一株高产FK228的工程菌株及其构建与应用制造技术

本发明专利技术公开了一株高产FK228的工程菌株E264Δtdp::R

【技术实现步骤摘要】
一株高产FK228的工程菌株及其构建与应用


[0001]本专利技术涉及一种产组蛋白去乙酰化酶抑制剂的工程菌及其构建与应用，尤其涉及一株高产组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228的工程菌株及其构建与发酵生产FK228的应用，属于生物


技术介绍

[0002]利用遗传操作系统对细菌进行改造对发现新型药物具有重大意义。目前，通过Red同源重组技术可以用来精确的修饰细菌的基因组。前期，申请人在伯克氏菌中构建了高效的同源重组系统，该系统包含三个同源重组操纵子，其中操纵子ETh1h2e_YI23在Burkholderiaglumae PG1中具有非常高的同源重组效率，并且利用该系统在其他伯克氏菌中进行了基因组挖掘发现了一系列新的化合物。
[0003]Burkholderiathailandensis E264是一株革兰氏阴性菌，其基因组大约为6.7Mbp，含有两个染色体，GC含量为67.6％。antiSMASH软件分析，其含有20个天然产物生物合成基因簇，这些基因簇能够编码表达各种各样的不同类型的化合物，包括非核糖体肽类、聚酮类、萜类等，其中产量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株高产组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228的工程菌株，其特征在于：该工程菌株命名为工程菌株E264Δtdp::R
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tdp
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dep，其基因型为：Burkholderia thailandensis E264Δtdp、阿泊拉霉素抗性基因、tdpR、tdpA、tdpB、tdpC1、tdp
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depDE、tdpF、tdpG、tdpH、tdpI和tdpJ，是利用敲除了thailandepsin的完整基因簇并在相应位置添加了attB位点构建的底盘菌Burkholderia thailandensis E264Δtdp为出发菌株，通过位点特异性重组将FK228的基因簇R
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tdp
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dep整合到底盘菌E264Δtdp原本表达thailandepsin的位置获得。2.权利要求1所述高产组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228的工程菌株的构建方法，步骤是：(1)利用同源重组系统ETh1h2e_YI23对Burkholderia thailandensis E264中thailandepsin的生物合成基因簇进行敲除；(2)利用PheS反向筛选结合同源重组技术，将attB位点放置在thailandepsin的生物合成基因簇敲除的位置，构建得到底盘菌，命名为Burkholderia thailandensis E264Δtdp；(3)在构建的质粒p15A
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cm
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R
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tdp
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dep中插入位点特异性重组元件，构建得到表达质粒，命名为p15A

【专利技术属性】
技术研发人员：李瑞娟，宫恺，王茂芹，宋超逸，张友明，符军，李爱英，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：