一种基于DNA凝胶的铅离子快速检测方法技术

本发明专利技术涉及一种基于DNA水凝胶的铅离子快速检测方法。所述检测方法包括：1)聚丙烯酰胺

【技术实现步骤摘要】
一种基于DNA凝胶的铅离子快速检测方法


[0001]本专利技术提供了一种基于DNA凝胶的铅离子快速检测方法，属于有害金属检测


技术介绍

[0002]铅离子(Pb
2+
)是一种有毒的重金属离子，铅离子(Pb
2+
)具有严重的生物毒性且难以自然降解，其经过食物链不断富集，最终进入人体，危害人体健康。因此，加强铅离子的检测在医药、环境、食品等领域都有十分重要的意义。
[0003]刺激响应型的DNA水凝胶作为一种生物传感器被广泛关注，具有便携、易于储存、易于实现多种信号读出，且高灵敏度的优点。这种水凝胶大多以高分子作为骨架，以功能化DNA实现交联，可以广泛用于多种靶标检测，如小分子、离子、蛋白等。
[0004]现有检测方法有利用DNA水凝胶与金纳米棒结合发展了一种新型可视化检测方法，利用比色法或者紫外
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可见光谱可实现对50nM Pb
2+
的即时检测，还有利用DNA水凝胶与金纳米颗粒比色检测10nM铅离子的气动芯片，通过检测观察距离可实现对2.6nM Pb本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于DNA凝胶的铅离子快速检测方法，其特征在于，包括步骤如下：(1)聚丙烯酰胺
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DNA偶联物的制备：将底物链strand A、丙烯酰胺单体母液和超纯水振荡混合均匀，同时进行第一次吹氮气，然后加入引发剂，在20～30℃下反应4～8min，同时进行第二次吹氮气；将反应产物经超滤和吹干后重新溶解于Tris
‑
乙酸缓冲液中，得到P
‑
SA偶联物；再按照相同的方法处理底物链strand B，得到P
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SB偶联物；其中，所述底物链strand A(SA)的序列为5
’‑
Acrydite
‑
CTGTGAAAATGTGG
‑3’
；所述底物链strand B(SB)的序列为5
’‑
Acrydite
‑
ATGTGTTTTTGTAG
‑3’
；(2)DNA水凝胶的合成：将底物链Substrate strand和底物链GR
‑
5DNAzyme strand溶解于Tris
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乙酸缓冲液，然后加入P
‑
SA偶联物和P
‑
SB偶联物，剧烈振荡混合均匀，在60～70℃下孵育1～3min，重复3次，将混合物在20～30℃下反应25～35min，得到DNA水凝胶；其中，所述底物链Substrate strand(Sub)的序列为5
’‑
CTACAAAAACACATACT CACTATrAGGAAGAGATGATCCACATTTTCACAG
‑3’
；所述底物链GR
‑
5DNAzyme strand(Dzy)的序列为5
’‑
ATCTCTGAAGTAGCGCCGCCGTATAGT
‑3’
；(3)标准曲线的绘制：用Tris
‑
乙酸缓冲液配制梯度浓度的铅离子溶液，然后向梯度浓度的铅离子溶液中加入DNA水凝胶，在20～30℃下反应25～35min，取8～12μL反应产物滴加在试纸条上，爬行4～6min，测量反应产物在试纸条上的移动...

【专利技术属性】
技术研发人员：于丽，刘金鹏，台文君，高珊，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：