对多能干细胞的培养上清液中的指标物质存在量进行测定的步骤；以及步骤2：基于所述指标物质存在量的变化，对自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞的分化状态进行评价的步骤，所述指标物质为鸟氨酸及/或瓜氨酸。2.根据权利要求1所述的方法，其中于所述步骤2中，通过对培养上清液中的所述指标物质存在量的经时变化进行分析，来评价多能干细胞的分化状态。3.根据权利要求2所述的方法，其中将所述多能干细胞的培养基自细胞增殖用培养基置换为细胞分化用培养基的日期设为第0天时，对所述经时变化进行分析的期间为第0天至第20天为止的期间。4.根据权利要求2所述的方法，其中将所述多能干细胞的培养基自细胞增殖用培养基置换为细胞分化用培养基的日期设为第0天时，对所述经时变化进行分析的期间为第3天至第12天为止的期间。5.根据权利要求2至4中任一项所述的方法，其中所述经时变化判定为大的情况下，评价为进行自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞分化的可能性高。6.根据权利要求1所述的方法，其中于所述步骤1中，对作为所述指标物质的鸟氨酸及瓜氨酸存在量进行测定，且于鸟氨酸及瓜氨酸存在量的经时变化实质上相同的情况下，评价为进行自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞分化。7.根据权利要求2至4中任一项所述的方法，其中于所述步骤2中，基于与所述指标物质存在量相关的变动系数的阈值，对自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞的分化状态进行评价。8.根据权利要求7所述的方法，其中于所述变动系数的阈值与鸟氨酸存在量相关而为0.20以上及/或与瓜氨酸存在量相关而为0.30以上的情况下，评价为进行自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞分化。9.根据权利要求1所述的方法，其进而包括：步骤3：对已知细胞分化状态的对照细胞的培养上清液中的指标物质存在量进行测定的步骤，并且通过对所述步骤1中进行测定的所述多能干细胞的培养上清液中的所述指标物质存在量、与所述步骤3中进行测定或已测定的所述对照细胞的培养上清液中的所述指标物质存在量进行比较，来对自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞的分化状态进行评价。10.根据权利要求9所述的方法，其中基于所述多能干细胞的培养上清液中的所述指标物质存在量、与所述对照细胞的培养上清液中的所述指标物质存在量的比或差是否为预先规定的阈值以上、或者是否小于阈值，对自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞的分化状态进行评价。11.根据权利要求9所述的方法，其中通过对所述多能干细胞的培养上清液中的指标物质存在量的经时变化、与所述对照细胞的培养上清液中的指标物质存在量的经时变化进行比较，来对自多能干细胞向视网膜色素上皮细胞的细胞的分化状态进行评价。12.根据权利要求9至11中任一项所述的方法，其中所述对照细胞为于自多能干细...

【专利技术属性】
技术研发人员：原圭祐，五味慎一，永田智久，加川健一，大岛康弘，铃木崇，高桥雅俊，山本贵子，川真田伸，
申请(专利权)人：株式会社岛津制作所公益财团法人神户医疗产业都市推进机构，
类型：发明
国别省市：