一种适合杨树RNA的提取方法技术

技术编号:33312815 阅读:25 留言:0更新日期:2022-05-06 12:25
一种适合杨树RNA的提取方法,涉及一种适合杨树RNA的提取方法。为了解决现有的杨树的RNA的提取方法无法获得高质量杨树RNA的问题。本发明专利技术适合杨树RNA的提取方法按照以下步骤进行:石英砂加入液氮预冷并加入新鲜杨树嫩叶,迅速用液氮充分研磨粉碎,加入裂解缓冲液,加入抽提缓冲液A或抽提缓冲液B,剧烈震荡、冰浴、离心,取上清液,加入沉淀液,丢弃上清液,乙醇洗沉淀,离心,挥发乙醇,DEPC水溶解沉淀,即完成。本发明专利技术能够显著提高细胞破碎率,提高RNA的产率,保证了提取的RNA质量。保证了提取的RNA质量。保证了提取的RNA质量。

【技术实现步骤摘要】
一种适合杨树RNA的提取方法


[0001]本专利技术涉及一种适合杨树RNA的提取方法。

技术介绍

[0002]杨树为高大乔木,是我国主要的造林树种,全球共有100余种,我国约50种(不包括人工杂种和引入种)。在我国分布广泛具有抗逆性强,丰产性强,木材成熟期早生长迅速等优点。近年来大们对杨树的研光越来越深入,随着杨树基因组全学列的公布,人们开始着眼于从分子水平上进上研究杨树功能基因,杨树也就成了树木研究的模式植物,对于cDNA文库构建,RACE、DDRT

PCR、基因芯片研究来说,从杨树中分离出高质量的RNA 就显得尤为重要。
[0003]杨树细胞壁内含大量的木质素,纤维素,导致材料坚硬不易破碎;细胞内多酚,单宁,蛋白含量高,多糖等次生代谢物质丰富。这些特征对RNA提取造成不利影响,如细胞破碎不彻底会影响RNA的产率,多酚的氧化产物能与RNA形成不可逆结合,并与RNA形成共沉淀,多糖与RNA理化性质相似容易与RNA共沉淀,蛋白和次生代谢物质不彻底去除将影响RNA提取的质量,这些都干扰后续实验正常进行,这就为杨树RNA提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适合杨树RNA的提取方法,其特征在于:适合杨树RNA的提取方法按照以下步骤进行:一、称取0.1g石英砂放入的研钵中,加入液氮预冷;二、取0.1g新鲜杨树嫩叶,迅速放入研钵中用液氮充分研磨粉碎,加入700μL裂解缓冲液,加入500μL抽提缓冲液A或抽提缓冲液B,在振荡器中剧烈震荡5

10s,至充分混匀,冰浴15min,在12000rpm下离心10min,取上清液,加入上清液1/4体积的沉淀液,进行沉淀20min,在10000rpm下离心10min,丢弃上清液;三、用1ml 70%乙醇洗沉淀,在13000rpm下离心5min,丢弃上清液;四、静置挥发乙醇24min,用DEPC水溶解沉淀,即完成,所得产物即可进行电泳检测。2.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员:李瑶王雷吴琼孙鑫孙尧
申请(专利权)人:黑龙江省科学院高技术研究院
类型:发明
国别省市:

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